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DOI: 10.3791/947-v
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Suportados bicamadas planar são ferramentas poderosas que podem ser usados para modelar as interações moleculares em uma sinapse imunológica. Aqui, vamos mostrar os métodos de ancoragem de proteínas de adesão celular que modula a formação de sinapses para o folheto superior do bilyer lipídico e visualize a formação de sinapses através de microscopia TIRF.
Olá, sou Mike Dustin, do Instituto Geral e da Escola de Medicina da Universidade de Nova York. Hoje vou levá-lo através do procedimento de formação de Biolay planar de suporte para estudo da sinapse imunológica. Então vamos começar.
Para fazer a bicamada lipídica, preparamos uma solução de 20% de níquel, lipídio quelante e 80% de fosfatidilcolina nas quantidades apropriadas em um tubo de vidro com um a dois mililitros de clorofórmio metanol. O primeiro passo é evaporar o solvente sob uma corrente de gás nitrogênio em um banho-maria quente de 30 a 37 graus Celsius. Isso geralmente leva cerca de 15 minutos.
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