Name: Avanços no perfil metabólico de esferoides tridimensionais de tumores cerebrais para triagem de drogas (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-09-05T13:40:00.000+00:00
Duration: 6 min 50 s
Description: Aprenda a realizar perfil metabólico de esferoides tridimensionais de glioma usando tecnologia Seahorse. Este método permite avaliar respostas a drogas e elucidar mecanismos de resistência tumoral em modelos clinicamente relevantes.

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<ol><li>Wu, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glioblastoma+multiforme+%28GBM%29%3A+An+overview+of+current+therapies+and+mechanisms+of+resistance%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol+Res%22%5BJournal%5D)">Glioblastoma multiforme (GBM): An overview of current therapies and mechanisms of resistance.</a> Pharmacol Res. 171, 105780(2021).</li>
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<li>Bahl, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Growing+desmoplastic+three-dimensional+pancreatic+cancer+spheroids+from+coculture%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Growing desmoplastic three-dimensional pancreatic cancer spheroids from coculture.</a> J Vis Exp. 211, e66625(2024).</li>
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<li>Plitzko, B., Loesgen, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measurement+of+oxygen+consumption+rate+%28OCR%29+and+extracellular+acidification+rate+%28ECAR%29+in+culture+cells+for+assessment+of+the+energy+metabolism%5BTitle%5D)+AND+%22Bio+Protoc%22%5BJournal%5D)">Measurement of oxygen consumption rate (OCR) and extracellular acidification rate (ECAR) in culture cells for assessment of the energy metabolism.</a> Bio Protoc. 8 (10), e2850(2018).</li>
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<li>Kapałczyńska, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((2D+and+3D+cell+cultures+-+a+comparison+of+different+types+of+cancer+cell+cultures%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Med+Sci%22%5BJournal%5D)">2D and 3D cell cultures - a comparison of different types of cancer cell cultures.</a> Arch Med Sci. 14 (4), 910-919 (2018).</li>
<li>Rybkowska, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+metabolic+changes+between+monolayer+%282D%29+and+three-dimensional+%283D%29+culture+conditions+in+human+mesenchymal+stem%2Fstromal+cells+derived+from+adipose+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22Cells%22%5BJournal%5D)">The metabolic changes between monolayer (2D) and three-dimensional (3D) culture conditions in human mesenchymal stem/stromal cells derived from adipose tissue.</a> Cells. 12 (1), 178(2023).</li>
<li>Białkowska, K., Komorowski, P., Bryszewska, M., Miłowska, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spheroids+as+a+type+of+three-dimensional+cell+cultures-examples+of+methods+of+preparation+and+the+most+important+application%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Spheroids as a type of three-dimensional cell cultures-examples of methods of preparation and the most important application.</a> Int J Mol Sci. 21 (17), 6225(2020).</li>
