Name: Predição rápida de resposta a medicamentos in vivo usando enxertos de células de leucemia em embriões de peixe-zebra (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-05-23T12:40:00.000+00:00
Duration: 10 min 46 s
Description: Aprenda a avaliar respostas a medicamentos em leucemia aguda linfoblástica usando xenotransplantes em embriões de peixe-zebra. Este protocolo de sete dias permite análise precisa de viabilidade celular por citometria de fluxo.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Fontana, C. M., Van Doan, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zebrafish+xenograft+as+a+tool+for+the+study+of+colorectal+cancer%3A+a+review%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Death+Dis%22%5BJournal%5D)">Zebrafish xenograft as a tool for the study of colorectal cancer: a review.</a> Cell Death Dis. 15, 1-12 (2024).</li>
<li>Sturtzel, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Refined+high-content+imaging-based+phenotypic+drug+screening+in+zebrafish+xenografts%5BTitle%5D)+AND+%22NPJ+Precis+Oncol%22%5BJournal%5D)">Refined high-content imaging-based phenotypic drug screening in zebrafish xenografts.</a> NPJ Precis Oncol. 7 (1), 1-16 (2023).</li>
<li>Al-Hamaly, M. A., Turner, L. T., Rivera-Martinez, A., Rodriguez, A., Blackburn, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zebrafish+cancer+avatars%3A+A+translational+platform+for+analyzing+tumor+heterogeneity+and+predicting+patient+outcomes%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Zebrafish cancer avatars: A translational platform for analyzing tumor heterogeneity and predicting patient outcomes.</a> Int J Mol Sci. 24, 2288(2023).</li>
<li>Gamble, J. T., Elson, D. J., Greenwood, J. A., Tanguay, R. L., Kolluri, S. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+zebrafish+xenograft+models+for+investigating+cancer+and+cancer+therapeutics%5BTitle%5D)+AND+%22Biology%22%5BJournal%5D)">The zebrafish xenograft models for investigating cancer and cancer therapeutics.</a> Biology. 10 (4), 252(2021).</li>
<li>Costa, B., Estrada, M. F., Mendes, R. V., Fior, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zebrafish+avatars+towards+personalized+medicine-A+comparative+review+between+avatar+models%5BTitle%5D)+AND+%22Cells%22%5BJournal%5D)">Zebrafish avatars towards personalized medicine-A comparative review between avatar models.</a> Cells. 9 (2), 293(2020).</li>
<li>Wang, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Progress+in+building+clinically+relevant+patient-derived+tumor+xenograft+models+for+cancer+research%5BTitle%5D)+AND+%22Animal+Model+Exp+Med%22%5BJournal%5D)">Progress in building clinically relevant patient-derived tumor xenograft models for cancer research.</a> Animal Model Exp Med. 6 (5), 381-398 (2023).</li>
<li>Xiao, J., Glasgow, E., Agarwal, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zebrafish+xenografts+for+drug+discovery+and+personalized+medicine%5BTitle%5D)+AND+%22Trend+Cancer%22%5BJournal%5D)">Zebrafish xenografts for drug discovery and personalized medicine.</a> Trend Cancer. 6 (7), 569-579 (2020).</li>
<li>Fazio, M., Ablain, J., Chuan, Y., Langenau, D. M., Zon, L. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zebrafish+patient+avatars+in+cancer+biology+and+precision+cancer+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Cancer%22%5BJournal%5D)">Zebrafish patient avatars in cancer biology and precision cancer therapy.</a> Nat Rev Cancer. 20 (5), 263-273 (2020).</li>
<li>Costa, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zebrafish+avatar-test+forecasts+clinical+response+to+chemotherapy+in+patients+with+colorectal+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Comm%22%5BJournal%5D)">Zebrafish avatar-test forecasts clinical response to chemotherapy in patients with colorectal cancer.</a> Nat Comm. 15 (1), 4771(2024).</li>
