Name: Microscopia eletrônica de transmissão de líquido-celular para rastreamento auto-montagem de nanopartículas (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-10-16T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 39 s
Description: Aprenda a usar microscopia eletrônica de transmissão de célula líquida para rastrear a auto-montagem de nanopartículas em tempo real. Este método permite observar movimentos individuais invisíveis em técnicas convencionais.

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Agradecemos o Prof A. Paul Alivisatos da Universidade da Califórnia, Berkeley e Prof Taeghwan Hyeon na Universidade Nacional de Seul para a discussão útil. Este trabalho foi apoiado pela IBS-R006-D1. W.C.L. agradece o apoio do fundo de pesquisa da Universidade de Hanyang (HY-2015-N).

1. síntese de nanopartículas <ol><li>síntese de nanopartículas de platina <ol><li>combinar 17,75 mg de hexachloroplatinate(IV) de amónio (NH 4) 2 Pt (IV) Cl 6, 3,72 mg de tetrachloroplatinate(II) de amónio (NH 4) 2 Pt (II) Cl 4, 115,5 mg de brometo de tetrametilamónio, 109 mg de poly(vinylpyrrolidone) (MW: 29.000) e 10 mL de glicol de etileno com uma barra de agitação em um balão de fundo redondo pescoço 3-100 mL equipado com um septo de borracha.</li>
		<li>Equipar o balão com um condensador de refluxo e expurgo sob vácuo. Agitar a mistura de reação com uma barra de agitação magnética a 1.000 rpm.</li>
		<li>Aquecer a mistura de reação a 180 ° C, em um manto de aquecimento, a uma taxa de 10 ° C/min sob um fluxo de argônio.</li>
		<li>Manter a temperatura (180 ° C) por 20 min. A solução torna-se uma cor marrom escura.</li>
		<li>Retirar o frasco da lareira aquecimento para permiti-lo arrefecer à temperatura ambiente.</li>
		<li>Transferir o produto para um tubo de centrífuga de 50 mL. Adicionar 30 mL de acetona ao produto para precipitar as nanopartículas e centrifugar a amostra a 2.400 x g durante 10 min. 
		Nota: Para a segurança, este processo deve ser executado em uma coifa.</li>
		<li>Desprezar o sobrenadante e re-dispersar o precipitado preto com 10 mL de etanol.</li>
		<li>Precipitar o produto com 30 mL de tolueno e centrifugar a suspensão de 2.400 x g durante 10 min. descartar o sobrenadante e re-dispersar o precipitado preto com 10 mL de etanol. Repita este processo 3 vezes.</li>
		<li>Adicionar 5 mL de oleylamine para as nanopartículas de platina e a dispersão de transferência para um balão de fundo redondo de 100 mL. A dispersão durante a noite, sob agitação magnética a 1.000 rpm, para permitir que a reação de troca de ligante ocorrer de refluxo.</li>
		<li>Centrifugar as nanopartículas ligand-trocaram a 10.000 x g durante 30 min para separá-los da solução.</li>
		<li>Desprezar o sobrenadante e dispersar as nanopartículas de platina em 10 mL de solvente hidrofóbico, tais como tolueno, hexano, clorofórmio ou.</li>
	</ol></li> <li>Síntese de nanopartículas de Seleneto de chumbo <ol><li>preparação de chumbo oleato de <ol><li>combinar 758 mg de acetato de chumbo trihidratado (Pb(Ac) 2 ·3H 2 O), 2,5 mL de ácido oleico e 10 mL de éter difenílico com uma barra de agitação num balão de fundo redondo de 3-pescoço 100 mL equipado com um septo de borracha.</li>
			<li>Equipar o balão com um condensador de refluxo.</li>
			<li>Desgaseificar a mistura a 70 ° C, sob condição de vácuo para 2h e mexa com uma barra de agitação magnética a 1.000 rpm.</li>
			<li>Purgar o balão com argônio e depois resfriá-lo à temperatura ambiente.</li>
		</ol></li> <li>Preparação de selenieto de trioctylphosphine (TOPSe) <ol><li>em um recipiente separado, combinar 474 mg de selênio e 6 mL de trioctylphosphine (topo) sob atmosfera inerte, usando uma caixa de luvas para evitar a exposição dos reagentes para ar.</li>
			<li>Dissolver o pó de selênio no topo por ultrasonication a 110 W, 40KHz e misture usando um misturador do vortex, até que a solução torna-se visivelmente transparente.</li>
		</ol></li> <li>Num balão de fundo redondo de 3-pescoço separado 250ml, desgaseificar 15 mL de éter difenílico a 120 ° C, sob condição de vácuo com agitação magnética a 1.000 rpm por 30 min.</li>
		<li>Limpar o balão com argônio e em seguida aqueça o éter difenil-230 ° C.</li>
		<li>Rapidamente injetar tanto o oleato de chumbo e as soluções de TOPSe o éter difenil pré-aquecido. A temperatura vai cair em certa medida após a injeção. Definir a temperatura de envelhecimento a 170 ° C.</li>
		<li>Manter a temperatura da mistura a 170 ° C por 10 min com agitação vigorosa para permitir o crescimento de nanopartículas de Seleneto de chumbo para ocorrer.</li>
		<li>Retirar o frasco da lareira aquecimento para permiti-lo arrefecer à temperatura ambiente.</li>
		<li>Preparar dois tubos de centrífuga de 50 mL e dividir o produto em volumes iguais e transferir para os tubos. Adicionar 30 mL de etanol para cada tubo para precipitar as nanopartículas e centrifugar a suspensão de 2.400 x g durante 10 min.</li>
		<li>Desprezar o sobrenadante e re-dispersar o precipitado preto com 10 mL de tolueno.</li>
		<li>Precipitar o produto com 30 mL de etanol e centrifugar a suspensão de 2.400 x g durante 10 min. descartar o sobrenadante e re-dispersar o precipitado preto com 10 mL de tolueno. Repita este processo 3 vezes.</li>
		<li>Desprezar o sobrenadante e dispersar as nanopartículas de Seleneto de chumbo em 10 mL de solvente hidrofóbico, tais como tolueno, hexano, clorofórmio ou.</li>
