Name: In vitro Digestão de emulsões em uma única gotícula via troca multifásica de fluidos gastrointestinais simulados (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-11-18T13:40:00.000+00:00
Duration: 10 min 20 s
Description: Aprenda a simular a digestão in vitro de emulsões usando uma única gotícula e troca multifásica de fluidos gastrointestinais. Este método permite monitorar a tensão interfacial em tempo real durante todo o processo digestivo.

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Esta investigação foi financiada pelos projetos RTI2018-101309-B-C21 e PID2020-631-116615RAI00, financiados pelo MCIN/AEI/10.13039/501100011033 e pelo "FEDER Uma forma de fazer a Europa". Este trabalho foi (parcialmente) apoiado pelo Grupo de Biocoloides e Física dos Fluidos (ref. PAI-FQM115) da Universidade de Granada (Espanha).

1. Sequência de limpeza para todos os artigos de vidro utilizados na experimentação da ciência da superfície
<ol><li>Esfregue os copos com uma solução de limpeza concentrada (ver Tabela de Materiais) diluída em água (10%).</li>
	<li>Enxágue bem com uma sequência de água da torneira, propanol, água destilada e água ultrapura. Seque em uma cabine e armazene em um armário fechado até o uso.</li>
</ol>2. Preparação da amostra
<ol><li>Preparar meios digestivos artificiais de acordo com os protocolos padronizados do INFOGEST11,20 (ver Tabela de Materiais). Para mais pormenores, ver Quadro 1 e incluir pequenas adaptações aos requisitos do trabalho interfacial para evitar a contaminação por superfície ativa e a diluição das amostras (1:10)10.</li>
	<li>Prepare a solução emulsificante seguindo as etapas abaixo.<ol><li>Preparar 0,01 L de uma solução concentrada de (1 kg· L−1) emulsionante ou uma mistura de emulsionantes (ver Tabela de Materiais) num tampão inicial (Tabela 1) e manter sob agitação ligeira durante a noite.</li>
		<li>Diluir até 0,1 kg· L−1 (ou conforme necessário) para saturar a interface; atingir um pseudoplatô na tensão interfacial após 1 h de adsorção em uma área interfacial constante seguindo o relato publicado anteriormente21.</li>
		<li>Mantenha sob agitação leve por 15 minutos antes do uso.</li>
	</ol></li>
	<li>Purificar a fase de óleo.<ol><li>Prepare uma mistura de óleo vegetal (girassol, azeitona, trioleína, etc.) e resinas de metassilicato de magnésio (ver Tabela de Materiais) numa proporção de 2:1 p/p num copo grande. Manter sob agitação mecânica suave por pelo menos 3 h.</li>
		<li>Centrifugar a mistura a 8.000 x g durante 30 min à temperatura ambiente numa centrífuga comercial (ver Tabela de Materiais).</li>
		<li>Filtrar a mistura de óleo sob vácuo com um filtro de seringa (tamanho de poro de 0,2 μm) (ver Tabela de Materiais). Armazenar em frascos de âmbar limpos selados e borbulhados com nitrogênio até o uso.</li>
	</ol></li>
</ol>3. Calibração e limpeza do OCTOPUS
<ol><li>Enxaguar toda a tubulação com água ultrapura, definindo uma sequência de limpeza de ambas as seringas e todas as válvulas através de um capilar (válvulas 6/4) e para a saída externa (válvula de cor 8-azul). Execute isso pressionando o botão limpar na caixa de diálogo à esquerda (Figura 1A Suplementar).</li>
	<li>Verifique a tensão superficial7 da água à temperatura ambiente, formando uma gota de água e medindo em tempo real por 5 min (Figura suplementar 1B, C).<ol><li>Ajuste a densidade diferencial para ar-água (0,9982 kg· L−1) na caixa de diálogo esquerda, Figura suplementar 1B.</li>
	</ol></li>
	<li>Encha a cubeta limpa (vidro óptico) com 0,002 L de óleo vegetal limpo e coloque-a no suporte da cubeta na célula termostática (Figura 3).</li>
	<li>Ajuste o termostato e permita o equilíbrio da temperatura a 37 °C.</li>
	<li>Verifique a tensão interfacial da água-óleo à temperatura ambiente7.<ol><li>Defina a densidade diferencial para óleo-água vegetal (azeite: 0.800 kg· L−1) (Figura 1C Suplementar).</li>
		<li>Injete 40 μL a uma taxa de 0,5 μL·s−1 e meça em tempo real a cada segundo até o final da injeção. Este é um processo dinâmico simples (Figura 1B, D suplementar).</li>
		<li>Plote a tensão interfacial em função do volume de gotículas em uma folha de dados.</li>
		<li>Verifique se a faixa de volume da gota fornece um valor para a tensão interfacial independente do volume da gota. Plote a área interfacial em função do volume das gotículas.</li>
		<li>Programe um processo contendo duas etapas (Figura 1B Suplementar e Figura 2A Suplementar) seguindo as etapas abaixo.<ol><li>Com uma seringa interna, injete um volume contido dentro desta faixa de tensão interfacial constante.</li>
			<li>Manter a área interfacial constante no valor selecionado na etapa 3.5.4 e registrar a tensão interfacial por 5 min7.</li>
		</ol></li>
	</ol></li>
</ol>4. Programando um processo experimental em DINATEN para cada etapa digestiva
NOTA: Para obter os parâmetros do processo, consulte a Figura 1B suplementar.
<ol><li>Execute o controle inicial.<ol><li>Para a formação de gotas, injectar 10 μL (±5 μL) de solução emulsionante no capilar (válvula 6) (Figura complementar 2A).</li>
		<li>Registrar a adsorção em uma área interfacial constante 21 de 20 mm 2 (±10 mm2) por 1 h (Figura suplementar 2B).</li>