<li>Grissenberger, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chapter+8+-+Preclinical+testing+of+CAR+T+cells+in+zebrafish+xenografts%5BTitle%5D)+AND+%22Method+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Chapter 8 - Preclinical testing of CAR T cells in zebrafish xenografts.</a> Method Cell Biol. 167, 133-147 (2022).</li>
<li>Yan, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-cell+imaging+of+T+cell+immunotherapy+responses+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Med%22%5BJournal%5D)">Single-cell imaging of T cell immunotherapy responses in vivo.</a> J Exp Med. 218 (10), 20210314(2021).</li>
<li>Pascoal, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+preclinical+embryonic+zebrafish+xenograft+model+to+investigate+CAR+T+cells+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Cancers%22%5BJournal%5D)">A preclinical embryonic zebrafish xenograft model to investigate CAR T cells in vivo.</a> Cancers. 12 (3), 567(2020).</li>
<li>Pal, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+in+vitro+maintenance+of+clonal+abundance+and+leukaemia-initiating+potential+in+acute+lymphoblastic+leukaemia%5BTitle%5D)+AND+%22Leukemia%22%5BJournal%5D)">Long-term in vitro maintenance of clonal abundance and leukaemia-initiating potential in acute lymphoblastic leukaemia.</a> Leukemia. 30 (8), 1691-1700 (2016).</li>
<li>Beneduce, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blinatumomab+in+children+and+adolescents+with+relapsed%2Frefractory+B+cell+precursor+acute+lymphoblastic+leukemia%3A+A+real-life+multicenter+retrospective+study+in+seven+AIEOP+%28Associazione+Italiana+di+Ematologia+e+Oncologia+Pediatrica%29+Centers%5BTitle%5D)+AND+%22Cancers%22%5BJournal%5D)">Blinatumomab in children and adolescents with relapsed/refractory B cell precursor acute lymphoblastic leukemia: A real-life multicenter retrospective study in seven AIEOP (Associazione Italiana di Ematologia e Oncologia Pediatrica) Centers.</a> Cancers. 14 (2), 426(2022).</li>
<li>Xie, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Short-course+blinatumomab+for+refractory%2Frelapse+precursor+B+acute+lymphoblastic+leukemia+in+children%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Pediatr%22%5BJournal%5D)">Short-course blinatumomab for refractory/relapse precursor B acute lymphoblastic leukemia in children.</a> Front Pediatr. 11, 1187607(2023).</li>
<li>Mengxuan, S., Fen, Z., Runming, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+treatments+for+pediatric+relapsed+or+refractory+acute+B-cell+lineage+lymphoblastic+leukemia%3A+Precision+medicine+era%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Pediatr%22%5BJournal%5D)">Novel treatments for pediatric relapsed or refractory acute B-cell lineage lymphoblastic leukemia: Precision medicine era.</a> Front Pediatr. 10, 923419(2022).</li>
<li>Howe, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+zebrafish+reference+genome+sequence+and+its+relationship+to+the+human+genome%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">The zebrafish reference genome sequence and its relationship to the human genome.</a> Nature. 496 (7446), 498-503 (2013).</li>
<li>Lee, H. C., Lin, C. Y., Tsai, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zebrafish%2C+an+in+vivo+platform+to+screen+drugs+and+proteins+for+biomedical+use%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmaceuticals%22%5BJournal%5D)">Zebrafish, an in vivo platform to screen drugs and proteins for biomedical use.</a> Pharmaceuticals. 14 (6), 500(2021).</li>
<li>Santoriello, C., Zon, L. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hooked%21+Modeling+human+disease+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Investigation%22%5BJournal%5D)">Hooked! Modeling human disease in zebrafish.</a> J Clin Investigation. 122 (7), 2337-2343 (2012).</li>