	</ol></li></ol> 2. Fabricação de células de líquido <ol><li>líquido-célula de nitreto de silício ( Figura 3a ) <ol><li>deposição de uma camada de nitreto de silício <ol><li>depositar um filme de nitreto de silício de baixa tensão para 100 wafers de silício µm de espessura (4 polegadas) por deposição de vapor químico de baixa pressão (LPCVD) a 835 ° C e uma pressão de 140 mTorr com um fluxo de 100 diclorossilano sccm e amônia 50 sccm. Controlar a espessura da camada de nitreto de silício para ser ~ 25 nm, variando o tempo de deposição. A taxa de deposição é 2.5-3.0 nm/min, mas varia ligeiramente para cada CVD.</li>
		</ol></li> <li>Superior e inferior de fichas Nota: consulte as 25 para uma descrição detalhada do processo de microfabrication de referência.
		<ol><li>Spin casaco 10ml de fotorresiste positiva sobre a bolacha de nitreto/silicone do silicone a 3.000 rpm por 30 s, usando o fotorresiste suficiente para molhar a bolacha completamente. 
			Nota: Wafers de silício ultrafinos são facilmente quebrados durante a fiação. Geralmente atribuímos a bolacha ultrafino em outra bolacha de silicone com uma espessura de 500 µm usando fotorresiste para evitar a ruptura. Após o spin-revestimento, a bolacha fina é separadoda do wafer grosso por imersão em acetona. Esta técnica também pode ser usada no processo de seguir para o revestimento de rotação em pastilhas de silício ultrafinos.</li>
			<li>Asse a bolacha em um prato quente a 85 ° C por 60 s. 
			Nota: Não assar o wafer preparado em temperaturas de &gt; 110 ° C. bicarbonato o fotorresiste temperaturas elevadas causará o fotorresiste mudar de um positivo para um negativo fotorresiste.</li>
			<li>Expor o wafer fotorresiste revestido de luz ultravioleta (365 nm) por 10 s através de uma máscara de cromo ( Figura 1a).</li>
			<li>Mergulhar a bolacha fotorresiste revestido em 50 mL de solução de desenvolvedor para 40 s. Mergulhe a bolacha desenvolvida em 50 mL de água desionizada para 1 min lavar a bolacha. Repita o processo de lavar duas vezes.</li>
			<li>Etch o nitreto de silício por 1 min, usando um gravador de íon reativo com um fluxo de 50 sccm de hexafluoreto de enxofre.</li>
			<li>Imergir o chip superior e inferior chip na acetona por 2 min remover o fotorresiste. Agite o prato à mão para remover eficazmente a fotorresiste.</li>
			<li>Etch o silício com uma solução aquosa de hidróxido de potássio (30 mg/mL) a 85 ° C para 1,5 a 2 h. usa um banho de água para garantir que a solução de gravura tem um perfil de temperatura uniforme. Desigual temperatura conduzirá a algumas áreas sendo excessivamente etched, enquanto alguns estão gravadas incompleta.</li>
			<li>Quando a janela aparece para ser completamente gravado pelo olho despido, parar a gravura e levar o celular fora a solução de gravura. Incline o celular quando removê-lo a partir da solução de condicionamento para evitar a possibilidade da janela sendo quebrada pela flutuabilidade, que pode ocorrer se levantado horizontalmente.</li>
			<li>Repita estes procedimentos com uma máscara para o chip de fundo ( Figura 1b). 
			Nota: Como o windows do chip superior e inferior são muito finos, cerca de 25 nm, eles são muito frágeis. Portanto, extremo cuidado deve ser tomado ao manusear. A janela lateral deve sempre ser virado para cima quando o chip é repousava sobre uma superfície.</li>
		</ol></li> <li>Superior e inferior de fichas de ligação <ol><li>Spin coat 10ml de fotorresiste positiva sobre a bolacha de nitreto/silicone do silicone a 3.000 rpm por 30 s.</li>
			<li>Asse a hóstia num prato aquecido a 90 ° C por 60 s.</li>
			<li>Expor o wafer fotorresiste revestido de luz ultravioleta (365 nm) por 10 s através de uma máscara de cromo ( Figura 1C).</li>
			<li>Mergulhar a bolacha fotorresiste revestido em 50 mL de solução de desenvolvedor para 40 s. Mergulhe a bolacha desenvolvida em 50 mL de água desionizada para 1 min lavar a bolacha. Repita o processo de lavar duas vezes.</li>
			<li>Depósito ~ 100 nm espessa camada de índio para o chip de fundo usando um evaporador térmico. A camada de índio é usada como um material de selagem e um espaçador.</li>
			<li>Imergir o chip na acetona por 2 min remover o fotorresiste. Agite o prato à mão para remover eficazmente a fotorresiste.</li>
			<li>Alinhar os chips inferior e superior usando um alinhador e uni-los em 100 ° C.</li>
		</ol></li></ol></li> <li>Líquido-célula de silício ( Figura 3b ) <ol><li>preparação de fichas superior e inferior <ol><li>utilizar wafers de silício-em-isolador (SOI) p-tipo com espessuras de camada de 100 nm, 400 nm e 600 µm para o silício superior, enterraram de SiO 2 e manipulação de silício camadas, respectivamente.</li>
			<li>Executar oxidação molhada de wafer SOI em uma fornalha de oxidação a 950-1100 ° C para crescer uma camada de óxido de silício, com uma espessura de 170 nm.</li>
			<li>Etch o óxido de silício por mergulhando a bolacha SOI um óxido tamponado condicione a solução (BOE) em temperatura ambiente por 2 min, que é um condicionador molhado de óxido de silício. O objetivo das etapas 2.2.1.2 e 2.2.1.3 é reduzir a espessura da camada superior de silício do wafer SOI de 25 nm.</li>
			<li>Depositar uma camada de nitreto de silício de baixa tensão com uma espessura de 25 nm para as bolachas SOI (4 polegadas) por LPCVD usando as mesmas condições de processo como na etapa 2.1.1.1.</li>
			<li>o nitreto de silício, usando os mesmos processos de padrão e mascarar os padrões como em passos 2.1.2.1 - 2.1.2.4.</li>
			<li>Mergulhe as bolachas na acetona por 2 min remover o fotorresiste. Agite o prato à mão para remover eficazmente a fotorresiste.</li>
			<li>Etch o óxido de silício com a solução BOE por 30 s.</li>
			<li>Etch o silício com uma solução aquosa de hidróxido de potássio (500 mg/mL) a 80 ° C, de 7-12 h trimetilamina solução aquosa de hidróxido (ouvido) também podem ser usados para a gravura de silício.</li>