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<li>Dominijanni, A. J., Devarasetty, M., Forsythe, S. D., Votanopoulos, K. I., Soker, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell+viability+assays+in+three-dimensional+hydrogels%3A+A+comparative+study+of+accuracy%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Eng+Part+C+Methods%22%5BJournal%5D)">Cell viability assays in three-dimensional hydrogels: A comparative study of accuracy.</a> Tissue Eng Part C Methods. 27 (7), 401-410 (2021).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Prato de 10 cm</td><td>Corning</td><td>430167</td><td></td></tr><tr><td>Tubo de centrífuga de 15 mL</td><td>Corning</td><td>430791</td><td></td></tr><tr><td>Tubo de centrífuga de 50 mL</td><td>Corning</td><td>430828</td><td></td></tr><tr><td>Calceína, AM</td><td>Invitrogen</td><td>C1430</td><td></td></tr><tr><td>Condessa 3</td><td>Thermo Fisher</td><td></td><td>Contador automático de células</td></tr><tr><td>Soro fetal bovino</td><td>Gibco</td><td>A5669701</td><td></td></tr><tr><td>Harmonia 5.2</td><td>PerkinElmer</td><td></td><td>Software de imagem</td></tr><tr><td>Hoechst 33342</td><td>Solarbio</td><td>C0031</td><td></td></tr><tr><td>MEM EBSS Médio</td><td>HyClone</td><td>SH30024.01</td><td></td></tr><tr><td>Opereta CLS</td><td>PerkinElmer</td><td></td><td>Sistema de análise de imagem de alto conteúdo</td></tr><tr><td>PBS</td><td>HyClone</td><td>SH30256.01</td><td></td></tr><tr><td>Bromidrato de poli-D lisina</td><td>Sigma&nbsp;</td><td>Pág. 7280</td><td></td></tr><tr><td>Placas de 96 poços de fixação ultrabaixa de fundo redondo</td><td>Corning</td><td>4515</td><td></td></tr><tr><td>Software de desktop Seahorse Wave</td><td>Agilent</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Cavalo-marinho XFe96</td><td>Agilent</td><td></td><td>Máquina de teste metabólico extracorpóreo</td></tr><tr><td>Sorvall ST8R</td><td>Thermo Fisher</td><td></td><td>Centrifuga</td></tr><tr><td>TRIPSINA 0,25% EDTA</td><td>Gibco</td><td>25200072</td><td></td></tr><tr><td>Linha celular U87MG&nbsp;</td><td>Infraestrutura Nacional de Recursos Celulares</td><td></td><td></td></tr><tr><td>XF 1,0 M Solução de Glicose, 50 mL</td><td>Agilent</td><td>103577-100</td><td></td></tr><tr><td>XF 100 mM Solução de piruvato, 50 mL</td><td>Agilent</td><td>103578-100</td><td></td></tr><tr><td>XF 200 mM Solução de Glutamina, 50 mL</td><td>Agilent</td><td>103579-100</td><td></td></tr><tr><td>Solução Calibrante XF 500 mL&nbsp;</td><td>Agilent</td><td>100840-000</td><td></td></tr><tr><td>Kit de teste de estresse XF Cell Mito</td><td>Agilent</td><td>103015-100</td><td></td></tr><tr><td>Meio XF DMEM, pH 7,4, 500 mL</td><td>Agilent</td><td>103575-100</td><td></td></tr><tr><td>XFe96/XF Pro Fluxpak-Matriz de Sondas de Detecção</td><td>Agilent</td><td>103792-100</td><td></td></tr><tr><td>XFe96/XF Pro Fluxpak-Placas de Ensaio Metabólico</td><td>Agilent</td><td>103792-100</td><td></td></tr></tbody></table>