		<li>Registre a reologiadilatacional 8 (Figura suplementar 2C).<ol><li>Ajuste a amplitude de oscilação para 1,25 μL, período 10 s.</li>
			<li>Registre a adsorção na área interfacial selecionada (etapa 4.1.2) por 10 s.</li>
			<li>Repita a etapa 4.1.3 em diferentes períodos: 5 s, 20 s, 50 s e 100 s.</li>
		</ol></li>
	</ol></li>
	<li>Registre a digestão gástrica.<ol><li>Registre a adsorção21 na área interfacial selecionada por 10 s.</li>
		<li>Troca subfásica7 com líquido na valva 2 (sSGF) e enzimas gástricas (Tabela 1) (Figura suplementar 2D).<ol><li>Encha a seringa esquerda a partir da válvula 2. Injete 125 μL na válvula 6-capilar com a seringa esquerda a 5 μL·s−1.</li>
			<li>Extrair 125 μL do capilar com a seringa direita a 5 μL·s−1. Descarregue a seringa direita para sair da válvula 8. Repita as etapas 4.2.2.1-4.2.2.2 10 vezes para garantir a troca completa.</li>
		</ol></li>
		<li>Registar a adsorção21 na área interfacial seleccionada no passo 4.1.2 durante 1 h (Figura 2B suplementar).</li>
		<li>Registre a reologiadilatacional 8 (Figura suplementar 2C).<ol><li>Ajuste a amplitude de oscilação para 1,25 μL, período 10 s.</li>
			<li>Registre a adsorção da área interfacial selecionada na etapa 4.1.2 por 10 s. Repita em diferentes períodos: 5 s, 20 s, 50 s, 100 s.</li>
		</ol></li>
	</ol></li>
	<li>Registre a digestão intestinal.<ol><li>Registar a adsorção21 na área interfacial seleccionada no passo 4.1.2 durante 10 s (Figura 2B suplementar).</li>
		<li>Troca subfásica7 com líquido na valva 3 (sSIF) e enzimas intestinais/sais biliares/fosfolipídios (Tabela 1) (Figura suplementar 2D).<ol><li>Encha a seringa esquerda a partir da válvula 2. Injete 125 μL na válvula 6-capilar com a seringa esquerda a 5 μL·s−1. Extrair 125 μL do capilar com a seringa direita a 5 μL·s−1.</li>
			<li>Descarregue a seringa direita para sair da válvula 8. Repita as etapas 4.3.2.1-4.3.2.2 10 vezes para garantir a troca completa.</li>
		</ol></li>
		<li>Registar a adsorção21 na área interfacial seleccionada no passo 4.1.2 durante 1 h.</li>
		<li>Registre a reologiadilatacional 8 (Figura suplementar 2C).<ol><li>Ajuste a amplitude de oscilação para 1,25 μL, período 10 s.</li>
			<li>Registre a adsorção na área interfacial selecionada na etapa 4.1.2 por 10 s.</li>
			<li>Repita em diferentes períodos: 5 s, 20 s, 50 s, 100 s.</li>
		</ol></li>
	</ol></li>
	<li>Registre a dessorção seguindo as etapas abaixo.<ol><li>Registar a adsorção21 na área interfacial seleccionada no passo 4.1.2 durante 10 s (Figura 2B suplementar).</li>
		<li>Trocasubfásica 7 com líquido na válvula 5 (sSIF) (Tabela 1, Figura suplementar 2D).<ol><li>Encha a seringa esquerda a partir da válvula 5. Injete 125 μL na válvula 5-capilar com a seringa esquerda a 5 μL·s−1.</li>
			<li>Extrair 125 μL do capilar com a seringa direita a 5 μL·s−1. Descarregue a seringa direita para sair da válvula 8. Repita as etapas 4.4.2.1-4.4.2.2 10 vezes para garantir a troca completa.</li>
		</ol></li>
		<li>Registar a adsorção21 na área interfacial seleccionada no passo 4.1.2 durante 1 h (Figura 2B suplementar).</li>
		<li>Registre a reologiadilatacional 8 (Figura suplementar 2C).<ol><li>Manter a amplitude de 1,25 μL, período 10 s.</li>
			<li>Registre a adsorção na área interfacial selecionada na etapa 4.1.2 por 10 s.</li>
			<li>Repita a etapa 4.4.4 em diferentes períodos: 5 s, 20 s, 50 s, 100 s.</li>
		</ol></li>
	</ol></li>
</ol>5. Configurando o experimento
<ol><li>Encha os tubos de microcentrífuga com o meio de digestão artificial e conecte cada um deles à respectiva válvula pela tubulação correspondente.</li>
	<li>Encha a tubulação nas válvulas 2-5 limpando da válvula 2, válvula 3, válvula 4 e válvula 5 até a saída externa (válvula 8) (Figura suplementar 1A).</li>
	<li>Encha a tubulação na válvula 1 limpando da válvula 1 para a válvula 6-capilar 5 vezes.</li>
	<li>Coloque o capilar na fase oleosa. Carregar a seringa esquerda com válvula 1 (solução inicial, Tabela 1).</li>
	<li>Comece a processar sequencialmente a etapa 4.1-inicial, a etapa 4.2-gástrica, a etapa 4.3-intestinos e a etapa 4.4-dessorção, salvando os dados no final de cada processo.</li>
</ol>6. Cálculo dos parâmetros reológicos dilatacionais com o software de processamento de imagem CONTACTO8
NOTA: Para mais detalhes, ver Maldonado-Valderrama et al.8.
<ol><li>Carregar as imagens correspondentes à oscilação da área a uma dada frequência e amplitude (Figura suplementar 3A).</li>
	<li>Pressione Reologia (Figura Suplementar 3B) e obtenha os parâmetros dilatacionais (Figura Suplementar 3C).</li>
	<li>Copie e cole os resultados na folha de distribuição de dados.</li>
</ol>7. Plotagem dos resultados experimentais
<ol><li>Recalcule a coluna de tempo em cada uma das etapas do processo de digestão adicionando os últimos dados da hora da etapa anterior.</li>
	<li>Plote a tensão interfacial versus o tempo aditivo para cada uma das etapas do processo de digestão utilizado.</li>
	<li>Plotar a tensão interfacial/elasticidade dilatacional final e viscosidade obtidas no final de cada etapa versus a fase de digestão: inicial, digestão gástrica, digestão duodenal e dessorção.</li>
</ol>