			<li>Etch o nitreto de silício com ácido fosfórico a 85% a 160 ° C por 10 min.</li>
			<li>Etch, o óxido de silício com a solução BOE em temperatura ambiente por 3 min.</li>
			<li>Repita os procedimentos dos passos 2.2.1.1 - 2.2.1.10 com uma máscara para o chip de fundo ( Figura 1b).</li>
		</ol></li> <li>Superior e inferior de fichas de ligação <ol><li>Spin coat 10ml de fotorresiste positiva sobre a bolacha de nitreto/silicone do silicone a 3.000 rpm por 30 s.</li>
			<li>Asse a hóstia num prato aquecido a 90 ° C por 60 s.</li>
			<li>Expor o wafer fotorresiste revestido de luz ultravioleta (365 nm) por 10 s através de uma máscara de cromo ( Figura 1C).</li>
			<li>Mergulhar a bolacha fotorresiste revestido em 50 mL de solução de desenvolvedor para 40 s. Mergulhe a bolacha desenvolvida em 50 mL de água desionizada para 1 min lavar a bolacha. Repita o processo de lavar duas vezes.</li>
			<li>Depósito ~ 100 nm espessa camada de índio para o chip de fundo usando um evaporador térmico. A camada de índio é usada como um material de selagem e um espaçador.</li>
			<li>Imergir o chip na acetona por 2 min remover o fotorresiste. Agite o prato à mão para remover eficazmente a fotorresiste.</li>
			<li>Alinhar os chips inferior e superior usando um alinhador e uni-los em 100 ° C.</li>
		</ol></li></ol></li></ol> 3. Líquido-célula TEM <ol><li>solução de carregamento <ol><li>Adicionar 20 µ l da dispersão de nanopartículas (protocolo 1.1 e 1.2) em 5 mL de um frasco e seco no ar durante 10 min. dispersão de nanopartículas em uma mistura de solvente (1 mL de o-diclorobenzeno, 250 µ l de pentadecane e 10 µ l de oleylamine). 
		Nota: Secagem sob condições extremas, tais como alta temperatura, baixa pressão e para durações prolongadas pode resultar em dispersões de nanopartículas pobre. Desde que as interações ligante-para-partícula são dinâmicas, há uma grande probabilidade da aglomeração de partículas após o desprendimento do ligante sob condições extremas. Desde que o-diclorobenzeno, pentadecane e oleylamine têm pressões de vapor diferentes, o processo de secagem deve ser efectuado imediatamente antes do processo de carregamento para manter a proporção de solvente constante.</li>
		<li>Inspecionar o líquido-célula utilizando microscópio óptico. 
		Nota: Se qualquer uma das janelas de uma líquido-célula estão quebradas, não use o celular.</li>
		<li>Carga 100 ~ nL da dispersão de nanopartículas em reservatórios ( Figura 2a e 2b) da célula de líquido. Um injetor equipado com um capilar ultrafino ( Figura 2C) pode ser usado para carregar a pequena quantidade de dispersão em reservatórios da célula-líquido efetivamente. 
		Nota: em geral, a quantidade injetada de dispersão de nanopartículas excede a capacidade do reservatório. Se a dispersão estouros do reservatório, a cela de um líquido não pode selar completamente. Portanto, qualquer dispersão transbordando fora do reservatório deve ser absorvido pela ponta de um filtro de papel cortado em forma de um leque. Evitar o contacto com a janela durante absorção.</li>
		<li>Expor a cela de líquido para o ar durante 10 minutos secar o o-diclorobenzeno.</li>
		<li>Aplicar graxa vácuo ao lado de uma grade de cobre abertura com um tamanho de 2 mm e um tamanho do furo de 600 µm e cobrir a líquido-célula com o lado untado da grade abertura para criar um ambiente selado. 
		Nota: Graxa de vácuo depositada na janela grandemente reduz a resolução de temperatura. Assim, a falha para coincidir com o buraco da grade cobre abertura com a janela da célula na primeira tentativa não deve ser corrigida; em vez disso, a célula deve ser descartada e um novo preparado.</li>
	</ol></li> <li>Medição de temperatura <ol><li>colocar a cela de um líquido em um suporte de temperatura padrão. A cela de um líquido é projetada para se encaixar em um padrão suporte. 
		Nota: Usar luvas para evitar contaminação do titular TEM.</li>
		<li>Definir a temperatura no modo de aquisição de imagem contínua. Capturar imagens de temperatura em uma tensão de aceleração de 200 kV, com uma densidade de corrente de ~ 700/m 2. 
		Nota: Verifique frequentemente o nível de pressão de temperatura. Se o nível de pressão é anormal, pare imediatamente de imagem e remover o titular da câmara TEM tão rapidamente quanto possível. O baixo contraste de TEM o líquido-célula provoca dificuldade em focar a imagem. Bom alinhamento e focalização podem ser realizadas facilmente por um foco inicial grosseiro na borda da janela. A taxa de secagem pode ser controlada alterando a densidade de corrente. A taxa de secagem 2D pode ser medida pelo controle do tamanho dos patches secagem em evolução. No entanto, é difícil quantitaxa de FY a secagem em termos de volume.</li>
		<li>Abrir as imagens de temperatura originais usando o pacote de software ImageJ. Selecione o ícone de multi-ponto do programa e atribuir os centros de todas as nanopartículas individuais da imagem e então extrair o x e y coordenadas das partículas selecionadas.</li>
		<li>Calcular a função de distribuição radial (RDF): 
		<img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/56335/56335eq1.jpg"> onde r é a distância interpartícula, N é o número de partículas, A é a área coberta pelas partículas, ρ é a densidade de área 2D de partículas (N / A), <img alt="Equation 2" src="/files/ftp_upload/56335/56335eq2.jpg"> é o vetor posição da partícula j a partícula k e δ (r) é a função delta de Dirac. Usamos <img alt="Equation 3" src="/files/ftp_upload/56335/56335eq3.jpg"> onde um = 0.8 nm como a função delta de Dirac para o cálculo realista.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>