<li>Miao, K. Z., Kim, G. Y., Meara, G. K., Qin, X., Feng, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tipping+the+scales+with+zebrafish+to+understand+adaptive+tumor+immunity%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Cell+Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Tipping the scales with zebrafish to understand adaptive tumor immunity.</a> Front Cell Dev Biol. 9, 660969(2021).</li>
<li>Gauert, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fast%2C+in+vivo+model+for+drug-response+prediction+in+patients+with+B-cell+precursor+acute+lymphoblastic+leukemia%5BTitle%5D)+AND+%22Cancers%22%5BJournal%5D)">Fast, in vivo model for drug-response prediction in patients with B-cell precursor acute lymphoblastic leukemia.</a> Cancers. 12 (7), 1883(2020).</li>
<li>Ellett, F., Pase, L., Hayman, J. W., Andrianopoulos, A., Lieschke, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mpeg1+promoter+transgenes+direct+macrophage-lineage+expression+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Mpeg1 promoter transgenes direct macrophage-lineage expression in zebrafish.</a> Blood. 117 (4), e49-e56 (2011).</li>
<li>Pase, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neutrophil-delivered+myeloperoxidase+dampens+the+hydrogen+peroxide+burst+after+tissue+wounding+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Biol%22%5BJournal%5D)">Neutrophil-delivered myeloperoxidase dampens the hydrogen peroxide burst after tissue wounding in zebrafish.</a> Current Biol. 22 (19), 1818-1824 (2012).</li>
<li>Wijk, R. C. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanistic+and+quantitative+understanding+of+pharmacokinetics+in+Zebrafish+larvae+through+nanoscale+blood+sampling+and+metabolite+modeling+of+paracetamol%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pharmacol+Exp+Ther%22%5BJournal%5D)">Mechanistic and quantitative understanding of pharmacokinetics in Zebrafish larvae through nanoscale blood sampling and metabolite modeling of paracetamol.</a> J Pharmacol Exp Ther. 371 (1), 15-24 (2019).</li>
<li>Lázaro-Navarro, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhibiting+casein+kinase+2+sensitizes+acute+lymphoblastic+leukemia+cells+to+venetoclax+via+MCL1+degradation%5BTitle%5D)+AND+%22Blood+Advances%22%5BJournal%5D)">Inhibiting casein kinase 2 sensitizes acute lymphoblastic leukemia cells to venetoclax via MCL1 degradation.</a> Blood Advances. 5 (24), 5501(2021).</li>
<li>Rhodes, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interplay+of+pu.1+and+gata1+determines+myelo-erythroid+progenitor+cell+fate+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Developmental+Cell%22%5BJournal%5D)">Interplay of pu.1 and gata1 determines myelo-erythroid progenitor cell fate in zebrafish.</a> Developmental Cell. 8 (1), 97-108 (2005).</li>
<li>Zakaria, Z. Z., Eisa-Beygi, S., Benslimane, F. M., Ramchandran, R., Yalcin, H. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Design+and+microinjection+of+Morpholino+antisense+oligonucleotides+and+mRNA+into+zebrafish+embryos+to+elucidate+specific+gene+function+in+heart+dvelopment%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Design and microinjection of Morpholino antisense oligonucleotides and mRNA into zebrafish embryos to elucidate specific gene function in heart dvelopment.</a> J Vis Exp. (186), e63324(2022).</li>
<li>ZFIN: Zebrafish Book: Contents. , 
 <a target="_blank" href="https://zfin.org/zf_info/zfbook/cont.html">https://zfin.org/zf_info/zfbook/cont.html</a> (2025).</li>
<li>Kimmel, C. B., Ballard, W. W., Kimmel, S. R., Ullmann, B., Schilling, T. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stages+of+embryonic+development+of+the+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Dyn%22%5BJournal%5D)">Stages of embryonic development of the zebrafish.</a> Dev Dyn. 203 (3), 253-310 (1995).</li>
