Методическая статья

Микро-рассечение мозга крысы для РНК или белка Извлечение из конкретного региона мозга

DOI:

10.3791/269

⸱

30 августа 2007 г.

 ,  ,  ,  , 
1Laboratory of Neurodegenerative Diseases, Department of Anatomy, LKS Faculty of Medicine, The University of Hong Kong - HKU

В этой статье

Краткое содержание

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Микро-рассечение мозга крыс в различных регионах является чрезвычайно важным для изучения различных нейродегенеративных заболеваний. Это видео демонстрирует микро-рассечение из четырех основных областей мозга включают обонятельной луковице, лобной коре, стриатуме и гиппокампе в свежей ткани мозга крысы. Полезные советы для быстрого удаления соответствующих регионов, чтобы избежать РНК и белка деградация ткани даны.

Аннотация

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Микро-рассечение мозга крыс в различных регионах является чрезвычайно важным для изучения различных нейродегенеративных заболеваний. Это видео демонстрирует микро-рассечение из четырех основных областей мозга включают обонятельной луковице, лобной коре, стриатуме и гиппокампе в свежей ткани мозга крысы. Полезные советы для быстрого удаления соответствующих регионов, чтобы избежать РНК и белка деградация ткани даны.

Протокол

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Шаг 1

Жертва крысы в ​​соответствии с установленными протоколами. Удалить мозг от черепа и промойте его в ледяной DEPC рассматриваться Милли Q водой, чтобы удалить любой поверхности крови.

Шаг 2

Место на холодную металлическую пластину. Вырезать мозга би половину на правую и левого полушария.

figure-protocol-1

Рисунок 1. Резка позиции от медиальной зрения крысы полушарии

Шаг 3

Сбор обонятельной луковицы сразу после первого разреза. Flash Freeze образца в жидком азоте и хранят при температуре -80 ° C.

figure-protocol-2

Рисунок 2. Обонятельные вскрытия лампы

Шаг 4

Сбор фронтальной коры права после второй разрез, используя лезвие и Дюмон № 5 щипцами. Flash Freeze образца в жидком азоте и хранят при температуре -80 ° C.

figure-protocol-3

Рисунок 3. Фронтальная рассечение коры

Шаг 5

Сбор полосатом теле (хвостатое ядро) сразу после третьего вырезать с помощью двух Дюмон щипцы № 5. Flash Freeze образца в жидком азоте и хранят при температуре -80 ° C.

figure-protocol-4

Рисунок 4. Стриатум (хвостатое ядро) рассечение

Шаг 6

Для сбора гиппокампе, положить брюшной стороне мозга, а потом удалить мозга подвергать гиппокампе. Рассеките гиппокампа от коры головного мозга с помощью двух Дюмон № 5 щипцами. Flash Freeze образца в жидком азоте и хранят при температуре -80 ° C.

figure-protocol-5

Рисунок 5. Гиппокамп рассечение

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Различные области мозга ассоциируются с различными нейродегенеративными заболеваниями. Например, лобной коре и полосатом теле связаны с болезнью Паркинсона в то время как гиппокамп связан с болезнью Альцгеймера. Точное микро-рассечение мозга позволяет нам обнаружить мРНК и белка изменения в пораженной зоне более точно.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
Животных были обработаны в соответствии с протоколом для использования животных в исследованиях утвержденной Комитетом по использованию живых животных в области преподавания и исследований (CULATR) в Университете Гонконга и в соответствии с Национальными Институтами Здоровья руководящие принципы для использования животных.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
МикроскопOlympus Corporation
Инструменты для диссекцииМеталлическая пластина, пинцет, скальпель и т.д. Индивидуально обернуты алюминиевой фольгой и нагреты при 180°C в течение восьми часов для инактивации РНКаз. Перед использованием охлаждены на льду.

Ссылки

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Palkovits, M. Maps and guide to micro-dissection of the rat brain. , Elsevier. New York. (c.1988).
  2. Swanson, L. W. Brain maps: structure of the rat brain. 3rd revised edition. , Elsevier Academic Press. (2004).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на повторное использование текста или иллюстраций этой статьи JoVE

Запросить разрешение

Теги

Похожие статьи