<ol><li>Shevchenko, E. V., Talapin, D. V., Kotov, N. A., O'Brien, S., Murray, C. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structural+Diversity+in+Binary+Nanoparticle+Superlattices%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Structural Diversity in Binary Nanoparticle Superlattices.</a> Nature. 439, 55-59 (2006).</li>
<li>Talapin, D. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quasicrystalline+Order+in+Self-Assembled+Binary+Nanoparticle+Superlattices%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Quasicrystalline Order in Self-Assembled Binary Nanoparticle Superlattices.</a> Nature. 461, 964-967 (2009).</li>
<li>Evers, W. H., Friedrich, H., Filion, L., Dijkstra, M., Vanmaekelbergh, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Observation+of+a+Ternary+Nanocrystal+Superlattice+and+Its+Structural+Characterization+by+Electron+Tomography%5BTitle%5D)+AND+%22Angew.+Chem.%2C+Int.+Ed%22%5BJournal%5D)">Observation of a Ternary Nanocrystal Superlattice and Its Structural Characterization by Electron Tomography.</a> Angew. Chem., Int. Ed. 48, 9655-9657 (2009).</li>
<li>Maillard, M., Motte, L., Pileni, M. P. <a target="_blank" href="http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/1521-4095(200102)13:3%3C200::AID-ADMA200%3E3.0.CO;2-P/full">Rings and Hexagons Made of Nanocrystals.</a> Adv. Mater. 13, 200-204 (2001).</li>
<li>Sztrum, C. G., Rabani, E. <a target="_blank" href="http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/adma.200501408/abstract">Out-of-Equilibrium Self-Assembly of Binary Mixtures of Nanoparticles.</a> Adv. Mater. 18, 565-571 (2006).</li>
<li>Han, W., Lin, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Learning+From+%26%2334%3Bcoffee+Rings%26%2334%3B%3A+Ordered+Structures+Enabled+by+Controlled+Evaporative+Self-Assembly%5BTitle%5D)+AND+%22Angew.+Chem.%2C+Int.+Ed%22%5BJournal%5D)">Learning From &#34;coffee Rings&#34;: Ordered Structures Enabled by Controlled Evaporative Self-Assembly.</a> Angew. Chem., Int. Ed. 51, 1534-1546 (2012).</li>
<li>Bigioni, T. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Kinetically+Driven+Self+Assembly+of+Highly+Ordered+Nanoparticle+Monolayers%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Mater%22%5BJournal%5D)">Kinetically Driven Self Assembly of Highly Ordered Nanoparticle Monolayers.</a> Nat. Mater. 5, 265-270 (2006).</li>
<li>Govor, L. V., Reiter, G., Parisi, J., Bauer, G. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Self-Assembled+Nanoparticle+Deposits+Formed+at+the+Contact+Line+of+Evaporating+Micrometer-Size+Droplets%5BTitle%5D)+AND+%22Phys.+Rev.+E%22%5BJournal%5D)">Self-Assembled Nanoparticle Deposits Formed at the Contact Line of Evaporating Micrometer-Size Droplets.</a> Phys. Rev. E. 69, 61609(2004).</li>
<li>Kletenik-Edelman, O., et al. <a target="_blank" href="http://pubs.acs.org/doi/abs/10.1021/jp709583u">Drying-Mediated Hierarchical Self-Assembly of Nanoparticles: A Dynamical Coarse-Grained Approach.</a> J. Phys. Chem. C. 112, 4498-4506 (2008).</li>
<li>Kletenik-Edelman, O., Sztrum-Vartash, C. G., Rabani, E. <a target="_blank" href="http://pubs.rsc.org/en/content/articlelanding/2009/jm/b817439c">Coarse-Grained Lattice Models for Drying-Mediated Self-Assembly of Nanoparticles.</a> J. Mater. Chem. 19, 2872-2876 (2009).</li>
<li>Rabani, E., Reichman, D. R., Geissler, P. L., Brus, L. E. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/14628047">Drying-mediated self-assembly of nanoparticles.</a> Nature. 426, 271-274 (2003).</li>
<li>Loubat, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Growth+and+Self-Assembly+of+Ultrathin+Au+Nanowires+into+Expanded+Hexagonal+Superlattice+Studied+by+in+Situ+SAXS%5BTitle%5D)+AND+%22Langmuir%22%5BJournal%5D)">Growth and Self-Assembly of Ultrathin Au Nanowires into Expanded Hexagonal Superlattice Studied by in Situ SAXS.</a> Langmuir. 30, 4005-4012 (2014).</li>
<li>Connolly, S., Fullam, S., Korgel, B., Fitzmaurice, D. <a target="_blank" href="http://pubs.acs.org/doi/abs/10.1021/ja974273e">Time-Resolved Small-Angle X-Ray Scattering Studies of Nanocrystal Superlattice Self-Assembly.</a> J. Am. Chem. Soc. 120, 2969-2970 (1998).</li>
<li>Lu, C., Akey, A. J., Dahlman, C. J., Zhang, D., Herman, I. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Resolving+the+Growth+of+3D+Colloidal+Nanoparticle+Superlattices+by+Real-Time+Small-Angle+X-Ray+Scattering%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Chem.+Soc%22%5BJournal%5D)">Resolving the Growth of 3D Colloidal Nanoparticle Superlattices by Real-Time Small-Angle X-Ray Scattering.</a> J. Am. Chem. Soc. 134, 18732-18738 (2012).</li>
<li>Zheng, H., Claridge, S. A., Minor, A. M., Alivisatos, A. P., Dahmen, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nanocrystal+Diffusion+in+a+Liquid+Thin+Film+Observed+by+in+Situ+Transmission+Electron+Microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Nano+Lett%22%5BJournal%5D)">Nanocrystal Diffusion in a Liquid Thin Film Observed by in Situ Transmission Electron Microscopy.</a> Nano Lett. 9, 2460-2465 (2009).</li>
<li>Jungjohann, K. L., Bliznakov, S., Sutter, P. W., Stach, E. A., Sutter, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+Situ+Liquid+Cell+Electron+Microscopy+of+the+Solution+Growth+of+Au-Pd+Core-Shell+Nanostructures%5BTitle%5D)+AND+%22Nano+Lett%22%5BJournal%5D)">In Situ Liquid Cell Electron Microscopy of the Solution Growth of Au-Pd Core-Shell Nanostructures.</a> Nano Lett. 13, 2964-2970 (2013).</li>