<li>Hasegawa, E. H., Gist H Farr, I. I. I., Maves, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+pronase+versus+manual+dechorionation+of+zebrafish+embryos+for+small+molecule+treatments%5BTitle%5D)+AND+%22J+Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Comparison of pronase versus manual dechorionation of zebrafish embryos for small molecule treatments.</a> J Dev Biol. 11 (2), 16(2023).</li>
<li>Wattrus, S. J., Zon, L. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stem+cell+safe+harbor%3A+the+hematopoietic+stem+cell+niche+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Blood+Adv%22%5BJournal%5D)">Stem cell safe harbor: the hematopoietic stem cell niche in zebrafish.</a> Blood Adv. 2 (21), 3063-3069 (2018).</li>
<li>Harvie, E. A., Huttenlocher, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neutrophils+in+host+defense%3A+new+insights+from+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22J+Leukocyte+Biol%22%5BJournal%5D)">Neutrophils in host defense: new insights from zebrafish.</a> J Leukocyte Biol. 98 (4), 523-537 (2015).</li>
<li>Page, D. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+evolutionarily+conserved+program+of+B-cell+development+and+activation+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">An evolutionarily conserved program of B-cell development and activation in zebrafish.</a> Blood. 122 (8), e1-e11 (2013).</li>
<li>Nguyen-Chi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((TNF+signaling+and+macrophages+govern+fin+regeneration+in+zebrafish+larvae%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Death+Dis%22%5BJournal%5D)">TNF signaling and macrophages govern fin regeneration in zebrafish larvae.</a> Cell Death Dis. 8 (8), e2979-e2979 (2017).</li>
<li>Rosowski, E. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Determining+macrophage+versus+neutrophil+contributions+to+innate+immunity+using+larval+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Dis+Models+Mech%22%5BJournal%5D)">Determining macrophage versus neutrophil contributions to innate immunity using larval zebrafish.</a> Dis Models Mech. 13 (1), dmm041889(2020).</li>
<li>Rebelo de Almeida, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zebrafish+xenografts+as+a+fast+screening+platform+for+bevacizumab+cancer+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Comm+Biol%22%5BJournal%5D)">Zebrafish xenografts as a fast screening platform for bevacizumab cancer therapy.</a> Comm Biol. 3 (1), 1-13 (2020).</li>
<li>Pringle, E. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+zebrafish+xenograft+platform-A+novel+tool+for+modeling+KSHV-associated+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Viruses%22%5BJournal%5D)">The zebrafish xenograft platform-A novel tool for modeling KSHV-associated diseases.</a> Viruses. 12 (1), 12(2020).</li>
<li>Pype, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Incubation+at+32.5+%C2%B0C+and+above+causes+malformations+in+the+zebrafish+embryo%5BTitle%5D)+AND+%22Reprod+Toxicol%22%5BJournal%5D)">Incubation at 32.5 °C and above causes malformations in the zebrafish embryo.</a> Reprod Toxicol. 56, 56-63 (2015).</li>
<li>Xu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adeno-associated+virus+%28AAV%29-based+gene+therapy+for+glioblastoma%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Cell+Int%22%5BJournal%5D)">Adeno-associated virus (AAV)-based gene therapy for glioblastoma.</a> Cancer Cell Int. 21 (1), 76(2021).</li>
<li>Siebert, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rhabdomyosarcoma+xenotransplants+in+zebrafish+embryos%5BTitle%5D)+AND+%22Pediat+Blood+Cancer%22%5BJournal%5D)">Rhabdomyosarcoma xenotransplants in zebrafish embryos.</a> Pediat Blood Cancer. 70 (1), e30053(2023).</li>
