Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Правого желудочка систолическое давление измерений в сочетании с Harvest легких и иммунной образцы тканей у мышей

25.5K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/50023

⸱

16 января 2013 г.

 ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Environmental Medicine, New York University School of Medicine, Tuxedo, 2Division of Allergy, Pulmonary, & Critical Care Medicine, Department of Medicine, Vanderbilt University Medical Center, 3Division of Pulmonary Medicine, New York University School of Medicine

* These authors contributed equally

В этой статье

Краткое содержание

Конкретных и быстрых протоколов одновременно исследовать функцию правого сердца, воспаление легких, и иммунный ответ описывается как инструмент обучения. Видео и цифры описывают физиологию и микродиссекции методы в организованном командой подход, который адаптирован для использования в малых и больших размеров исследований.

Аннотация

Функция правого сердца заключается в том, чтобы перекачивать кровь через легкие, тем самым связывая физиологию правых отделов сердца и физиологию легочных сосудов. Воспаление является распространенным модификатором функции сердца и легких, способствуя клеточной инфильтрации, производству цитокинов и факторов роста, а также запуская процессы ремоделирования 1.

По сравнению с левым желудочком, правый желудочек представляет собой насос низкого давления, который работает в относительно узкой зоне изменения давления. Повышенное давление в легочной артерии связано с повышением давления в легочном сосудистом русле и легочной гипертензией 2. Легочная гипертензия часто связана с воспалительными заболеваниями легких, например, хронической обструктивной болезнью легких, или аутоиммунными заболеваниями 3. Поскольку легочная гипертензия дает плохой прогноз для качества и продолжительности жизни, многие исследования направлены на понимание механизмов, которые могут быть мишенью для фармацевтического вмешательства. Основной проблемой для разработки эффективных инструментов лечения легочной гипертензии остается сложность одновременного понимания молекулярных и клеточных изменений в правом отделе сердца, легких и иммунной системе.

Здесь мы представляем процедурный процесс для быстрого и точного измерения изменений давления в правом сердце мышей и одновременного сбора образцов из сердца, легких и иммунных тканей. Метод основан на прямой катетеризации правого желудочка через яремную вену у мышей с закрытой грудью, впервые разработанной в конце 1990-х годов в качестве суррогатной меры давления в легочной артерии5-13. Организованный командный подход способствует очень быстрой технике катетеризации правых отделов сердца. Это дает возможность проводить измерения на мышах, которые самопроизвольно дышат воздухом в помещении. Организация рабочего процесса в отдельных рабочих зонах сокращает временные задержки и открывает возможность одновременного проведения физиологических экспериментов и забора иммунных, сердечных и легочных тканей.

Описанный здесь процедурный рабочий процесс может быть адаптирован для широкого спектра лабораторных условий и дизайнов исследований, от небольших, целенаправленных экспериментов до крупных анализов скрининга лекарств. Одновременное получение данных по физиологии сердца, которые могут быть расширены за счет эхокардиографии5, 14-17 и забора данных из сердца, легких и иммунных тканей, сокращает количество животных, необходимых для получения данных, которые продвигают вперед базу научных знаний. Представленный здесь процедурный процесс также обеспечивает идеальную основу для получения знаний о сетях, связывающих иммунную, легочную и сердечную функции. Те же принципы, изложенные здесь, могут быть адаптированы для исследования других или дополнительных органов по мере необходимости.