<li>Yuk, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-Resolution+EM+of+Colloidal+Nanocrystal+Growth+Using+Graphene+Liquid+Cells%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">High-Resolution EM of Colloidal Nanocrystal Growth Using Graphene Liquid Cells.</a> Science. 336, 61-64 (2012).</li>
<li>Park, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Direct+Observation+of+Nanoparticle+Superlattice+Formation+by+Using+Liquid+Cell+Transmission+Electron+Microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Nano%22%5BJournal%5D)">Direct Observation of Nanoparticle Superlattice Formation by Using Liquid Cell Transmission Electron Microscopy.</a> ACS Nano. 6, 2078-2085 (2012).</li>
<li>Lee, W. C., Kim, B. H., Choi, S., Takeuchi, S., Park, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Liquid+Cell+Electron+Microscopy+of+Nanoparticle+Self-Assembly+Driven+by+Solvent+Drying%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Phys.+Chem.+Lett%22%5BJournal%5D)">Liquid Cell Electron Microscopy of Nanoparticle Self-Assembly Driven by Solvent Drying.</a> J. Phys. Chem. Lett. 8, 647-654 (2017).</li>
<li>Park, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((3D+Structure+of+Individual+Nanocrystals+in+Solution+by+Electron+Microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">3D Structure of Individual Nanocrystals in Solution by Electron Microscopy.</a> Science. 349, 290-295 (2015).</li>
<li>Chee, S. W., Baraissov, Z., Loh, N. D., Matsudaira, P. T., Mirsaidov, U. <a target="_blank" href="http://pubs.acs.org/doi/abs/10.1021/acs.jpcc.6b07983">Desorption-Mediated Motion of Nanoparticles at the Liquid-Solid Interface.</a> J. Phys. Chem. C. 120, 20462-20470 (2016).</li>
<li>Liu, Y., Lin, X. -M., Sun, Y., Rajh, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+Situ+Visualization+of+Self-Assembly+of+Charged+Gold+Nanoparticles%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Chem.+Soc%22%5BJournal%5D)">In Situ Visualization of Self-Assembly of Charged Gold Nanoparticles.</a> J. Am. Chem. Soc. 135, 3764-3767 (2013).</li>
<li>Verch, A., Pfaff, M., de Jonge, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exceptionally+Slow+Movement+of+Gold+Nanoparticles+at+a+Solid%2FLiquid+Interface+Investigated+by+Scanning+Transmission+Electron+Microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Langmuir%22%5BJournal%5D)">Exceptionally Slow Movement of Gold Nanoparticles at a Solid/Liquid Interface Investigated by Scanning Transmission Electron Microscopy.</a> Langmuir. 31, 6956-6964 (2015).</li>
<li>Sutter, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+Situ+Microscopy+of+the+Self-Assembly+of+Branched+Nanocrystals+in+Solution%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Commun%22%5BJournal%5D)">In Situ Microscopy of the Self-Assembly of Branched Nanocrystals in Solution.</a> Nat. Commun. 7, 11213(2016).</li>
<li>Niu, K. -Y., Liao, H. -G., Zheng, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Revealing+Dynamic+Processes+of+Materials+in+Liquid+Using+Transmission+Electron+Microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Revealing Dynamic Processes of Materials in Liquid Using Transmission Electron Microscopy.</a> J. Vis. Exp. (70), e50122(2012).</li>
<li>Hermannsdörfer, J., de Jonge, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Studying+Dynamic+Processes+of+Nano-sized+Objects+in+Liquid+using+Scanning+Transmission+Electron+Microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Studying Dynamic Processes of Nano-sized Objects in Liquid using Scanning Transmission Electron Microscopy.</a> J. Vis. Exp. (120), e54943(2017).</li>
<li>Tsung, C. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sub-10+nm+Platinum+Nanocrystals+with+Size+and+Shape+Control%3A+Catalytic+Study+for+Ethylene+and+Pyrrole+Hydrogenation%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Chem.+Soc%22%5BJournal%5D)">Sub-10 nm Platinum Nanocrystals with Size and Shape Control: Catalytic Study for Ethylene and Pyrrole Hydrogenation.</a> J. Am. Chem. Soc. 131, 5816-5822 (2009).</li>
<li>Cho, K. S., Talapin, D. V., Gaschler, W., Murray, C. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Designing+PbSe+Nanowires+and+Nanorings+through+Oriented+Attachment+of+Nanoparticles%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Chem.+Soc%22%5BJournal%5D)">Designing PbSe Nanowires and Nanorings through Oriented Attachment of Nanoparticles.</a> J. Am. Chem. Soc. 127, 7140-7147 (2005).</li>
<li>Manthiram, K., Beberwyck, B. J., Talapin, D. V., Alivisatos, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Seeded+Synthesis+of+CdSe%2FCdS+Rod+and+Tetrapod+Nanocrystals%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Seeded Synthesis of CdSe/CdS Rod and Tetrapod Nanocrystals.</a> J. Vis. Exp. (82), e50731(2013).</li>
<li>Woehl, T. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+Procedures+to+Mitigate+Electron+Beam+Induced+Artifacts+During+in+situ+Fluid+Imaging+of+Nanomaterials%5BTitle%5D)+AND+%22Ultramicroscopy%22%5BJournal%5D)">Experimental Procedures to Mitigate Electron Beam Induced Artifacts During in situ Fluid Imaging of Nanomaterials.</a> Ultramicroscopy. 127, 53-63 (2013).</li>
<li>Shin, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Growth+Dynamics+and+Gas+Transport+Mechanism+of+Nanobubbles+in+Graphene+Liquid+Cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Commun%22%5BJournal%5D)">Growth Dynamics and Gas Transport Mechanism of Nanobubbles in Graphene Liquid Cells.</a> Nat. Commun. 6, 6068(2015).</li>
</ol>