<li>van Bree, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+an+orthotopic+medulloblastoma+zebrafish+model+for+rapid+drug+testing%5BTitle%5D)+AND+%22Neuro-Oncol%22%5BJournal%5D)">Development of an orthotopic medulloblastoma zebrafish model for rapid drug testing.</a> Neuro-Oncol. noae210, (2024).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Placa de Petri&nbsp; (10 cm)</td>Solução de coloração de viabilidade <td>Greiner</td><td>P7237</td><td></td></tr><tr><td>7-AAD&nbsp;</td><td>Invitrogen</td><td>00-6993-50</td><td></td></tr><tr><td>Agarose (LE, grau analítico)</td><td>Biozym&nbsp;</td><td></td><td></td>840004</tr><tr><td>Injetor de pressão de ar</td><td>Narishige</td><td>IM400</td><td>&nbsp; com fornecimento externo de gás</td></tr><tr><td>Alexa Fluor&nbsp; 488 anticorpo anti-CD19 humano&nbsp;</td><td>Biolegend</td><td>302219</td><td></td></tr><tr><td>Anexina tampão de ligação</td><td>Biolegend</td><td>422201</td><td>Ou veja soluções para preparação</td></tr><tr><td>APC anexina V&nbsp;</td><td>Biolegend</td><td>640941</td><td></td></tr><tr><td>Capilares (10 cm, OD 1,0 mm, com filamentos)</td> <td>WPIINC</td><td>TW100F-4</td><td>1,0 OD; 0,75 ID</td></tr><tr><td>Balão de cultura de células (T-175)</td> <td>Sarstedt</td><td>83,39,12,002</td><td></td></tr><tr><td>CellTrace Violeta&nbsp;</td><td>Invitrogen</td><td>C34557</td><td></td></tr><tr><td>Dimetil sulfóxido (DMSO)</td><td>Roth</td><td>A994.1</td><td></td></tr><tr><td>Dispase II&nbsp;</td><td>Sigma Aldrich</td><td>D4693-1g</td><td></td></tr><tr><td>DNase I</td><td>AppliChem GmbH</td><td>A3778</td><td></td></tr><tr><td>Eppendorf tubos (1,5 ml)</td><td>Eppendorf</td><td>30120086</td><td></td></tr><tr><td>FACS tubo (tubo redondo de poliestireno com tampa do filtro de células, 5 ml)</td><td>Falcon</td><td>352235</td><td></td></tr><tr><td>Falcon tubos (50 ml)</td><td>Falcon</td><td>352070</td><td></td></tr><tr><td>Soro fetal de bezerro (FCS)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>C8056</td><td></td></tr><tr><td>Filtro de malha fina&nbsp;( 10 &micro; m)</td> <td>Filtro PluriStrainer</td><td>435001050</td><td></td></tr><tr><td>Filtro de malha fina&nbsp;( 20 &micro; m)</td> Citômetro <td>de fluxo 431002040</td><td></td> <td>PluriStrainer</td></tr><tr><td></td><td>Becton Dickinson</td><td>BD LSRFortessa X-20</td><td></td></tr><tr><td>Estereomicroscópio fluorescente</td><td>Leica</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Estereomicroscópio fluorescente com câmera</td><td>Leica</td><td>M165 FC</td><td>Câmera: DFC7000 T</td></tr><tr><td>Hank' s Solução Sal Balanceada (HBSS, livre de Cálcio e Magnésio</td>) Molde de Injeção <td>Sigma Aldrich</td><td>88284</td><td></td></tr><tr><td>(Zebrafish MI/Kit de Transplante)</td> <td>World Precision Instruments&nbsp;</td><td>Agulhas de injeção Z-MOLDS</td><td></td></tr><tr><td>(sem filamento)</td> <td>Instrumentos biomédicos</td><td>VZIPbl-20-10-55</td><td>Pipeta de injeção de peixe-zebra, romba, OD: 20&mu; m &plusmn; 1, TL: ~ 10mm, PL: 55mm, Vidro: BM100T-10P</td></tr><tr><td>Macro-centrífuga</td><td>Eppendorf</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Micro-centrífuga</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Morpholino (csf3r)</td> <td>Gene Tools LLC</td><td>csf3r (GAAGCACAAGCGGGA GACGGATGCCA)</td><td></td></tr> <tr><td>Morpholino (spi1)</td> <td>Gene Tools LLC</td><td>spi1 (GATATACTGATAC TCCATTGGTGGT)</td><td></td></tr> <tr><td>Papaína</td><td>Sigma Aldrich</td><td>P3125</td><td></td></tr><tr><td>Penicilina-estreptomicina (Penstrep; 10.000&nbsp; U/ml)</td><td>Placas</td><td>de 15140122</td><td></td></tr><tr><td>Gibco (4 poços)</td><td>Greiner Bio one&nbsp;</td><td>Placas 657160</td><td></td></tr><tr><td>(96 poços)</td> <td>Greiner Bio one&nbsp;</td><td>657180</td><td></td></tr><tr><td>Roswell Park Memorial Institute (RPMI) 1640 Médio</td><td>Gibco</td><td>21875-034</td><td></td></tr><tr><td>Tricaine&nbsp; (MS-222)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>E10521-50G</td><td>Ethy-3 aminobenzoato metanossulfenato</td></tr></tbody></table>

