Name: Ensaio de Migração de Glioblastoma 3D Reproduzível com Localização Magnética de Esferoides Mediadas por Nanopartículas sob Condições Hipóxicas (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-05-12T13:10:00.000+00:00
Duration: 7 min 55 s
Description: Aprenda um ensaio de migração 3D reproduzível para glioblastoma usando nanopartículas magnéticas de óxido de ferro e gliomaspheras derivadas de pacientes. Este método permite estudar comportamento migratório em condições hipóxicas clinicamente relevantes.

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<ol><li>Singh, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glioblastoma+at+the+crossroads%3A+Current+understanding+and+future+therapeutic+horizons%5BTitle%5D)+AND+%22Signal+Transduct+Target+Ther%22%5BJournal%5D)">Glioblastoma at the crossroads: Current understanding and future therapeutic horizons.</a> Signal Transduct Target Ther. 10 (1), 213(2025).</li>
<li>Spitzer, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Deciphering+the+longitudinal+trajectories+of+glioblastoma+ecosystems+by+integrative+single-cell+genomics%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Genet%22%5BJournal%5D)">Deciphering the longitudinal trajectories of glioblastoma ecosystems by integrative single-cell genomics.</a> Nat Genet. 57 (5), 1168-1178 (2025).</li>
<li>Dirkse, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stem+cell-associated+heterogeneity+in+glioblastoma+results+from+intrinsic+tumor+plasticity+shaped+by+the+microenvironment%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Stem cell-associated heterogeneity in glioblastoma results from intrinsic tumor plasticity shaped by the microenvironment.</a> Nat Commun. 10 (1), 1787(2019).</li>
<li>Dejaegher, J., De Vleeschouwer, S. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aDejaegher%2C+J+%22Glioblastoma%22">Glioblastoma</a>. De Vleeschouwer, S. , Brisbane (AU). (2017).</li>
<li>Restall, I., Bozek, D. A., Chesnelong, C., Weiss, S., Luchman, H. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Live-cell+imaging+assays+to+study+glioblastoma+brain+tumor+stem+cell+migration+and+invasion%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Live-cell imaging assays to study glioblastoma brain tumor stem cell migration and invasion.</a> J Vis Exp. (138), e58152(2018).</li>
<li>Xie, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+human+glioblastoma+cell+culture+resource%3A+Validated+cell+models+representing+all+molecular+subtypes%5BTitle%5D)+AND+%22EBioMedicine%22%5BJournal%5D)">The human glioblastoma cell culture resource: Validated cell models representing all molecular subtypes.</a> EBioMedicine. 2 (10), 1351-1363 (2015).</li>
<li>Paolillo, M., Comincini, S., Schinelli, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+glioblastoma+models%3A+A+journey+into+the+third+dimension%5BTitle%5D)+AND+%22Cancers+%28Basel%29%22%5BJournal%5D)">In vitro glioblastoma models: A journey into the third dimension.</a> Cancers (Basel). 13 (10), 2449(2021).</li>
<li>Aye, K. T. N., Ferreira, J. N., Chaweewannakorn, C., Souza, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advances+in+the+application+of+iron+oxide+nanoparticles+%28ions+and+spions%29+in+three-dimensional+cell+culture+systems%5BTitle%5D)+AND+%22SLAS+Technol%22%5BJournal%5D)">Advances in the application of iron oxide nanoparticles (ions and spions) in three-dimensional cell culture systems.</a> SLAS Technol. 29 (3), 100132(2024).</li>
<li>Das, V., Furst, T., Gurska, S., Dzubak, P., Hajduch, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reproducibility+of+uniform+spheroid+formation+in+384-well+plates%3A+The+effect+of+medium+evaporation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biomol+Screen%22%5BJournal%5D)">Reproducibility of uniform spheroid formation in 384-well plates: The effect of medium evaporation.</a> J Biomol Screen. 21 (9), 923-930 (2016).</li>
<li>Das, V., Furst, T., Gurska, S., Dzubak, P., Hajduch, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaporation-reducing+culture+condition+increases+the+reproducibility+of+multicellular+spheroid+formation+in+microtiter+plates%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Evaporation-reducing culture condition increases the reproducibility of multicellular spheroid formation in microtiter plates.</a> J Vis Exp. (121), e55403(2017).</li>
<li>Mansoury, M., Hamed, M., Karmustaji, R., Al Hannan, F., Safrany, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+edge+effect%3A+A+global+problem.+The+trouble+with+culturing+cells+in+96-well+plates%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+Biophys+Rep%22%5BJournal%5D)">The edge effect: A global problem. The trouble with culturing cells in 96-well plates.</a> Biochem Biophys Rep. 26, 100987(2021).</li>