<ol><li>McClements, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+biophysics+of+digestion%3A+Lipids%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Opinion+in+Food+Science%22%5BJournal%5D)">The biophysics of digestion: Lipids.</a> Current Opinion in Food Science. 21, 1-6 (2018).</li>
<li>McClements, D. J., Li, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structured+emulsion-based+delivery+systems%3A+Controlling+the+digestion+and+release+of+lipophilic+food+components%5BTitle%5D)+AND+%22Advances+in+Colloid+and+Interface+Science%22%5BJournal%5D)">Structured emulsion-based delivery systems: Controlling the digestion and release of lipophilic food components.</a> Advances in Colloid and Interface Science. 159 (2), 213-228 (2010).</li>
<li>Corstens, M. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Food-grade+micro-encapsulation+systems+that+may+induce+satiety+via+delayed+lipolysis%3A+A+review%5BTitle%5D)+AND+%22Critical+Reviews+in+Food+Science+and+Nutrition%22%5BJournal%5D)">Food-grade micro-encapsulation systems that may induce satiety via delayed lipolysis: A review.</a> Critical Reviews in Food Science and Nutrition. 57 (10), 2218-2244 (2017).</li>
<li>Aguilera-Garrido, A., del Castillo-Santaella, T., Galisteo-González, F., Gálvez-Ruiz, M. J., Maldonado-Valderrama, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Investigating+the+role+of+hyaluronic+acid+in+improving+curcumin+bioaccessibility+from+nanoemulsions%5BTitle%5D)+AND+%22Food+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Investigating the role of hyaluronic acid in improving curcumin bioaccessibility from nanoemulsions.</a> Food Chemistry. 351, 129301(2021).</li>
<li>Rodríguez Patino, J. M., Carrera Sánchez, C., Rodríguez Niño, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Implications+of+interfacial+characteristics+of+food+foaming+agents+in+foam+formulations%5BTitle%5D)+AND+%22Advances+in+Colloid+and+Interface+Science%22%5BJournal%5D)">Implications of interfacial characteristics of food foaming agents in foam formulations.</a> Advances in Colloid and Interface Science. 140 (2), 95-113 (2008).</li>
<li>Wilde, P. J., Chu, B. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interfacial+%26+colloidal+aspects+of+lipid+digestion%5BTitle%5D)+AND+%22Advances+in+Colloid+and+Interface+Science%22%5BJournal%5D)">Interfacial & colloidal aspects of lipid digestion.</a> Advances in Colloid and Interface Science. 165 (1), 14-22 (2011).</li>
<li>Cabrerizo-Vílchez, M. A., Wege, H. A., Holgado-Terriza, J. A., Neumann, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Axisymmetric+drop+shape+analysis+as+penetration+Langmuir+balance%5BTitle%5D)+AND+%22Review+of+Scientific+Instruments%22%5BJournal%5D)">Axisymmetric drop shape analysis as penetration Langmuir balance.</a> Review of Scientific Instruments. 70 (5), 2438-2444 (1999).</li>
<li>Maldonado-Valderrama, J., Muros-Cobos, J. L., Holgado-Terriza, J. A., Cabrerizo-Vílchez, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bile+salts+at+the+air-water+interface%3A+Adsorption+and+desorption%5BTitle%5D)+AND+%22Colloids+and+surfaces+B%3A+Biointerfaces%22%5BJournal%5D)">Bile salts at the air-water interface: Adsorption and desorption.</a> Colloids and surfaces B: Biointerfaces. 120, 176-183 (2014).</li>
<li>Maldonado-Valderrama, J., Terriza, J. A. H., Torcello-Gómez, A., Cabrerizo-Vílchez, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+digestion+of+interfacial+protein+structures%5BTitle%5D)+AND+%22Soft+Matter%22%5BJournal%5D)">In vitro digestion of interfacial protein structures.</a> Soft Matter. 9, 1043-1053 (2013).</li>
<li>Maldonado-Valderrama, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Probing+in+vitro+digestion+at+oil-water+interfaces%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Opinion+in+Colloid+and+Interface+Science%22%5BJournal%5D)">Probing in vitro digestion at oil-water interfaces.</a> Current Opinion in Colloid and Interface Science. 39, 51-60 (2019).</li>
<li>Brodkorb, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((INFOGEST+static+in+vitro+simulation+of+gastrointestinal+food+digestion%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Protocols%22%5BJournal%5D)">INFOGEST static in vitro simulation of gastrointestinal food digestion.</a> Nature Protocols. 14 (4), 991-1014 (2019).</li>
<li>del Castillo-Santaella, T., Maldonado-Valderrama, J., Molina-Bolivar, J. A., Galisteo-Gonzalez, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+cross-linker+glutaraldehyde+on+gastric+digestion+of+emulsified+albumin%5BTitle%5D)+AND+%22Colloids+and+Surfaces+B%3A+Biointerfaces%22%5BJournal%5D)">Effect of cross-linker glutaraldehyde on gastric digestion of emulsified albumin.</a> Colloids and Surfaces B: Biointerfaces. 145, 899-905 (2016).</li>
<li>Macierzanka, A., Torcello-Gómez, A., Jungnickel, C., Maldonado-Valderrama, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bile+salts+in+digestion+and+transport+of+lipids%5BTitle%5D)+AND+%22Advances+in+Colloid+and+Interface+Science%22%5BJournal%5D)">Bile salts in digestion and transport of lipids.</a> Advances in Colloid and Interface Science. 274, 102045(2019).</li>
<li>Maldonado-Valderrama, J., Torcello-Gómez, A., del Castillo-Santaella, T., Holgado-Terriza, J. A., Cabrerizo-Vílchez, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Subphase+exchange+experiments+with+the+pendant+drop+technique%5BTitle%5D)+AND+%22Advances+in+Colloid+and+Interface+Science%22%5BJournal%5D)">Subphase exchange experiments with the pendant drop technique.</a> Advances in Colloid and Interface Science. 222, 488-501 (2015).</li>
<li>Bellesi, F. A., Ruiz-Henestrosa, V. M. P., Maldonado-Valderrama, J., Del Castillo Santaella, T., Pilosof, A. M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+interfacial+in+vitro+digestion+of+protein+and+polysaccharide+oil%2Fwater+films%5BTitle%5D)+AND+%22Colloids+and+Surfaces+B%3A+Biointerfaces%22%5BJournal%5D)">Comparative interfacial in vitro digestion of protein and polysaccharide oil/water films.</a> Colloids and Surfaces B: Biointerfaces. 161, 547-554 (2018).</li>
<li>Del Castillo-Santaella, T., Sanmartín, E., Cabrerizo-Vílchez, M. A., Arboleya, J. C., Maldonado-Valderrama, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+digestibility+of+%CE%B2-lactoglobulin+by+pulsed+light+processing%3A+A+dilatational+and+shear+study%5BTitle%5D)+AND+%22Soft+Matter%22%5BJournal%5D)">Improved digestibility of β-lactoglobulin by pulsed light processing: A dilatational and shear study.</a> Soft Matter. 10 (48), 9702-9714 (2014).</li>
<li>Infantes-Garcia, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+gastric+lipid+digestion+of+emulsions+with+mixed+emulsifiers%3A+Correlation+between+lipolysis+kinetics+and+interfacial+characteristics%5BTitle%5D)+AND+%22Food+Hydrocolloids%22%5BJournal%5D)">In vitro gastric lipid digestion of emulsions with mixed emulsifiers: Correlation between lipolysis kinetics and interfacial characteristics.</a> Food Hydrocolloids. 128, 107576(2022).</li>
<li>del Castillo-Santaella, T., Cebrián, R., Maqueda, M., Gálvez-Ruiz, M. J., Maldonado-Valderrama, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessing+in+vitro+digestibility+of+food+biopreservative+AS-48%5BTitle%5D)+AND+%22Food+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Assessing in vitro digestibility of food biopreservative AS-48.</a> Food Chemistry. 246, 249-257 (2018).</li>
<li>Torcello-Gómez, A., Maldonado-Valderrama, J., Jódar-Reyes, A. B., Cabrerizo-Vílchez, M. A., Martín-Rodríguez, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pluronic-covered+oil-water+interfaces+under+simulated+duodenal+conditions%5BTitle%5D)+AND+%22Food+Hydrocolloids%22%5BJournal%5D)">Pluronic-covered oil-water interfaces under simulated duodenal conditions.</a> Food Hydrocolloids. 34, 54-61 (2014).</li>
<li>Minekus, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+standardised+static+in+vitro+digestion+method+suitable+for+food+-+an+international+consensus%5BTitle%5D)+AND+%22Food+%26+Function%22%5BJournal%5D)">A standardised static in vitro digestion method suitable for food - an international consensus.</a> Food & Function. 5 (6), 1113-1124 (2014).</li>
<li>Wege, H. A., Holgado-Terriza, J. A., Cabrerizo-Vílchez, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+a+constant+surface+pressure+penetration+langmuir+balance+based+on+axisymmetric+drop+shape+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Colloid+and+Interface+Science%22%5BJournal%5D)">Development of a constant surface pressure penetration langmuir balance based on axisymmetric drop shape analysis.</a> Journal of Colloid and Interface Science. 249 (2), 263-273 (2002).</li>
<li>del Castillo-Santaella, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hyaluronic+acid+and+human%2Fbovine+serum+albumin+shelled+nanocapsules%3A+Interaction+with+mucins+and+in+vitro+digestibility+of+interfacial+films%5BTitle%5D)+AND+%22Food+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Hyaluronic acid and human/bovine serum albumin shelled nanocapsules: Interaction with mucins and in vitro digestibility of interfacial films.</a> Food Chemistry. 383, 132330(2022).</li>
<li>Aguilera-Garrido, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Applications+of+serum+albumins+in+delivery+systems%3A+Differences+in+interfacial+behaviour+and+interacting+abilities+with+polysaccharides%5BTitle%5D)+AND+%22Advances+in+Colloid+and+Interface+Science%22%5BJournal%5D)">Applications of serum albumins in delivery systems: Differences in interfacial behaviour and interacting abilities with polysaccharides.</a> Advances in Colloid and Interface Science. 290 (5), 102365(2021).</li>
</ol>

