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Potencial de ação óptico subtipo específico gravações em humanos induzida pluripotentes células-t...
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JoVE Journal Biology
Subtype-specific Optical Action Potential Recordings in Human Induced Pluripotent Stem Cell-derived Ventricular Cardiomyocytes

Potencial de ação óptico subtipo específico gravações em humanos induzida pluripotentes células-tronco derivadas de Cardiomyocytes Ventricular

Full Text
7,578 Views
06:59 min
September 27, 2018

DOI: 10.3791/58134-v

Alexander Goedel*1,2, Dorota M. Zawada*1, Fangfang Zhang1, Zhifen Chen3, Alessandra Moretti1,2, Daniel Sinnecker1,2

1Medical Department I, University Hospital Klinikum rechts der Isar,Technical University of Munich, 2German Centre for Cardiovascular Research (DZHK), Munich Heart Alliance, 3Beth Israel Deaconess Medical Center,Harvard Medical School

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Aqui nós apresentamos um método de potenciais de ação opticamente imagem, especificamente em pluripotentes induzidas ventricular, como células-tronco derivadas cardiomyocytes. O método baseia-se na expressão de uma proteína fluorescente sensível à tensão orientado para o promotor.

Cardiomiócitos gerados a partir de células-tronco pluripotentes induzidas ou células IPS são cada vez mais usados para responder a uma variedade de questões biológicas no campo da eletrofisiologia cardíaca. As principais vantagens desta tecnologia são que ela permite um aumento dramático no throughput, bem como gravações potenciais de ação específicas do subtipo em miócitos ventriculares, usando um elemento promotor específico ventricular. A introdução de sensores de tensão geneticamente codificados através da transdução lentiviral permite a imagem óptica de células-tronco pluripotentes induzidas pelo homem potenciais de ação cardiomiócitos derivados de células-tronco.

Comece misturando a cultura celular contendo lentivírus com meio de manutenção de cardiomiócitos, em uma proporção de um para um. Adicione brometo de hexadimetherine a uma concentração final de 8 microgramas por mililitro, para aumentar a eficiência da infecção. E substitua o meio de manutenção de cardiomiócitos no prato de cultura de cardiomiócitos derivados de células IPS, com o meio de infecção.

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