<li>Zanoni, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((3d+tumor+spheroid+models+for+in+vitro+therapeutic+screening%3A+A+systematic+approach+to+enhance+the+biological+relevance+of+data+obtained%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">3d tumor spheroid models for in vitro therapeutic screening: A systematic approach to enhance the biological relevance of data obtained.</a> Sci Rep. 6, 19103(2016).</li>
<li>Schindelin, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fiji%3A+An+open-source+platform+for+biological-image+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Fiji: An open-source platform for biological-image analysis.</a> Nat Methods. 9 (7), 676-682 (2012).</li>
<li>Arganda-Carreras, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Trainable+weka+segmentation%3A+A+machine+learning+tool+for+microscopy+pixel+classification%5BTitle%5D)+AND+%22Bioinformatics%22%5BJournal%5D)">Trainable weka segmentation: A machine learning tool for microscopy pixel classification.</a> Bioinformatics. 33 (15), 2424-2426 (2017).</li>
<li>Sayde, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reproducible+3d+culture+of+multicellular+tumor+spheroids+in+supramolecular+hydrogel+from+cancer+stem+cells+sorted+by+sedimentation+field-flow+fractionation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Chromatogr+A%22%5BJournal%5D)">Reproducible 3d culture of multicellular tumor spheroids in supramolecular hydrogel from cancer stem cells sorted by sedimentation field-flow fractionation.</a> J Chromatogr A. 1736, 465393(2024).</li>
<li>Lee, S., Lim, J., Kwak, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Factors+of+bias+in+spheroid-based+drug+screening%3A+Fabrication+method%2C+spheroid+size%2C+and+cell+viability%5BTitle%5D)+AND+%22Biomed+Pharmacother%22%5BJournal%5D)">Factors of bias in spheroid-based drug screening: Fabrication method, spheroid size, and cell viability.</a> Biomed Pharmacother. 192, 118597(2025).</li>
<li>Aisenbrey, E. A., Murphy, W. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synthetic+alternatives+to+matrigel%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Mater%22%5BJournal%5D)">Synthetic alternatives to matrigel.</a> Nat Rev Mater. 5 (7), 539-551 (2020).</li>
<li>Barbugian, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bioresponsive+hyaluronic+acid-based+hydrogel+inhibits+matrix+metalloproteinase-2+in+glioblastoma+microenvironment%5BTitle%5D)+AND+%22ChemMedChem%22%5BJournal%5D)">Bioresponsive hyaluronic acid-based hydrogel inhibits matrix metalloproteinase-2 in glioblastoma microenvironment.</a> ChemMedChem. 20 (15), e202401040(2025).</li>
<li>Carvalho, E. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Viscoelastic+high-molecular-weight+hyaluronic+acid+hydrogels+support+rapid+glioblastoma+cell+invasion+with+leader-follower+dynamics%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Mater%22%5BJournal%5D)">Viscoelastic high-molecular-weight hyaluronic acid hydrogels support rapid glioblastoma cell invasion with leader-follower dynamics.</a> Adv Mater. 36 (50), e2404885(2024).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>KIT DE BIOIMPRESSÃO DE 96 POÇOS, TRANSPARENTE</td><td>Greiner</td><td>655840</td><td></td></tr><tr><td>Accutase</td><td>Invitrogen</td><td>00-4555-56</td><td>N/A</td></tr><tr><td>Suplemento B-27 (50X), soro&nbsp; livre sem vitamina A</td><td>Gibco</td><td>12587010</td><td>10%</td></tr><tr><td>Fator de Crescimento Básico de Fibroblastos, Humano & nbsp; (bFGF)</td><td>PeproTech</td><td>100-18B</td><td>20&nbsp; ng/ml</td></tr><tr><td>Celldiscoverer&nbsp; 7</td><td>Zeiss</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>Microplacas Esferoides de Corning</td><td>Corning</td><td>CLS4515</td><td></td></tr><tr><td>Matriz Matrigel de Corning</td><td>Corning</td><td>354234</td><td>diluição final 1:100</td></tr><tr><td>Contador Automático de Células Countess</td><td>Invitrogen</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>DMEM-F12&nbsp; (500ml)</td><td>Termofischer</td><td>11320-074</td><td>N/A</td></tr><tr><td>Fator de Crescimento Epidérmico Humano (EGF)</td><td>PeproTech</td><td>AF-100-15</td><td>20&nbsp; ng/ml</td></tr><tr><td>FITC Mouse Anti-Human CD44</td><td>BD Pharmingen</td><td>555478</td><td>1:100</td></tr><tr><td>Microplacas de cultura celular de poliestireno Greiner CELLSTAR 96 Poço com fundo F/Poço de chaminé, e micro; Transparente, preto, TC, estéril, com tampa</td><td>Greiner</td><td>655090</td><td></td></tr><tr><td>Heparine</td><td>Termofischer</td><td>A16198</td><td>5&micro; G/ml</td></tr><tr><td>Hoechst 33258</td><td>&nbsp; Sigma Aldrich (Merck)</td><td>861405</td><td>1&micro; G/ml</td></tr><tr><td>NanoShuttle-PL</td><td>Greiner</td><td>657841</td><td>1,5&nbsp; & micro; 1/10.000 células</td></tr><tr><td>Penicilina - Estreptomicina</td><td>Merck</td><td>P4333</td><td>1%</td></tr></tbody></table>