Os autores declaram que não têm interesses financeiros ou relações pessoais concorrentes conhecidos que possam ter influenciado o trabalho relatado neste artigo.

Este artigo descreve um protocolo generalizado para medir a digestão in vitro de camadas interfaciais usando equipamentos de gota pendente. O protocolo pode ser ajustado às necessidades específicas do experimento ajustando a composição dos tampões digestivos, que são baseados no protocolo harmonizado INFOGEST11,20 para facilitar a comparação com a literatura. As enzimas digestivas e os biossurfactantes podem ser adicionados individualmente, sequencialmen...

Entender como a gordura é digerida, o que envolve a digestão em emulsão, é importante para projetar racionalmente produtos com funcionalidade personalizada1. O substrato para a digestão de gordura é uma emulsão, uma vez que a gordura é emulsionada após o consumo por ação mecânica e mistura com biossurfactantes na boca e no estômago. Além disso, a maior parte da gordura consumida pelos seres humanos já é emulsionada (como produtos lácteos) e, no caso de bebês ou alguns idosos, essa é a única forma de consumo. Assim, o design de produtos à base de emulsão com perfis de digestão específicos é muito importante na nutrição1. Além disso, as emulsões podem encapsular e fornecer nutrientes, medicamentos ou bioativos lipofílicos2 para lidar com diferentes condições gastrointestinais, como obesidade3, fortificação de nutrientes, alergias alimentares e doenças digestivas. Nas emulsões de óleo em água, as gotículas lipídicas são cercadas por camadas interfaciais de emulsificantes, como proteínas, surfactantes, polímeros, partículas e misturas4. O papel dos emulsificantes é duplo: estabilizar a emulsão5 e proteger/transportar o composto encapsulado para um local específico. A obtenção de uma digestibilidade personalizada das emulsões depende de sua composição inicial, mas também requer o monitoramento da evolução contínua dessa interface durante o trânsito pelo trato gastrointestinal (Figura 1).
<img alt="Diagrama de digestão infantil; engenharia interfacial, novas matrizes alimentares, obesidade, fortificação de nutrientes." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64158/64158fig01.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 1"> Figura 1: Aplicando engenharia interfacial de emulsões para lidar com algumas das principais condições gastrointestinais. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64158/64158fig01large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
A digestão lipídica é, em última análise, um processo interfacial, pois requer a adsorção de lipases (gástricas ou pancreáticas) na interface óleo-água de gotículas lipídicas emulsionadas através da camada interfacial para alcançar e hidrolisar os triglicerídeos contidos no óleo em ácidos graxos livres e monoacilglicerídeos6. Isso está esquematizado na Figura 2. A lipase gástrica compete com a pepsina e os fosfolipídios no estômago pela interface óleo-água (Figura 2, digestão gástrica). Em seguida, a lipase/colipase pancreática compete com tripsina/quimotripsina, fosfolipídios, sais biliares e produtos digestivos no intestino delgado. As proteases podem alterar a cobertura interfacial, prevenindo ou favorecendo a adsorção da lipase, enquanto os sais biliares são altamente ativos superficiais e deslocam a maior parte do emulsificante restante para promover a adsorção da lipase (Figura 2, digestão intestinal). Eventualmente, a taxa e a extensão da lipólise dependem das propriedades interfaciais da emulsão digerida inicial/gástrica, como a espessura, as conexões inter/intramoleculares e as interações eletrostáticas e estéricas. Assim, o monitoramento da evolução da camada interfacial à medida que é digerida oferece uma plataforma experimental para identificar mecanismos e eventos interfaciais que afetam a adsorção da lipase e, portanto, a digestão lipídica.
<img alt="Diagrama do processo digestivo; mostra a digestão gástrica e intestinal de emulsões alimentares com enzimas." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64158/64158fig02.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 2"> Figura 2: Diagrama esquemático ilustrando o papel das interfaces na digestão lipídica gastrointestinal. A hidrólise da pepsina altera a composição interfacial na fase gástrica, enquanto a lipase gástrica hidrolisa os triglicerídeos. No intestino delgado, a tripsina/quimotripsina hidrolisa ainda mais o filme interfacial, enquanto a lipólise prossegue pela adsorção de BS/lipases, pela hidrólise de triglicerídeos e pela dessorção de produtos lipolíticos por solubilização nas micelas/complexo BS. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64158/64158fig02large.jpg" target="_blank">Por favor, clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
O equipamento de gota de pingente da Universidade de Granada (UGR) é implementado com uma tecnologia patenteada, o duplo capilar coaxial, que permite a troca subfásica da solução a granel7. O capilar, que contém a gota do pingente, consiste em um arranjo de dois capilares coaxiais que são conectados independentemente a cada canal de um microinjetor duplo. Cada microinjetor pode operar de forma independente, permitindo a troca do conteúdo caído pelo fluxo7. Assim, a troca subfásica consiste na injeção simultânea da nova solução com o capilar interno e na extração da solução a granel com o capilar externo usando a mesma taxa de fluxo. Este processo permite a substituição da solução a granel sem perturbação da área interfacial ou do volume da gota. Este procedimento foi posteriormente atualizado para uma troca multi-subfase, que permite até oito trocas subfásicas sequenciais da solução a granel de gotículas8. Isso permite a simulação do processo digestivo em uma única gota aquosa suspensa em meio lipídico, trocando sequencialmente a solução a granel por meios artificiais imitando os diferentes compartimentos (boca, estômago, intestino delgado). Toda a configuração é representada na Figura 3, incluindo os detalhes dos componentes. As seringas do microinjetor são conectadas às oito válvulas vias, cada uma conectando-se a um tubo de microcentrífuga contendo o fluido digestivo artificial com componentes descritos na Figura 2.