Протокол

1. Подготовка

  1. Подготовьте следующие решения и трубы (таблица 1) следующим образом:
    1. Хэнкс решение, не кальций, магний или индикатора с пенициллина (100 ЕД / мл) / стрептомицин (100 мкг / мл).
    2. Фосфатным буферным раствором (PBS), 1x, ни кальций, ни магний.
    3. Этанол, 70%, составит 500 мл.
    4. Buffered формальдегида, 7-10% с PBS, составит 500 мл.
    5. Анестезия решения:
      1. Avertin. Осторожно добавьте 5 мл 2-метил-2-бутанол до 5 г 2,2,2-Tribromoethanol. После растворения, держать раствор при комнатной температуре в темноте. Возьмите 0,25 мл раствора и разбавить его с 10 мл 1xPBS в стеклянной бутылке дно. Заверните бутылку с алюминиевой фольгой, место при 37 ° С до полного растворения, а затем аликвоты в 5 мл пробирок из полипропилена и хранить в холодильнике. Теплый аликвоты утром эксперимента.
      2. Барбитуратов. Разбавить раствор с PBS, чтобы дать 2,6% барбитуратов зольution. Поместите 3-4 мл аликвоты в полипропиленовых труб.
  2. Организовать три рабочих областей (рис. 1).
    1. Площадь: организовать следующие элементы: исследование форм для записи исследования идентификационный номер, дата, вес тела, вес правого сердца, левого желудочка и перегородки; точность шкалы (0-50 г на уровне 0,01 точностью г) для определения массы тела; микроуровне для определения веса сердца на уровне 0,001 точности г, вес лодки; анестезии решений (четко обозначены); небольшой сосуд Дьюара с жидким азотом; изолированный контейнер со льдом, трубы и 24-луночный планшет для сбора крови и образцах тканей (табл. 1); хирургические инструменты ( Таблица 2, Рисунок 2), а также решения для очистки инструментов (табл. 1).
    2. Зона B: организовать следующие пункты: рассекает микроскопом; право катетером сердце соединено с блоком контроля давления, подключенный к усилителю и портативный компьютер. Катетер встакан с водой. Организовать хирургических инструментов (Таблица 2), части шва путь к оптимальной длины и помещают в лодку весом; ленты (автоклав ленту оптимальной) сократить до оптимальной длины и ширины и выстроились на скамейке микроскопа или лабораторию для легкого доступа; ватные тампоны и Решение для удаления волос. Калибровка катетера в начале исследования.
    3. Зона C: организовать следующие пункты: лупа линзы; трахеи канюли, 1 шприц мл; шовный путь к оптимальной длины и помещают в лодку весом, небольшой сосуд Дьюара с жидким азотом; изолированный контейнер со льдом, трубы и 24-луночный планшет для сбора BAL и образцов тканей (табл. 1); хирургических инструментов (Таблица 2); решения для выполнения BAL и для очистки трахеи канюли и инструменты (табл. 1).

2. Катетеризация правых отделов сердца

  1. Взвешивание мыши с помощью точных масштабах, осторожно размещения мыши в весят бовса. Убедитесь, что справиться с животным мягко и спокойно. Запись веса. Описанный протокол работает лучше всего для мышей, 20 г или более, поскольку диаметр яремной вены должен разместиться давления катетер, можно катетеризации меньше мышей (17 г или больше), пока вены достаточно велик.
  2. Анестезию мыши путем инъекции Avertin в зависимости от веса тела (10 мкл / г), например, для 20 г дают 200 мкл, для 25 г дают 250 мкл, для 30 г дают 300 мкл. Точный объем инъекции должна быть скорректирована в зависимости от мышей штамма. Убедитесь, что справиться с животным мягко и тихо, потому что стресс может изменить ответ на анестезию.