avanços no perfil metabólico de esferoides tridimensionais de tumores cerebrais para triagem de drogas

Advancements in the Metabolic Profiling of Three-Dimensional Brain Tumor Spheroids for Drug Screening

As três etapas mais críticas no processo de detecção do metabolismo energético de esferoides de células 3D são a cultura de esferoides de células 3D, o processo de transferência de esferoides e a imagem e quantificação de esferoides após a detecção (Figura 1). Além disso, observar o estado dos esferóides celulares é muito importante. Quando os experimentos foram conduzidos de acordo com os procedimentos experimentais acima mencionados, os esferoides foram detectados no5º dia (<str...

Avanços no perfil metabólico de esferoides tridimensionais de tumores cerebrais para triagem de drogas

Brain tumors, especially gliomas, are challenging to treat because of their aggressive nature, complex tumor microenvironment, and resistance to ...

advancements-metabolic-profiling-three-dimensional-brain-tumor

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Pesquisa sobre o Câncer

A invasão dos tecidos normais circundantes é uma característica definidora dos tumores malignos. Fornecemos aqui um ensaio simples e semi-automatizado de microplacas de invasão em uma biomatriz 3D natural que foi exemplificada com vários modelos de cânceres humanos avançados.

Tridimensional (3D) Tumor Esferóide Invasion Assay

Xenoenxertos derivados de pacientes de glioblastoma multiforme podem ser miniaturizados em microtumores vivos usando o sistema de cultura de biogel humano 3D. Este ensaio tumoral 3D semelhante ao in vivo é adequado para testes de resposta a medicamentos e perfis moleculares, incluindo análise cinômica.

Geração de Microtumors Usando 3D Biogel Humano Sistema de Cultura e células de glioblastoma derivado do paciente para Kinomic Profiling e Testes resposta à droga

Aqui, um método é descrito para a preparação de co-cultura 3-dimensional (3D) esferoide de células de câncer no pâncreas e fibroblastos, seguidos por medição das funções metabólicas, usando um analisador de fluxo extracelular.

Preparação e ensaio metabólico de 3-dimensional Spheroid co culturas de células de câncer no pâncreas e fibroblastos

Uma grande variedade de indicações de doença, modelos mais fisiologicamente relevantes estão sendo programas de descoberta de drogas desenvolvida e implementada em. O novo sistema de modelo aqui descrito demonstra como tridimensional tumor esferoides podem ser cultivadas e exibidos em um sistema de baseado em placa de 1536-bem elevado-throughput para pesquisar novas drogas de Oncologia.

Geração de esferoides Tumor tridimensional de alta produtividade para triagem de drogas

Tomografia de coerência óptica (OCT), uma tecnologia de imagem tridimensional, foi usada para monitorar e caracterizar a cinética de crescimento de esferoides tumor multicelulares. Precisa quantificação volumétrica de esferoides tumor usando um voxel contando a abordagem e deteção de tecido livre de rótulo morto nos esferoides baseado no contraste intrínseco atenuação óptica, foram demonstradas.

Longitudinal de morfológicas e fisiológicas, monitoramento de esferoides Tumor tridimensional usando a tomografia de coerência óptica

Os efeitos de inibidores migrastatic na migração da pilha do cancro do glioma em ensaios tridimensionais da invasão (3D) usando um inibidor do do histone do histona (HDAC) são caracterizados pela microscopia confocal de alta resolução.

Caracterização dos efeitos de inibidores de Migrastatic na invasão do spheroid do tumor 3D pela microscopia confocal de alta resolução

Aqui, descrevemos um ensaio de invasão fácil de usar para glioblastoma. Este ensaio é adequado para células-tronco de glioblastoma. Uma macro Fiji para fácil quantificação de invasão, migração e proliferação também é descrita.

Um modelo esferóide 3D para glioblastoma

Esses protocolos ajudarão os usuários a sondar o metabolismo de energia mitocondrial em esferoides derivados de células cancerígenas 3D usando a análise de fluxo extracelular do Seahorse.

Explorando o metabolismo de energia mitocondrial de spheróides microtissue 3D únicos usando análise de fluxo extracelular

O presente protocolo descreve a geração de modelos de cultura tumoral 3D a partir de células cancerosas primárias e a avaliação de sua sensibilidade a drogas por meio de ensaios de viabilidade celular e exames microscópicos.

Estabelecendo esferoides tridimensionais de amostras tumorais derivadas de pacientes e avaliando sua sensibilidade a drogas

Este artigo demonstra um método padronizado para a construção de esferoides tumorais tridimensionais. Uma estratégia para observação esferoide e análise de aprendizagem profunda baseada em imagens usando um sistema de imagem automatizado também é descrita.

Geração de esferoides tumorais 3D para estudos de avaliação de fármacos

Aprenda a realizar perfil metabólico de esferoides tridimensionais de glioma usando tecnologia Seahorse. Este método permite avaliar respostas a drogas e elucidar mecanismos de resistência tumoral em modelos clinicamente relevantes.

Avanços no perfil metabólico de esferoides tridimensionais de tumores cerebrais para triagem de drogas

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