predição rápida de resposta a medicamentos in vivo usando enxertos de células de leucemia em embriões de peixe-zebra

Rapid in vivo Drug Response Prediction Using Leukemia Cell Grafts in Zebrafish Embryos

Para uma avaliação científica detalhada do protocolo ZefiX, incluindo o xenoenxerto e o tratamento medicamentoso de amostras de células BCP-ALL primárias recém-congeladas, consulte o manuscritopublicado anteriormente 21. A aprovação para o uso de amostras de pacientes em pesquisas para testes pré-clínicos de medicamentos foi concedida como parte de estudos complementares ao estudo ALL-REZ BFM 2002 (NCT00114348) e ao registro e biobanco ALL-REZ BFM (EA2/055/12) pelos comitês locais de ética em pesq...

Predição rápida de resposta a medicamentos in vivo usando enxertos de células de leucemia em embriões de peixe-zebra

Zebrafish xenotransplantation is a pivotal technique for investigating human cancer pathogenesis and predicting individual drug responses. This document ...

rapid-vivo-drug-response-prediction-using-leukemia-cell-grafts

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Pesquisa sobre o Câncer

Limitando diluição ensaios transplante de células são usadas para determinar a freqüência de tumor de células-propagação. Este protocolo descreve um método para gerar zebrafish singeneicos que desenvolvem leucemia fluorescente marcado e detalhes de como isolar e transplante dessas células de leucemia a limitar a diluição na cavidade peritoneal de peixe-zebra adulto.

Quantificar a freqüência de Tumor-propagação células usando Transplante de Células Limitando diluição em singênicos Zebrafish

Aqui, apresentamos um protocolo para transplante de células do músculo esquelético do peixe-zebra e rabdomiossarcoma embrionário (ERMS) em peixe-zebra mutante homozigoto rag2E450fs imune adulto. Este protocolo permite a análise eficiente da regeneração e transformação maligna das células musculares.

Normais e malignas Transplante de Células Muscle em imunológico comprometido Adulto Zebrafish

Este método utiliza embriões de peixe-zebra para testar de forma eficiente a capacidade invasiva de células de cancro vascular. células cancerosas fluorescentes são injectados para dentro do seio precardiac ou saco vitelino de embriões em desenvolvimento. invasão vascular e celular do cancro do extravasamento é avaliada através de microscopia de fluorescência da região da cauda de 24 a 96 horas mais tarde.

Teste da capacidade Vascular invasiva das células cancerosas no peixe-zebra (<em&gt; Danio rerio</em&gt;)

O transplante de células cancerosas é uma ferramenta importante para a identificação de mecanismos de câncer e respostas terapêuticas. As técnicas atuais dependem de animais imune-incompetentes. Descrevemos aqui um método para transplantar células tumorais de zebrafish em embriões imunocompetentes para a análise a longo prazo do comportamento de células tumorais e respostas de fármacos in vivo .