  3. Как только мышь в отключке, место на двойной гофрированной бумагой. Обратите внимание на ID номер на бумаге. Аккуратно протрите лосьоном удаления волос в вентральной части шеи, чтобы очистить операционного поля. Наведите обратно на бумагу и подождать 1-2 мин.
  4. Удалить волосы из вентральнойчасть шеи, осторожно поглаживая волосы против направления роста волос с ватные тампоны.
  5. Тщательно определить достаточную глубину анестезии, проверяя отсутствие ног рефлекс: мышь не реагирует на ущемление своих пальцах.
  6. Рабочие быстро и спокойно, оставшаяся часть катетеризации правых отделов сердца не должна длиться более 10 минут, оптимально 3-6 мин. Важно, чтобы ткань не высыхает, потому что катетер должна скользить в вену и двигаться внутри вены на слой влаги. В соответствии сроки процедура важна для получения данных, которые сопоставимы между группами.
  7. Место мыши обратно на бумаге, ткани и ткани с передачей бумаги на пенополистирол платы. Исправить лапы и голова на месте с помощью автоклава ленты.
  8. Сделайте надрез кожи от челюсти до грудины (грудной кости).
  9. Осторожно рассекают щитовидной железы великого вверх к челюсти, чтобы выставить правую яремную венуй трахеи.
  10. Место пенополистирола платы удерживая кнопку мыши под микроскопом рассечение с фокальной плоскости уже на месте и объектива приблизительно 0,8 x увеличение (общее увеличение [х линз окуляра] примерно 8x.
  11. Осторожно microdissect правую яремную вену, удалив окружающей соединительной ткани с хирургическими щипцами.
  12. Место две части шва на верхней части правой яремной вены. Привяжите нить ближе к челюсти, чтобы закрыть поток крови в вену в крошечный ручеек, место шва, который ближе к грудине / грудной кости на свободные узел вокруг вены. Можно использовать крошечные струйки крови, чтобы позже найти дырку в вене, если это станет необходимым.
  13. Дышать и расслабляться (ослабьте мышцы в области шеи и челюсти), чтобы держать глаза на вены через окуляр. Это будет гарантировать, что ваши руки и пальцы будут двигаться безопасно, плавно и спокойно. Удерживая вены пинцетом на стороне, ближайшей кмандибулы, вырезать отверстие в вену между двумя швами с использованием микро-ножницы управляется с другой стороны. Положите микро-ножницы, и держать эту руку расслабленной, почувствовать катетер. Аккуратно получить катетер держа ее между большим и указательным пальцами (рис. 3). Вставьте катетер в отверстие в вену.
  14. Аккуратно продвиньте катетер в правую сердца (рис. 3). Обратите внимание на знаки на катетер, которые дают приблизительный показатель того, насколько катетер должен быть вставлен и наблюдать на мониторе. Как только давление кривые отображаются, осторожно затяните нижний шов вокруг катетера. Поскольку катетер имеет прочность на разрыв, что дает ему катушку, и потому, что дыхание и биение сердца мыши добавить движение, дополнительно прикрепить катетер с помощью липкой ленты.
  15. Запись измерений давления в течение 2 минут для последующего анализа (рис. 4).
  16. Откройте шов проведение катетера, затем аккуратно retrieве катетер. Протрите части за датчиком давления, поместить обратно в стакан с водой. Не прикасайтесь к датчику давления.
  17. Передача мыши на верхнюю часть папиросной бумаги, чтобы площадь для эвтаназии, сбор крови и ткани селезенки. Очистите хирургических инструментов.
  18. Начать процедуру со следующей животных. Когда сроки позволяет, вводить анестетик в ожидании записи кривой давления (2,15).

