Method Article

Хронический Сужение седалищного нерва и боль Гиперчувствительность тестирования у крыс

DOI:

10.3791/3393

March 13th, 2012

In This Article

Summary

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Благодаря простоте операции и надежный поведенческий результат, хроническая сжатия седалищного нерва является одним из самых выдающихся животных моделях нейропатической боли. В течение 24 часов после операции, боль гиперчувствительности установлена ​​и может быть количественно измерена с помощью фон Фрей aesthesiometer (механических испытаний) и подошвенные метр обезболивания (тепловых испытаний).

Abstract

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Хроническая нейропатическая боль, возникающая в результате повреждения центральной или периферической нервной системы, является распространенным и изнурительным заболеванием, поражающим 7-18% населения1,2. Симптомы включают спонтанную (покалывание, жжение, похожее на поражение электрическим током) боль, дисестезию, парестезию, аллодинию (боль, возникающую в результате обычно безболезненных раздражителей) и гипералгезию (повышенную реакцию на болевые раздражители). Сенсорные симптомы сочетаются с поведенческими нарушениями, такими как бессонница и депрессия. Для изучения хронической нейропатической боли было разработано несколько животных моделей, имитирующих повреждение периферических нервов, одной из наиболее широко используемых является односторонняя травма хронического сужения седалищного нерва (ЧМТ) Bennett and Xie (1988). Здесь мы представляем метод проведения ЧМТ и тестирования болевой гиперчувствительности.

CCI проводится под анестезией, при этом седалищный нерв с одной стороны обнажается путем разреза кожи и разрезания соединительной ткани между поверхностной ягодичной мышцей и двуглавой мышцей бедра. Четыре хромированные кишечные лигатуры свободно завязываются вокруг седалищного нерва с интервалом в 1 мм, чтобы только окклюзировать, но не останавливать эпиневральный кровоток. Рана закрывается швами в мышце и скобами на коже. Затем животному дают восстановиться после операции в течение 24 часов, прежде чем начнется тестирование на болевую гиперчувствительность.

Для поведенческого тестирования крыс помещают в испытательный аппарат и позволяют привыкнуть к процедуре тестирования. Исследуемой областью является среднеподошвенная поверхность задней лапы (Рисунок 2), которая попадает в зону распределения седалищного нерва. Механический порог изъятия оценивается путем механической стимуляции как поврежденных, так и неповрежденных задних лап с помощью электронного динамического подошвенного эстезиометра фон Фрея или ручного волоса фон Фрея4. Механический порог отрыва — это максимальное давление (в граммах), которое вызывает отведение лапы. Для измерения латентности отвода тепла, впервые описанной Hargreaves et al (1988), задняя лапа подвергается воздействию луча лучистого тепла через прозрачную стеклянную поверхность с помощью подошвенного анальгезиального измерителя5,6. Латентность отведения к тепловому стимулу регистрируется как время отведения лапы как у поврежденных, так и у неповрежденных задних лап. После ЧМТ порог механической абстиненции, а также латентность термического абстиненции в поврежденной лапе значительно снижаются по сравнению с исходными измерениями и неповрежденной лапой (Рисунок 3). Модель повреждения периферических нервов в сочетании с тестом на гиперчувствительность к боли обеспечивает модельную систему для исследования эффективности потенциальных терапевтических агентов для модификации хронической нейропатической боли. В нашей лаборатории мы используем ЧМТ наряду с термической и механической чувствительностью задних лап для изучения роли нейроиммунных взаимодействий в патогенезе и лечении нейропатической боли.

Protocol

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. Седалищного нерва Хронический Сужение

Асептические методы должны быть использованы для хирургического вмешательства. Лечить хирургического рабочую поверхность на 70% этанола и заранее подготовить стерильные инструменты (например, штраф ножницы, щипцы, и втягивающим), сетки, скобы и тампоны в автоклаве. Для нескольких операций, очистки и resterilise инструментов с 70% этанола или сухой шарик стерилизатор между крысами. Хирургические маски, волосы капот и стерильные перчатки.

Для сжатия нерва, подготовка шва хромовой кишечника, сокращая его на мелкие кусочки около 3 см в длину погружения в стерильный физиологич....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Торгово-промышленная палата является широко используемой модели периферического нерва хронической нейропатической боли. Это относительно простая для выполнения, а также производит надежные и стабильные боль гиперчувствительности, по крайней мере одного месяца после травмы. После ТПП, крысы обладают ненормальное положение потерпевшего hindpaw (пальцы удерживаются вместе и согнуты подошвенные, и лапа выворачивается), а также повторные встряхивания, охраны и лизать потерпевшего hindpaw предположить наличие спонтанной боли .......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Эксперименты на животных были утверждены уход животных и Комитет по этике из Университета Нового Южного Уэльса, Австралия, и в соответствии с руководящими выданный Международной ассоциации по изучению боли.

Acknowledgements

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Авторы хотели бы отметить оригинальное описание модели ТПП Беннетта и Се (1988).

Эта работа была частично поддержана грантами от национального здравоохранения и медицинских исследований Совета Австралии (ID # 568637) и Управлением по науке Нового Южного Уэльса и медицинских исследований по Гринвичу.

....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Название реагента / оборудование Компания Номер по каталогу Комментарии
Хромовой кишки Ethicon G-211 4-0 толщиной
Изофлюран Delvet Пти ООО, Seven Hills, NSW н / д
Mersilk Ethicon W-580 5-0 толщиной
Autoclip Becton Dickinson 427631 9 мм из нержавеющей стали
Riodine Орион R1000802F 1% вес / объем йода
Тепловая подошвенной инструмент обезболивания Ugo Basile 37370
Динамический подошвенной aesthesiometer Уго ВасилийE 37400

References

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Bouhassira, D., Lanteri-Minet, M., Attal, N., Laurent, B., Touboul, C. Prevalence of chronic pain with neuropathic characteristics in the general population. Pain. 136, 380-387 (2008).
  2. Toth, C., Lander, J., Wiebe, S. The prevalence and impact of ....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Sciatic Nerve InjuryChronic Constriction InjuryPain Hypersensitivity TestingMechanical Withdrawal ThresholdThermal Withdrawal LatencyVon Frey HairsPlantar Analgesia MeterChromic Gut LigaturesHind Paw StimulationNeuropathic Pain Model

Related Articles