Замораживание нематод: метод обнажения внутренних тканей червей для окрашивания

Аннотация

Источник: Zhang, N., et al. Кишечник C. elegans как модель межклеточного морфогенеза просвета и биогенеза поляризованной мембраны in vivo на уровне одной клетки: мечение с помощью окрашивания антителами, анализ потери функции РНК-интерференции и визуализация. J. Vis. Exp. (2017).

Это видео описывает замораживание-растрескивание, метод, позволяющий сделать ткани C. elegans доступными для окрашивания антителами путем разрушения кутикулы.

Протокол

Этот протокол является выдержкой из Zhang et al, The C. elegans Gut As a Model for Intercellular Lumen Morphogenesis and In vivo Polarized Membrane Biogenesis at the Single-cell Level: Labeling by Antibody Staining, RNAi Loss-of-function Analysis and Imaging, J. Vis. Exp. (2017).

Окрашивание антителами кишечника C. elegans

1. фиксация
   1. Возьмите чистое предметное стекло и используйте поли-L-лизин, чтобы создать тонкую пленку, на которую прилипнут черви. Поместите 30 мкл 0,1-0,2% поли-L-лизина на предметное стекло и поместите вт....

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье

Имя	Компания	Каталожный номер	Комментарии
Окрашивание антителами
поли-L-лизин	сигма	П5899
Метанол	Научный центр Фишера	А452-4
Ацетон	Научный центр Фишера	А949СК-4
Permount	Научный центр Фишера	СП15-100
Предметные стекла микроскопа	Научный центр Фишера	4448
Покровные стекла микроскопа (22x22-1)	Научный центр Фишера	12-542-Б
M9 Средний			Сделано в лаборатории
бактерии OP50	КГК