Os autores não têm nada para divulgar.

Nanopartículas de platina com um tamanho de 7 nm foram sintetizados através da redução de hexachloroplatinate de amónio (IV) e de amónio tetrachloroplatinate (II) usando poli (vinilpirrolidona) (PVP) como um ligante e glicol de etileno como um solvente e um agente redutor27 . Realizou-se uma reação de ligante-intercâmbio com oleylamine para dispersar as partículas em um solvente hidrofóbica. Nanopartículas de Seleneto de chumbo foram sintetizadas através da decomposição térmica de chumbo-oleato co...

A auto-montagem de nanopartículas coloidais é de interesse porque ele fornece uma oportunidade para acessar propriedades físicas coletivas de nanopartículas individuais11. Um dos métodos mais eficazes de auto-montagem usado em aplicativos de dispositivo prático-escala é auto-organização das nanopartículas sobre um substrato através da evaporação de um solvente volátil6,7,8, 9 , 10 , 11. este método de evaporação do solvente é um processo de aproximações, que em grande parte é influenciado por fatores cinéticos como a taxa de evaporação e mudanças nas interações de nanopartículas-substrato. No entanto, uma vez que é difícil de estimar e controlar os fatores cinéticos, a compreensão mecanicista de nanopartículas auto-montagem por evaporação de solvente não está totalmente maduro. Embora em situ estudos de espalhamento de raios-x têm fornecido informações ensemble-média de aproximações a nanopartículas auto-montagem processo12,13,14, esta técnica não pode determinar o movimento de nanopartículas individuais, e sua associação com a trajetória global não pode ser facilmente acessada.
TEM líquido-celular é uma ferramenta emergente para acompanhar a trajetória de nanopartículas individuais, permitindo-nos compreender a homogeneidade das moções de nanopartículas e sua contribuição para ensemble comportamentos15,16, 17,18,19,20,21,22,23,24,25, 26. Temos anteriormente usado líquido-célula TEM para rastrear o movimento de nanopartículas individuais durante a evaporação do solvente, mostrando que o movimento da fronteira solvente é uma grande força motriz para indução de nanopartículas Self-assembly em um substrato18 , 19. neste documento, apresentamos experiências onde podemos observar o processo de nanopartículas auto-montagem usando líquido-célula TEM. Primeiro, podemos fornecer protocolos para a síntese de platina e levar Seleneto de nanopartículas, antes de introduzir os procedimentos de fabricação de líquido-células para TEM e como carregar nanopartículas em células da líquido. Como resultados representativos, mostramos imagens de instantâneo de filmes TEM de nanopartículas auto-montagem impulsionado por solvente de secagem. Pelo rastreamento de partículas individuais nestes filmes, podemos entender os mecanismos detalhados de solvente de secagem-mediada Self-assembly em um nível único de nanopartículas. Self-assembly, as nanopartículas de platina na janela de nitreto de silício principalmente sigam durante o movimento da evaporação solvente frente por causa das fortes forças capilares agindo sobre a fina camada de solvente. Fenômenos semelhantes foram observados também para outras nanopartículas (selenieto de chumbo) e substratos (silício), indicando que a força capilar de frente da solvente é um fator importante na migração de partículas perto de um substrato.