Transplante de Tumores Cerebrais Pediátricos de Zebrafish em Hospedeiros Imune-competentes para Estudo a Longo Prazo do Comportamento de Células Tumorais e Resposta a Medicamentos

Embriões de zebrafish são utilizados para avaliar a toxicidade de compostos químicos. Desenvolvem-se externamente e são sensíveis aos produtos químicos, permitindo a deteção de mudanças fenotípicas sutis. O experimento requer apenas uma pequena quantidade de composto, que é diretamente adicionado à placa contendo embriões, tornando o sistema de teste eficiente e rentável.

Avaliação rápida da toxicidade de compostos químicos usando embriões de zebrafish

Este protocolo descreve procedimentos da optimização em um modelo fluorescência-etiquetado duplo baseado em vírus do xenograft do tumor usando o zebrafish larval como anfitriões. Este modelo heterogêneo do xenograft imita a composição do tecido do microambiente pancreatic do cancro in vivo e sere como uma ferramenta mais precisa para avaliar respostas da droga em modelos personalizados de zPDX (xenograft paciente-derivado de zebrafish).

Modelo de Xenoenxerto heterogêneo derivado do paciente do câncer pancreático usando larvas de zebrafish como hospedeiros para avaliação comparativa de fármacos

O objetivo deste método é gerar um modelo in vivo de angiogênese tumoral por xenoenxertos de células tumorais de mamíferos em um embrião de zebrafish que tem vasos sanguíneos com rótulo fluorescentamente. Por imagem do Xenoenxerto e vasos associados, uma medida quantitativa da resposta angiogênica pode ser obtida.

In vivo Imaging e Quantitation da resposta angiogênica hospedeira em xenoenxertos de tumor de zebrafish

Modelos de xenoenxerto de zebrafish permitem a triagem de medicamentos de alto risco e imagens fluorescentes de células cancerígenas humanas em um microambiente in vivo. Desenvolvemos um fluxo de trabalho para a triagem de medicamentos automatizados em larga escala em amostras de leucemia derivada do paciente em zebrafish usando uma unidade de imagem equipada com microscópio de fluorescência automatizada.

Triagem de drogas de xenoenxertos tumorais derivados do paciente primário em zebrafish

Aqui, fornecemos um protocolo passo-a-passo, com dicas para gerar xenoenxertos e diretrizes para análise de comportamento tumoral, imunofluorescência de montagem total e quantificação de imagens confocal.

Geração de Xenoenxertos Larval de Zebrafish e Análise do Comportamento do Tumor

Descrevemos um protocolo de xenotransplante na gema de embriões transparentes de peixe-zebra que é otimizado por um método de estadiamento simples e rápido. As análises pós-injeção incluem sobrevida e avaliação da carga da doença de células xenotransplantadas por citometria de fluxo.

Um método simples, rápido e eficaz para análise de xenotransplante tumoral em embriões transparentes de peixe-zebra

Usamos a coloração de proliferação celular para identificar células quiescentes no modelo de leucemia linfoblástica aguda T de peixe-zebra. A coloração é retida em células que não se dividem e reduzida durante a proliferação celular, permitindo a seleção de células dormentes para interrogação posterior. Este protocolo fornece uma ferramenta funcional para estudar a auto-renovação no contexto da quiescência celular.

Identificação de células quiescentes em um modelo de leucemia linfoblástica aguda de células T de peixe-zebra usando coloração de proliferação celular 

Aprenda a avaliar respostas a medicamentos em leucemia aguda linfoblástica usando xenotransplantes em embriões de peixe-zebra. Este protocolo de sete dias permite análise precisa de viabilidade celular por citometria de fluxo.

Predição rápida de resposta a medicamentos in vivo usando enxertos de células de leucemia em embriões de peixe-zebra

Explorar mais vídeos