Приготовление наноэмульсионной адъювантной вакцины

Аннотация

Источник: Zhang, Z. et al., Подготовка, характеристики, токсичность и оценка эффективности назальной самоорганизующейся наноэмульсионной опухолевой вакцины in vitro и in vivo.J. Vis. Exp. (2022)

Это видео демонстрирует производство наноэмульсионных вакцин против опухолей. Стабильные нефтехранилища, несущие синтетические пептиды и адъюванты, производятся с помощью низкоэнергетической наноэмульсии, что открывает значительные перспективы для иммунотерапии опухолей.

Протокол

1. Подготовка I-OVA NE

1. Смешайте 1 мг монофосфориллипида А (МПЛА) со 100 мкл диметилсульфоксида (ДМСО) в течение 5 мин и дайте постоять в течение 4 ч при комнатной температуре (ОТ) для полного растворения.
2. Добавьте Tween 80 и IKVAV-OVA_257-264 (I-OVA) количественно и перемешайте.
   заметка: Tween 80 и I-OVA смешивали в соотношении масс 25:1.
3. Добавьте сквален в смесь, приготовленную на шаге 1.2 (7:3, Smix: сквален).
4. Добавьте 100 мкл раствора МПЛА (10 мг/мл) в смесь, приготовленную на шаге 1.3.
5. Приготовьте наноэмульсионную вакцину с использованием низкоэнергетических методов эмульгирования: добавьте смешанный раствор к каплям воды примерно на 70% от общего объема и осторожно перемешайте до получения прозрачной и легко сыпучей смеси.
   заметка: Таким же методом готовили контроль BNE (пустую эмульсию), заменяя воду на I-OVA.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье

Имя	Компания	Каталожный номер	Комментарии
МПЛА	Invivogen Лит.	TLRL-MPLA
ОВА257–264	Шанхай Ботай<бр /> Биотехнологическая компания, ООО	NA
Конъюгация синтетического пептида (I-OVA) IKVAV-PA	Шанхай Ботай<бр /> Биотехнологическая компания, ООО	NA