<img alt="Configuração de microinjeção com fonte de luz, microposicionador, câmera CCD para análise celular." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64158/64158fig03.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 3"> Figura 3: Visão geral do OCTOPUS com todos os componentes. A câmera CCD, o microscópio, o microposicionador, a célula termoestabilizada e o capilar duplo foram conectados independentemente a um microinjetor duplo com duas seringas conectadas a oito válvulas vias. Cada seringa se conecta com capilares, quatro tubos de microcentrífuga com amostra e uma descarga. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64158/64158fig03large.jpg" target="_blank">Por favor, clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
A Figura 4A mostra como cada um dos fluidos digestivos artificiais é injetado na gota pendente por troca de subfases através do duplo capilar. Cada composto digestivo detalhado na Figura 2 pode ser aplicado simultaneamente/sequencialmente, simulando a passagem pelo trato gastrointestinal. Os fluidos digestivos artificiais contêm diferentes enzimas e biossurfactantes, que alteram a tensão interfacial do emulsificante inicial, conforme esquematizado na Figura 4B. O software DINATEN (ver Tabela de Materiais), também desenvolvido na UGR, registra a evolução da tensão interfacial em tempo real à medida que a camada interfacial inicial é digerida in vitro. Além disso, após cada fase digestiva, a elasticidade dilatacional da camada interfacial é calculada impondo oscilações periódicas de volume/área interfacial na camada interfacial estabilizada e registrando a resposta da tensão interfacial. O período/frequência e a amplitude da oscilação podem ser variados, e o processamento da imagem com o software CONTACTO fornece os parâmetros reológicos dilatacionais8.
<img alt="Diagrama e gráfico de reação enzimática, tensão interfacial vs. tempo de digestão, proteólise, lipólise." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64158/64158fig04.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 4"> Figura 4: Exemplos de perfis de digestão . (A) A camada emulsificante inicial é submetida a meio digestivo artificial colocado na microcentrífuga por troca subfásica sequencial das diferentes soluções na gota pendente. (B) A evolução geral da tensão interfacial (eixo y) do emulsionante inicial em função do tempo (eixo x) à medida que é digerido in vitro pelas várias enzimas/biossurfactantes nos meios artificiais. Uma troca subfásica final com fluido intestinal simples mede a dessorção de lipídios digeridos por solubilização em micelas mistas. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64158/64158fig04large.jpg" target="_blank">Por favor, clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
Este estudo apresenta o protocolo geral desenhado para medir a digestão in vitro de camadas interfaciais com equipamento de gota pendente9. A camada interfacial inicial é submetida sequencialmente a condições que imitam a passagem pelo trato gastrointestinal, conforme ilustrado na Figura 2. Esses diferentes meios digestivos são injetados na gota pendente por troca subfásica das diferentes soluções contidas nos tubos de microcentrífuga (Figura 4A). A composição desses meios pode ser personalizada dependendo das condições gastrointestinais que serão avaliadas, a saber, proteólise/lipólise gástrica/intestinal, permitindo mensurar efeitos cumulativos e sinergias10. As condições experimentais utilizadas para mimetizar o processo de digestão em cada compartimento seguem o protocolo de consenso internacional publicado pelo INFOGEST detalhando o pH e as quantidades de eletrólitos e enzimas11. O dispositivo experimental baseado na gota pendente permite o registro da tensão interfacial in situ durante todo o processo de digestão simulado. A reologia dilatacional da camada interfacial é calculada no final de cada etapa digestiva. Dessa forma, cada emulsificante oferece um perfil de digestão que ilustra as propriedades das interfaces digeridas, conforme ilustrado na Figura 4B. Isso permite a extração de conclusões sobre sua suscetibilidade ou resistência às diferentes etapas do processo digestivo. Em geral, o meio digestivo artificial contém pH ácido/básico, eletrólitos, proteases (gástricas e intestinais), lipases (gástricas e intestinais), sais biliares e fosfolipídios, que são dissolvidos em seus respectivos fluidos digestivos (gástrico ou intestinal). A Figura 4B mostra um perfil genérico da evolução da tensão interfacial de um emulsificante, primeiro submetido à ação da protease, seguido pelas lipases. Em geral, a proteólise da camada interfacial promove um aumento da tensão interfacial devido à dessorção de peptídeos hidrolisados9,12, enquanto a lipólise resulta em uma redução muito acentuada da tensão interfacial devido à adsorção de sais biliares e lipases 13. Uma troca subfásica final com o fluido intestinal esgota a solução a granel de material não adsorvido/digerido e promove a dessorção de compostos solúveis e a solubilização de lipídios digeridos em micelas mistas. Isso é quantificado pelo aumento da tensão interfacial registrada (Figura 4B).
Em resumo, o delineamento experimental implementado na gota pendente para simular a digestão in vitro em uma única gota permite medir efeitos cumulativos e sinergias à medida que o processo de digestão é aplicado sequencialmente à camada interfacial inicial10. A composição de cada meio digestivo pode ser facilmente ajustada para dar conta das particularidades das condições digestivas, incluindo patologias gastrointestinais ou meios digestivos infantis14. Em seguida, a identificação dos mecanismos interfaciais que afetam a proteólise e a lipólise pode ser usada para modular a digestão pela engenharia interfacial de emulsões. Os resultados obtidos podem ser aplicados no desenho de novas matrizes alimentares com funcionalidades sob medida, como baixa alergenicidade, ingestão controlada de energia e digestibilidade diminuída 15,16,17,18,19.

