Монтирование мозга взрослой дрозофилы: метод подготовки слайдов для конфокальной визуализации

Аннотация

Источник: Kelly, S. M., et al. Диссекция и иммунофлуоресцентное окрашивание тел грибов и фоторецепторных нейронов в мозге взрослых Drosophila melanogaster. J. Vis. Exp. (2017).

Это видео описывает метод монтажа неповрежденных мозгов взрослых мух под горку моста и показывает протокол, выполненный на иммуноокрашенных мозгах для флуоресцентной микроскопии.

Протокол

Этот протокол является выдержкой из Kelly et al., Dissection and Immunofluorescent Staining of Mushroom Body and Photoreceptor Neurons in Adult Drosophila melanogaster Brains, J. Vis. Exp. (2017).

1. Крепление мозга взрослого D. melanogaster на предметные стекла микроскопа и визуализация

1. Соорудите горку-«мостик». Расположите два «базовых» покровных стекла на расстоянии примерно 1 см друг от друга на положительно заряженном предметном стекле. Убедитесь, что положительно заряженная сторона предметного стекла обращена вверх. Приклейте покровные стекла к предметному стеклу лаком для ногтей, как по....

Результаты

Рисунок 1: Монтирование мозга при подготовке к иммунофлуоресцентной визуализации. (A) Мозги устанавливаются на слайды SuperFrost Plus с крышкой моста для предотвращения сплющивания мозга. Два «базовых» защитных стекла приклеиваются к положительно заряженному предметному стеклу Superfrost Plus с прозрачным лаком для ногтей, а затем на предметное стекло между ними помещаются препарированные мозги. Прозрачн.......

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье

Имя	Компания	Каталожный номер	Комментарии
Микродиссекционные щипцы/пинцет	Тед Пелла	505-НМ
ВектаЩит	Векторные лаборатории	Н-1000
Горки SuperFrost Plus	ТермоФишер	99-910-01
Покровные стекла	ТермоФишер	Тел.: 12-553-454
лак для ногтей	Услуги электронного микроскопа (EMS)	72180
Стереомикроскоп	Leica S6D со светодиодным источником света KL300
Кимвайп	рыбак	06-666