ensaio de migração de glioblastoma 3d reproduzível com localização magnética de esferoides mediadas por nanopartículas sob condições hipóxicas

Reproducible 3D Glioblastoma Migration Assay with Magnetic Nanoparticle Mediated Spheroid Localization Under Hypoxic Conditions

Ensaio de Migração de Glioblastoma 3D Reproduzível com Localização Magnética de Esferoides Mediadas por Nanopartículas sob Condições Hipóxicas

We describe a reproducible 3D migration assay to model the migratory and invasive potential of patient-derived glioblastoma gliomaspheres from newly ...

reproducible-3d-glioblastoma-migration-assay-with-magnetic

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Pesquisa sobre o Câncer

Fonte: Guyon, J., et al. Um modelo esferóide 3D para glioblastoma. J. Vis. Exp. (2020)O vídeo demonstra a geração de um modelo esferóide tridimensional de invasão de células tumorais. Os esferóides são formados a partir de células tumorais cerebrais humanas e incorporados em uma matriz de colágeno. As células tumorais na periferia esferóide adotam um fenótipo invasivo, secretando proteases para degradar o colágeno e avançando para invadir a matriz circundante.

Geração de um modelo esferóide tridimensional de invasão de células tumorais

Fonte: Pericoli, G. et. al., Ensaios de imunocitoquímica de células 3D vivas de glioma de linha média difusa pediátrica. J. Vis. Exp. (2021)Este vídeo demonstra imagens de células vivas para observar a migração de células de glioma de linha média difusa pediátrica usando marcação imuno-histoquímica com anticorpos anti-CD44.

