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JoVE Journal Biology
Xenopus Oocytes: Optimized Methods for Microinjection, Removal of Follicular Cell Layers, and Fast Solution Changes in Electrophysiological Experiments

Xenopus Oócitos: Métodos otimizados para microinjeção, remoção de camadas de células foliculares e rápidas mudanças Solução em experimentos eletrofisiológicos

Full Text
20,989 Views
07:24 min
December 31, 2016

DOI: 10.3791/55034-v

Maria C. Maldifassi*1, Nisa Wongsamitkul*1, Roland Baur1, Erwin Sigel1

1Institute of Biochemistry and Molecular Medicine,University of Bern

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Procedimentos otimizados para o isolamento de folículos únicos, microinjeções de RNA citoplasmático, remoção de camadas de células circundantes e expressão de proteínas em oócitos de Xenopus são descritos. Além disso, é apresentado um método simples para mudanças rápidas de solução em experimentos eletrofisiológicos com canais iônicos dependentes de ligantes.

O objetivo geral deste procedimento é expressar novas proteínas, como canais iônicos em oócitos de Xenopus. Esse método pode ajudar a responder a perguntas-chave em qualquer campo que exija um sistema de expressão funcional. As principais vantagens das variações dessa técnica são a velocidade, confiabilidade e melhor sobrevida dos oócitos.

Este método pode fornecer informações sobre o funcionamento dos canais iônicos. Além disso, pode ser aplicado ao estudo de qualquer outra proteína. Tivemos a ideia para este método pela primeira vez quando percebemos que os métodos clássicos resultavam em uma baixa taxa de sobrevivência de oócitos.

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