<table><tbody><tr><td>Alfa-quimotripsina do pâncreas bovino</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C4129</td><td>Enzima</td></tr><tr><td>Beta-lactoglobulina</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>L0130</td><td>Emulsfier</td></tr><tr><td>Albumina de soro bovino</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>9048-46-8</td><td>Emulsfier</td></tr><tr><td>CaCl2</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>10043-52-4</td><td>Centrífuga de eletrólitos</td></tr><tr><td></td><td>Kronton instrumentos</td><td>Centrikon T-124</td><td>Para separação de óleo e resinas</td></tr><tr><td>Pectina cítrica</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P9135</td><td>Emulsionador</td></tr><tr><td>co-lipase DO PÂNCREAS SUÍNO</td><td>Sigma</td><td>C3028</td><td>Enzima</td></tr><tr><td>CONTACTO</td><td>Universidade de Granada (UGR)</td><td></td><td>https://core.ugr.es/dinaten/, último acesso: 18/07/2022</td></tr><tr><td>DINATEN</td><td>Universidade de Granada (UGR)</td><td></td><td>https://core.ugr.es/dinaten/, último acesso: 18/07/2022</td></tr><tr><td>Lipase gástrica</td><td>Lipolytech</td><td>RGE15-1G</td><td>Enzima</td></tr><tr><td>Albumina sérica humana</td><td>Emulsificante</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>70024-90-7</td></tr><tr><td>INFOGEST</td><td></td><td></td><td>http://www.proteomics.ch/IVD/</td></tr> <tr><td>Lipase de pâncreas suíno, tipo II</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>L33126</td><td>Enzima</td></tr><tr><td>Metassilicato de magnésio resinas</td><td>Fluka</td><td>1343-88-0</td><td>Resinas para purificar óleo</td></tr><tr><td>Micro 90</td><td>Produtos internacionais</td><td>M-9051-04</td><td>Limpador</td></tr><tr><td>NaCl</td><td>Sigma</td><td>7647-14-5</td><td>Eletrólito</td></tr><tr><td>NaH2PO4</td><td>Scharlau</td><td>10049-21-5</td><td>Para preparar tampão</td></tr><tr><td>OCTOPUS</td><td>Producciones Cient&iacute; ficas y T&eacute; cnicas S.L. (G&oacute; jarra, Espanha)</td><td></td><td>Pendandt Drop Equipamento implementado com troca de múltiplas subfases</td></tr><tr><td>Azeite de oliva</td><td>Óleo Sigma-Aldrich</td><td>1514</td><td></td></tr><tr><td>Pancreático de pâncreas</td> suíno <td>Sigma</td><td>P7545-25 g</td><td>Enzimática</td></tr><tr><td>Pepsina</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P6887 Enzima Plurônico</td><td></td></tr><tr><td>F127</td><td>Sigma</td><td>P2443</td><td>Emulsificante</td></tr><tr><td>Pluronic F68</td><td>Sigma</td><td>P1300</td><td>Emulsionador</td></tr><tr><td>Desoxicolato de sódio</td><td>Sais biliares Sigma</td><td></td><td>Sais biliares</td></tr><tr><td>Glicodesoxicolato de sódio</td><td>Sigma</td><td>C9910</td><td>Sais biliares</td></tr><tr><td>Taurocolato de sódio</td><td>Sigma</td><td>86339</td><td>Sais biliares</td></tr><tr><td>Filtro de seringa</td><td>Millex-DP</td><td>SLGP033R</td><td>&nbsp; Filtro de Seringa 0.22 &micro; Enzima</td></tr><tr><td></td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T1426</td><td></td></tr> da polietersulfona do tamanho do poro de m</tbody></table>