<table><tbody><tr><td>hexacloroplatinato de amônio (IV)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>204021</td><td></td></tr><tr><td>tetracloroplatinato de amônio (II)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>206105</td><td></td></tr><tr><td>brometo de tetrametilamônio, 98%</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>195758</td><td></td></tr><tr><td>pó de poli(vinilpirrolidona)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>234257</td><td>Mw ~29.000</td></tr><tr><td>etilenoglicol, anidro, 99,8%</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>324558</td><td></td></tr><tr><td>n-hexano, anidro, 95%</td> <td>Samchun Chem.</td><td>H0114</td><td></td></tr><tr><td>etanol, anidro, 99,5%</td> <td>Sigma-Aldrich</td><td>459836</td><td></td></tr><tr><td>oleilamina, 70%</td> <td>Sigma-Aldrich</td><td>O7805</td><td></td></tr><tr><td>Acetato de chumbo (II) de grau técnico trihidratado, 99,99%</td> <td>Sigma-Aldrich</td><td>467863</td><td></td></tr><tr><td>ácido oleico, 90%</td> <td>Sigma-Aldrich</td><td>364525</td><td></td></tr><tr><td>Éter difenílico de grau técnico, 99%</td> <td>Sigma-Aldrich</td><td>P24101</td><td>ReagentPlus</td></tr><tr><td>pó de selênio, 99,99%</td> <td>Sigma-Aldrich</td><td>229865</td><td></td></tr><tr><td>tri-n-octilfosfina, 97%</td> <td>Strem</td><td>15-6655</td><td>Tolueno sensível ao ar</td></tr><tr><td>, anidro, 99,9%</td> <td>Samchun Chem.</td><td>T2419</td><td></td></tr><tr><td>acetona 99,8%</td> <td>Daejung Chem.</td><td>1009-2304</td><td></td></tr><tr><td>hidróxido de potássio, 95%</td> <td>Samchun Chem.</td><td>P0925</td><td></td></tr><tr><td>bolachas de silício sobre isolador tipo p</td><td>Soitec</td><td>Power-SOI</td><td>para células líquidas com janelas de silício</td></tr><tr><td>hidróxido de tetrametilamônio, 25% em H2O</td><td>J.T.Baker</td><td>02-002-109</td><td></td></tr><tr><td>AZ 5214 E</td><td>AZ Electronic Materials</td><td>AZ 5214 E</td><td>Fotorest positivo</td></tr><tr><td>AZ-327</td><td>AZ Electronic Materials</td><td>AZ-327</td><td>AZ 5214 pelotas</td></tr><tr><td>99.98-99.99%</td> <td>Kurt J. Lesker Company</td><td>EVMIN40EXEB</td><td>alvo térmico</td></tr><tr><td>1,2-diclorobenzeno do evaporador do develper, pentadecano >99%</td> <td>TCI</td><td>D1116</td><td></td></tr><tr><td>, >99%</td> <td>Sigma-Aldrich</td><td>P3406</td><td></td></tr><tr><td>tamponado oxidação gravura em àgravura 7: 1</td><td>microquímicos</td><td>BOE 7-1 VLSI</td><td></td></tr><tr><td>ácido fosfórico, 85%</td> <td>Samchun Chem.</td><td>Pág. P0449</td><td></td></tr></tbody></table>

microscopia eletrônica de transmissão de líquido-celular para rastreamento auto-montagem de nanopartículas

Liquid-cell Transmission Electron Microscopy for Tracking Self-assembly of Nanoparticles

Uma dispersão de nanopartículas de secagem é uma forma versátil para criar estrutura própria montada de nanopartículas, mas o mecanismo deste processo não é totalmente compreendido. Nós rastreou as trajetórias de nanopartículas individuais usando microscopia eletrônica de transmissão de líquido-célula (TEM) para investigar o mecanismo do processo de montagem. Neste documento, apresentamos os protocolos utilizados para estudos de temperatura líquido-célula do mecanismo de auto-montagem. Primeiro, apresentamos os protocolos sintéticos detalhados para produzir tamanho uniforme platina e chumbo Seleneto de nanopartículas. Em seguida, apresentamos os processos microfabrication usados para produzir células líquidas com nitreto de silício ou silício windows e em seguida, descrever o carregamento e os procedimentos da técnica TEM líquido-célula de imagem. Várias notas são incluídas para fornecer dicas úteis para o processo inteiro, incluindo como gerenciar o windows celular frágil. Os movimentos individuais das nanopartículas controladas pela célula de líquido TEM revelaram que mudanças nos limites causadas pela evaporação solventes afetado a auto-montagem processo de nanopartículas. Os limites de solventes até nanopartículas principalmente formulário amorfo agregados, seguidos pelo achatamento dos agregados para produzir uma estrutura de self montada 2-dimensional (2D). Esses comportamentos são também observados por nanopartículas de diferentes tipos e diferentes composições de líquido-célula.

A cela de um líquido é composta de um chip de topo e um chip de fundo, que estão equipados com janelas de nitreto de silício que são transparentes para um feixe de elétrons com uma espessura de 25 nm. O chip top possui um reservatório para armazenar a solução da amostra e o solvente evaporado. As fichas são feitas por meio convencional microfabrication25de processamento. As máscaras usadas para os chips de superior e inferior são mostradas na F...

Aqui apresentamos os protocolos experimentais para a observação em tempo real de um processo Self-assembly usando microscopia eletrônica de transmissão de células líquido.

Microscopia eletrônica de transmissão de líquido-celular para rastreamento auto-montagem de nanopartículas

Drying a nanoparticle dispersion is a versatile way to create self-assembled structures of nanoparticles, but the mechanism of this process is not fully ...

