Métodos de purificação de biomoléculas baseados em cromatografia

Na bioquímica, métodos de purificação à base de cromatografia são empregados para isolar compostos de uma mistura complexa. Dois desses métodos utilizados comumente por bioquímicos são a cromatografia de exclusão de tamanho e cromatografia de afinidade. Na cromatografia de exclusão de tamanho, uma coluna repleta de contas porosas separa componentes de uma mistura baseada no tamanho. Por outro lado, a cromatografia de afinidade permite uma separação mais específica das biomoléculas usando uma coluna composta de fase estacionária, que contém ligantes específicos de alvo.

Este vídeo serve como uma introdução à exclusão de tamanho e cromatografia de afinidade, bem como aos conceitos que os governam. Um procedimento passo a passo para a purificação de uma proteína marcada por histidina por cromatografia de afinidade metálica imobilizada é descrito. Também são perfilas as aplicações para esses dois métodos cromatográficos em bioquímica e pesquisa biomédica.