in vitro digestão de emulsões em uma única gotícula via troca multifásica de fluidos gastrointestinais simulados

In vitro Digestion of Emulsions in a Single Droplet via Multi Subphase Exchange of Simulated Gastrointestinal Fluids

As emulsões estão sendo usadas atualmente para encapsular e fornecer nutrientes e medicamentos para combater diferentes condições gastrointestinais, como obesidade, fortificação de nutrientes, alergias alimentares e doenças digestivas. A capacidade de uma emulsão de fornecer a funcionalidade desejada, ou seja, atingir um local específico dentro do trato gastrointestinal, inibir / retardar a lipólise ou facilitar a digestibilidade, depende em última análise de sua suscetibilidade à degradação enzimática no trato gastrointestinal. Em emulsões de óleo em água, as gotículas lipídicas são cercadas por camadas interfaciais, onde os emulsificantes estabilizam a emulsão e protegem o composto encapsulado. Alcançar uma digestibilidade personalizada das emulsões depende de sua composição inicial, mas também requer o monitoramento da evolução dessas camadas interfaciais, pois elas são submetidas a diferentes fases da digestão gastrointestinal. Um balanço de filme de superfície de gota pendente implementado com uma troca multi-subfásica permite simular a digestão in vitro de emulsões em uma única gota aquosa imersa em óleo, aplicando um modelo de digestão estática personalizado. O trânsito através do trato gastrointestinal é imitado pela troca subfásica da solução original em massa de gotículas com meios artificiais, imitando as condições fisiológicas de cada compartimento/etapa do trato gastrointestinal. A evolução dinâmica da tensão interfacial é registrada in situ ao longo de toda a digestão gastrointestinal simulada. As propriedades mecânicas das interfaces digeridas, como elasticidade dilatacional interfacial e viscosidade, são medidas após cada fase de digestão (oral, gástrica, intestino delgado). A composição de cada meio digestivo pode ser ajustada para explicar as particularidades das condições digestivas, incluindo patologias gastrointestinais e meios digestivos infantis. Os mecanismos interfaciais específicos que afetam a proteólise e a lipólise são identificados, fornecendo ferramentas para modular a digestão pela engenharia interfacial de emulsões. Os resultados obtidos podem ser manipulados para projetar novas matrizes alimentares com funcionalidades personalizadas, como baixa alergenicidade, ingestão controlada de energia e diminuição da digestibilidade.

Esta seção mostra diferentes exemplos de perfis de digestão medidos com o OCTOPUS. A aparência geral das correspondências de perfil de digestão simuladas é mostrada na Figura 4B. A tensão interfacial é geralmente representada contra o tempo no perfil de digestão. As diferentes fases/etapas de digestão consideradas são representadas em diferentes cores. A primeira fase forma a camada inicial e corresponde à fase de adsorção do emulsionante ou proteína/surfactante/polímero, dependendo de cada ...

Um balanço de filme de superfície de gota pendente implementado com uma troca multi-subfase, apelidada de OCTOPUS, permite imitar condições digestivas pela troca subfásica sequencial da solução a granel original com fluidos gastrointestinais simulados. A digestão in vitro simulada é monitorada registrando in situ a tensão interfacial da camada interfacial digerida.

In vitro Digestão de emulsões em uma única gotícula via troca multifásica de fluidos gastrointestinais simulados

Emulsions are currently being used to encapsulate and deliver nutrients and drugs to tackle different gastrointestinal conditions such as obesity, ...