O objetivo geral deste procedimento é usar microscropy eletrônico de transmissão de célula líquida para investigar o movimento de nanopartículas na fase de solução em tempo real. Este método pode ajudar a responder a questões-chave no campo da nanociência, por exemplo, sobre como as nanopartículas formam estruturas automontadas durante a secagem do solvente. A principal vantagem dessa técnica é que ela possibilita a verificação do movimento das nanopartículas no espaço e em tempo real.As implicações desta técnica de célula líquida tendem a rastrear movimentos individuais de nanopartículas que não são mostradas por métodos convencionais. Embora este método possa fornecer informações sobre a automontagem de nanopartículas, ele também pode ser aplicado em outros modelos, como fixação orientada de nanopartículas. Para iniciar o procedimento, coloque em um frasco de fundo redondo de 100 mililitros e três gargalos 17,75 miligramas de hexacloroplatinato de amônio, 3,72 miligramas de tetracloroplatinato de amônio e 115,5 miligramas de brometo de tetrametilamônio.Adicione ao frasco 109 miligramas de polivinilpirrolidona e 10 mililitros de etilenoglicol anidro. Equipar o balão com uma barra de agitação, um septo de borracha e um condensador de refluxo. Ligue o motor de agitação e, agitando a 1000 rpm, desgaseifique o balão de reação sob vácuo por uma hora.Em seguida, sob um fluxo de argônio, aqueça a mistura de reação a 180 graus Celsius a 10 graus por minuto. Mexa a mistura a 180 graus Celsius por 20 minutos e deixe a mistura esfriar até a temperatura ambiente. Transfira a mistura resfriada para um tubo de centrífuga de 50 mililitros.Adicione ao tubo 30 mililitros de acetona para precipitar as nanopartículas de platina. Centrifugue a mistura a 2400 vezes G por 10 minutos. Rejeitar o sobrenadante e dispersar o precipitado em 10 mililitros de etanol.Obtenha um wafer de silício de quatro polegadas e 100 mícrons revestido com cerca de 25 nanômetros de nitreto de silício. Carregue a fotorresistência usando um revestidor giratório. Em seguida, use fotorresistente para montar o wafer ultrafino em um wafer de silício de 500 mícrons de espessura.Gire o revestimento do wafer com 10 mililitros de fotorresistência positiva a 3000 rpm por 30 segundos. Asse o wafer a 85 graus Celsius por 60 segundos. Em seguida, cubra o wafer com uma máscara de cromo e exponha o wafer à luz de 365 nanômetros por 10 segundos.Mergulhe o wafer em 50 mililitros da solução reveladora apropriada por 40 segundos e depois em 50 mililitros de água deionizada por um minuto. Mergulhe o wafer em 50 mililitros de água deionizada por um minuto e, em seguida, coloque o wafer padronizado em um gravador de íons reativo. Gravar o nitreto de silício exposto durante um minuto.Use um banho-maria para aquecer uniformemente um recipiente com uma solução aquosa de hidróxido de potássio de 30 miligramas por litro a 85 graus Celsius. Mergulhe o wafer ultrafino no hidróxido de potássio quente por duas horas para gravar o silício exposto. Quando o silício exposto parecer ter sido completamente gravado, remova cuidadosamente o wafer da solução em um ângulo para evitar romper a janela de nitreto de silício.Repita este processo com a segunda máscara de cromo para obter os chips superior e inferior. Use a terceira máscara de cromo para padronizar espaçadores de índio no chip inferior. Alinhe os chips superior e inferior e una os chips a 100 graus Celsius.Transfira 20 microlitros da dispersão de nanopartículas preparada para um frasco de cinco mililitros. Deixar evaporar o solvente em condições ambientais durante 10 minutos. Inspecione a célula líquida sob um microscópio óptico para verificar se as janelas de nitreto de silício estão intactas.Em seguida, disperse as nanopartículas em uma mistura de um mililitro de ortodiclorobenzeno, 250 microlitros de pentadecano e 10 microlitros de oleilamina. Com a célula líquida sob o microscópio óptico, use um injetor com capilar ultrafino para carregar 100 nanolitros da dispersão nos reservatórios de células líquidas. Use papel de filtro para absorver o excesso de dispersão fora dos reservatórios.Deixe a célula descansar no ar ambiente por 10 minutos para evaporar o ortodiclorobenzeno. Em seguida, aplique graxa a vácuo em um lado de uma grade de abertura de cobre de dois milímetros com um orifício de 600 mícrons. Cubra cuidadosamente a célula líquida com a grade, tendo o cuidado de alinhar a abertura com a janela da célula líquida.Monte a célula em um suporte MET padrão e carregue a célula no instrumento. Adquira imagens no modo de aquisição contínua de imagem à medida que o solvente seca. Use o software de processamento de imagem para calcular a função de distribuição radial das partículas em cada imagem adquirida.Imagens TEM de uma suspensão de nanopartículas de platina secando em uma célula líquida de nitreto de silício mostraram as nanopartículas sendo puxadas para dentro pela frente do solvente recuada. Esse comportamento foi atribuído às fortes forças capilares da fina camada de solvente e à redução da energia livre das nanopartículas na interface do solvente. As nanopartículas inicialmente formaram aglomerados amorfos multicamadas à medida que eram reunidas.À medida que o solvente secava, os aglomerados se achatavam em uma monocamada ordenada. Essa ordenação é refletida nas funções de distribuição radial derivadas das imagens MET. A função de distribuição radial da imagem tirada após 90 segundos teve um grande pico de 8,3 nanômetros.As nanopartículas de platina cobertas de oleilamina têm cerca de 8,3 nanômetros de diâmetro, sugerindo que um número significativo de partículas foi montado o mais próximo possível. Uma vez dominada, essa técnica pode ser feita em dois dias se for executada corretamente. Geralmente, os indivíduos que são novos neste método podem ter dificuldades porque fabricar e trabalhar com a célula líquida requer diferentes níveis de otimização para diferentes nanopartículas ou composições de células líquidas.Ao tentar este procedimento, lembre-se de proteger as janelas da célula líquida de quebrar. Seguindo este procedimento, outros métodos, como a aplicação de tensões à célula líquida, podem ser realizados para responder a perguntas adicionais sobre a automontagem de nanopartículas na presença de forças externas. Após seu desenvolvimento, essa técnica abriu caminho para pesquisadores no campo da nanociência explorarem o processo de montagem de nanopartículas no mecanismo seco geral.Depois de assistir a este vídeo, você deve ter uma boa compreensão de como preparar células líquidas e medir os movimentos das nanopartículas no experimento TEM. Não se esqueça de que trabalhar com o agente KUH pode ser extremamente perigoso. Precauções como o uso de óculos de segurança devem sempre ser tomadas durante a realização deste experimento.

liquid-cell-transmission-electron-microscopy-for-tracking-self

Research

JoVE Journal

Chemistry

Química

Nós desenvolvemos uma célula independente de líquido, o que permite imagens através de líquidos, usando um microscópio electrónico de transmissão. Processos dinâmicos de nanopartículas em líquidos pode ser revelado em tempo real com sub-nanômetros resolução.

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Aqui descrevemos um procedimento para imagem de complexos virais em liquidez em resolução de nanômetros usando um microscópio eletrônico de transmissão.

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Microscopia eletrônica de transmissão de líquido-celular para rastreamento auto-montagem de nanopartículas

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