Imagem baseada em imunocitoquímica para visualização da migração de células de glioma pediátrico

A invasão dos tecidos normais circundantes é uma característica definidora dos tumores malignos. Fornecemos aqui um ensaio simples e semi-automatizado de microplacas de invasão em uma biomatriz 3D natural que foi exemplificada com vários modelos de cânceres humanos avançados.

Tridimensional (3D) Tumor Esferóide Invasion Assay

Aqui, um método é descrito para a preparação de co-cultura 3-dimensional (3D) esferoide de células de câncer no pâncreas e fibroblastos, seguidos por medição das funções metabólicas, usando um analisador de fluxo extracelular.

Preparação e ensaio metabólico de 3-dimensional Spheroid co culturas de células de câncer no pâncreas e fibroblastos

Aqui, descrevemos técnicas de imagem ao vivo-celular para medir quantitativamente a migração e invasão de células-tronco tumor glioblastoma cerebral ao longo do tempo e sob várias condições de tratamento.

Imagem latente da viver-pilha ensaios de migração de células-tronco do estudo Glioblastoma cerebral Tumor e invasão

Os efeitos de inibidores migrastatic na migração da pilha do cancro do glioma em ensaios tridimensionais da invasão (3D) usando um inibidor do do histone do histona (HDAC) são caracterizados pela microscopia confocal de alta resolução.

Caracterização dos efeitos de inibidores de Migrastatic na invasão do spheroid do tumor 3D pela microscopia confocal de alta resolução

A microdissecção a laser (LMD) é uma técnica sensível e altamente reprodutível que pode ser usada para descobrir caminhos que mediam a heterogeneidade e invasão do glioma. Aqui, descrevemos um protocolo otimizado para isolar áreas discretas do tecido glioma usando LMD a laser seguido de análise transcritiva.

Microdissecção de Captura a Laser de Sub-regiões de Glioma para Caracterização Espacial e Molecular da Heterogeneidade Intratumoral, Oncostreams e Invasão

Aqui, descrevemos um ensaio de invasão fácil de usar para glioblastoma. Este ensaio é adequado para células-tronco de glioblastoma. Uma macro Fiji para fácil quantificação de invasão, migração e proliferação também é descrita.

Um modelo esferóide 3D para glioblastoma

Aqui, apresentamos um ensaio de cocultura fácil de usar para analisar a migração de glioblastoma (GBM) em neurônios padronizados. Desenvolvemos uma macro no software FiJi para fácil quantificação da migração celular GBM em neurônios, e observamos que os neurônios modificam a capacidade invasiva celular GBM.

Co-cultura de células-tronco semelhantes ao Glioblastoma em neurônios padronizados para estudar migração e interações celulares

Aqui, estabelecemos uma plataforma de perfil metabólico integrando esferóides de glioma tridimensionais (3D) e normalização baseada em imagem por meio de análise de fluxo extracelular. Essa abordagem permite uma avaliação mais precisa das respostas metabólicas do tumor aos tratamentos medicamentosos e fornece informações sobre os possíveis mecanismos de resistência.

Avanços no perfil metabólico de esferoides tridimensionais de tumores cerebrais para triagem de drogas

Aprenda um ensaio de migração 3D reproduzível para glioblastoma usando nanopartículas magnéticas de óxido de ferro e gliomaspheras derivadas de pacientes. Este método permite estudar comportamento migratório em condições hipóxicas clinicamente relevantes.

Ensaio de Migração de Glioblastoma 3D Reproduzível com Localização Magnética de Esferoides Mediadas por Nanopartículas sob Condições Hipóxicas (Vídeo) | JoVE Journal

Ensaio de Migração de Glioblastoma 3D Reproduzível com Localização Magnética de Esferoides Mediadas por Nanopartículas sob Condições Hipóxicas

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