Nosso método fornece um modelo para investigar como as emoções são digeridas, simulando o processo de digestão em uma única gota de água, que é coberta por emulsificante e está imersa na fase oleosa. Podemos avaliar o impacto de diferentes emulsificantes e a ação de diferentes componentes digestivos e projetar interfaces que possam resistir ou retardar a digestão em diferentes locais dentro do trato gastrointestinal. Podemos medir a tensão interfacial em C2 durante todo o processo de digestão simulado e a elasticidade e viscosidade da camada interfacial no final da etapa de digestão.As concentrações e as condições da digestão podem ser ajustadas às necessidades do experimento, e isso pode ser aplicado sequencialmente, ou simultaneamente permitindo avaliar o sinergismo e os efeitos cumulativos. E trabalhamos com uma única gota, então precisamos de uma quantidade muito baixa de amostra, e temos um controle de alta precisão das variáveis experimentais. Aplicamos essa técnica para projetar uma estratégia para assumir isso.Uma dessas abordagens é projetar na camada fóssil que aposenta ou recebe o processo de lipólise. Outra abordagem é o uso de inovadores da lipase, e investigamos o mecanismo interfacial de ação da lipase. Este dispositivo foi originalmente desenvolvido para estudar a digestão in vitro.No entanto, pode ser usado para estudo mono e interação com lipídios, e também pode ser aplicado para estudar automaticamente a micro concentração crítica. A técnica experimental é acessível. Um pesquisador manual foi treinado para usá-lo em uma semana.Você precisa limpar o equipamento completamente e purificar as amostras e o óleo para evitar a presença de contaminantes de superfície ativos. Você precisa se familiarizar com o computador de software e aprender a controlar as luzes e a posição da capacidade e se livrar de pequenas bolhas. Para começar, gota de água formal para verificar a tensão superficial da água à temperatura ambiente.Defina a densidade diferencial para arejar água no diálogo esquerdo e meça a tensão superficial em tempo real. por cinco minutos. Encha o cuvet limpo com pelo menos 0,002 litros de óleo vegetal limpo e coloque-o no suporte do cuvet na célula termostática.Defina a densidade diferencial para água de óleo vegetal e injete 40 microlitros a uma taxa de 0,5 microlitros por segundo. Meça a tensão em tempo real a cada segundo até o final da injeção. Este é um processo dinâmico simples.Em seguida, salve os dados e plote a tensão interfacial em função do volume da gota e de uma folha de dados. Verifique se a faixa de volume da gota fornece um valor para a tensão interfacial independente do volume da gota para água limpa. Plote a área interfacial em função do volume da gota.Esta curva será usada posteriormente para combinar o volume com a área interfacial correspondente. Com a seringa esquerda, injete o volume dentro da faixa de tensão interfacial constante e registre a tensão interfacial por cinco minutos. Isso é para verificar a ausência de componentes de superfície ativa no sistema.Para realizar o controle inicial, injete cerca de 10 microlitros da solução emulsificante no capilar para formação de gotas e registre a absorção em uma área interfacial constante de cerca de 20 milímetros quadrados por uma hora. Os valores exatos de volume e área podem ser obtidos a partir da curva de calibração plotada anteriormente. Programe a reologia dilucional ajustando a amplitude de oscilação para 1,25 microlitros no período de 10 segundos.Em seguida, programe a absorção na área interfacial selecionada por 10 segundos. Em seguida, para registrar o programa de digestão gástrica a absorção na área interfacial selecionada por 10 segundos. Encha a seringa esquerda com líquido da válvula dois.Injete 125 microlitros da válvula dois a cinco microlitros por segundo com a seringa esquerda e, simultaneamente, extraia o mesmo volume na mesma taxa com a seringa direita. Esta é uma visualização do processo de troca subfásica de água com azul de metileno. Descarrega a seringa direita para sair da válvula oito e carregue novamente a seringa esquerda com líquido da válvula dois.Repita estes dois passos 10 vezes para garantir a troca completa de subfases com líquido e válvula dois e enzimas gástricas. Em seguida, registre a absorção na área interfacial selecionada por uma hora e registre a reologia dilucional como mostrado anteriormente. Para registrar a digestão intestinal após o registro da absorção na área interfacial selecionada, encha a seringa esquerda com líquido da válvula três e siga os mesmos passos mostrados anteriormente para registrar a digestão gástrica.Da mesma forma, para registrar a dessorção, após registrar a absorção na área interfacial selecionada, encha a seringa esquerda com líquido da válvula cinco e repita o restante dos passos utilizados para registrar a digestão gástrica. Encha os tubos de microcentrífuga com o meio de digestão artificial e conecte cada um deles à respectiva válvula pela tubulação correspondente. Encha a tubulação nas válvulas dois a oito limpando da válvula dois, válvula três, válvula quatro e válvula cinco para a saída externa que é a válvula oito.Encha a tubulação na válvula um, limpando da válvula um para a válvula seis capilares cinco vezes. Coloque o capilar na fase de óleo e carregue a seringa esquerda com a válvula um. Comece a processar sequencialmente o controle inicial da digestão gástrica, digestão intestinal e dessorção, salvando os dados no final de cada processo.Os resultados experimentais obtidos para a digestão gástrica de emulsificantes são mostrados nestas figuras. A proteólise gástrica da albumina sérica humana é apresentada aqui. Os meios digestivos são aplicados por troca de subfases com soluções a 37 graus Celsius.Aqui o azul representa o tampão inicial com proteína e o vermelho representa o SGF simplificado com pepsina. Durante a troca subfásica com SGF simplificado e pepsina, a tensão interfacial aumenta devido à hidrólise da proteína, que dilui a camada proteica inicial. A imagem gráfica representa a lipólise gástrica da pectina cítrica.Aqui, o azul representa o tampão inicial com pectina cítrica, o amarelo representa o SGF simplificado com lipase gástrica e o cinza representa o SGF simplificado. A troca de subfases com lipase gástrica diminui a tensão superficial, enquanto a troca de subfases com SGF simplificada, fornece uma resposta nula da tensão interfacial. Aqui é mostrado um exemplo dos perfis de digestão intestinal.Absorção, dessorção, perfis de biossais, lipase e lipase mais sais biliares em SIF simplificado a 37 graus Celsius são apresentados aqui. A imagem gráfica mostra a evolução da tensão interfacial após a lipólise de duas variantes de F127 e F68 pluerônicos. Uma diminuição acentuada pode ser observada na tensão interfacial devido à absorção de lipase e sais biliares, e à produção de ácidos graxos livres em filmes interfaciais previamente formados de F68 e F127 na interface da água do óleo.A etapa de dessorção mostra a troca de subfases com SIF simplificado dos sais biliares, F68 e F127. Perfil de digestão in vitro do filme absorvido por AS48 na interface ar-água em filmes absorvidos por albumina sérica humana e bovina na interface água do azeite. As imagens representativas mostram a tensão interfacial, a elasticidade da dilatação e a viscosidade da dilatação da digestão in vitro do filme absorvido pela betalactoglobulina na interface da água do azeite.Os parâmetros de dilatação foram medidos em 1 hertz, 0,1 hertz e 0,01 hertz após o equilíbrio da interface digerida em cada etapa. É importante combinar as bolas ao programar o processo com os tubos de centrífuga correspondentes, capilares ou eixos, a evolução da distribuição do local de gota, então, a mobilidade eletroforética define um potencial de gotículas, e o ácido graxo livre de aminoácidos produzido na lipólise oferece informações complementares às correspondentes com os achados da tensão interfacial. Esta técnica fornece camadas interfaciais com diferentes perfis de digestibilidade para fornecer nutrientes e drogas em diferentes locais dentro do trato gastrointestinal, e também para desenvolver novos sistemas de encapsulamento.

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Research

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Biochemistry

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