3. Сбор крови и селезенки Образцы

  1. Inject барбитуратов решение, 400 мкл на мышь и подождать 1-2 мин. Это обычно выполняется в нашей лаборатории, чтобы избежать возможности того, что мышь случайно оправиться от Avertin-анестезии в то же время кровь. Соответствующие стандартизации экспериментом достигается путем введения той же дозы барбитуратов решение на мышь, и, ожидая такого же количества времени до сбора крови. Если это допускается Институциональные уходу и использованию животных комитета итех пор, пока животные тщательно следить за глубиной наркоза до обескровливания, этот шаг может быть опущен.
  2. Сделайте надрез в брюшной полости. Откройте хвостовой вены (полой вены) и собирать крови с использованием передачи пипетки.
  3. Удалить селезенки, или кусок селезенки в трубку Eppendorf и оснастки замораживание в жидком азоте, или в 24-луночный планшет в лунку, содержащую Хэнкс буфер для последующей подготовки отдельных клеток.
  4. Передача мыши на верхнюю часть салфетки для рабочей зоны C для сбора BAL, легких лимфатических узлов, легких, сердца и тканей. Очистите хирургических инструментов.

4. Коллекция легких и сердца Образцы

  1. Проанализируйте трахеи бесплатно мышечной и соединительной ткани. Размещение щипцы под трахеи, тянуть через шов. Аккуратно генерировать достаточный протяжение, чтобы вырезать отверстие. Поддержание нежный стрейч, вставки трахеи канюли использованием слегка поворачивая движения, и шов канюли IntØ место. Для вставки трахеи канюли, убедитесь, что в трахею влажный, при необходимости добавить каплю раствора Хэнкса. На протяжении процедуры, дышать, расслабляться шеи и мышц челюсти, чтобы сохранить движений рук безопасной и гладкой.
  2. Проанализируйте открыть грудную клетку тщательно удаление грудной кости, начиная от брюшной конца. Не беспокоить содержимого грудной клетки, потому что это будет сделать очень трудно найти лимфатических узлов.
  3. Выполните бронхоальвеолярного лаважа (БАЛ), осторожно вставки 1 мл буфера Хэнкс, осторожно поверните шприц и получить БАЛ. Повторите 3 раза, недалеко трубы и место на льду. На протяжении процедуры, держать глаза на конце трахеи канюли, которая подключается к шприцу. Загляните в грудной клетке для наблюдения за инфляцией и дефляцией легких.
  4. Урожай легких лимфатических узлов, держа стены грудной клетки с одним набором щипцов, поиска и извлечения лимфатических узлов с другой пинцет. Место лимфатических узлов в 24-луночный планшет. Важно, чтобы кТеперь где искать: начиная от шеи, найти вход в грудную клетку с правой стороны мыши и смотри выше позвоночника (рис. 5).
  5. Сердце урожая и место на папиросную бумагу. Изолировать правых отделов сердца тщательно рассекает наряду с перегородкой. Переход к рабочей зоны взвесить, записать вес и место в пробирки Эппендорф хватать замораживание в жидком азоте.
  6. Поместить шов вокруг левой доли легкого, чтобы закрыть главный бронх. Проанализируйте доле левого легкого бесплатно, место в Эппендорф трубки и оснастки замораживание в жидком азоте, или место в лунку 24 и пластину, содержащую раствор Хэнкса для последующего выделения одного суспензии клеток.
  7. Вставьте ок. 0,5 мл буферного раствора формальдегида через трахеи канюли в оставшейся долей легких. После инфляции, анализировать легких долях из грудной клетки и поместить в 50 мл пробирку, содержащую раствор формальдегида. Для альтернативной по дизайну исследования, в легких, могут быть накачаны с оптическимал резки средств массовой информации (OCT, разбавленный 1:4 с PBS) и замораживают в форме, содержащей неразбавленном октября для последующей подготовки замороженных срезов. Другое исследование, разработка может потребовать получения оснастки замороженной ткани легких и одного клеточные суспензии из легких. В этом случае, нет инфляции необходимо: вскрыть оставшихся долей легких; извлекать их из грудной клетки и поместить в 24-луночный планшет в лунку, содержащую буфер Хэнкс.
  8. Удалить трахеи канюли, чистый промывать буфером Хэнкс, очистка хирургических инструментов.

5. Анализ кривых давления, полученных в результате Право катетер сердца

Записанное право данными давление желудочка анализируются с помощью LabChart 7 программное обеспечение, не зная групповой идентичности каждой записи. Более 20 кривые выбираются случайным образом, а разница между максимальным и минимальным давлением желудочков для каждой кривой измеряется (DP). Средняя p, рассчитывается дать право Ventricular систолического давления.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

Основным результатом для получения права кривые давления сердца достигается правильное положение правой катетер сердца. Форма кривых давления время имеет решающее значение, потому что правильное размещение катетера в правом желудочке приведет к давлению плато (рис. 4). Spiky кривые, напротив, указывают на катетер, который перемещается дыхания или движения сердца против стенки правого желудочка. Для обнаружения потенциальных проблем со стадии выживания животных, стандартное отклонение p, и частота сердеч...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Экспериментальные потока изложенные здесь обеспечивает быстрое и одновременное измерение давления правого желудочка систолическое и сбор образцов для анализа ответов в легких, сердца и иммунной системы у мышей. Процедура сочетает в себе сердце физиологии измерений, микро-рассечение и последующего урожая ткани для исследования живой клетки, гистологический анализ, или омик-анализ тканей. Вся процедура занимает не более 20 минут на мышь. Из-за рабочей зоны организованного рабочего процесса, 2-3 животных можно изучать одно...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Нет конфликта интересов объявлены.

Благодарности

Эта работа финансировалась Национальным институтом здоровья 1R21HL092370-01 (GG), 1R01 HL095764-01 (GG); R01HL082694 (JW), Американской ассоциации сердца, Учредителей филиал (0855943D, GG); Stony Wold - Герберт фонда, Нью-Йорк (SHP).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Имя Компания Номер в каталоге Комментарии (по желанию)
Реагенты
2-метил-2-бутанол Sigma-Aldrich 152463
2,2,2-Tribromoethanol Sigma-Aldrich T48402
дезинфицирующим мылом (покрытия Spray ТБ плюс Steris) Fisher Scientific 1629-08
Этиловый спирт, 200 Proof, абсолютный, безводный ACS / USP класс Pharmco-AAPER 111000200 Разбавить до 70% дистиллированной воды
Раствор формальдегида Sigma-Aldrich F1635-500ML Развести до 7-10% образованийldehyde концентрации в концентрации PBS в 1x PBS использованием раствора и воды
Хэнкс решение, не кальций, магний Fisher Scientific 21-022-CV
Октябрь Tissue-Tek 4583
Пенициллина (10000 ЕД / мл) / стрептомицин (10.000 мг / мл) Thermo Scientific SV30010
Фосфатным буферным раствором (PBS), ни кальций, ни магний, 1x и 10x решения Fisher Scientific
Пентобарбитала натрия 26% Fort Dodge Animal Health NDC 0856-0471-01
Лабораторное оборудование
Пластины 12, 24, 96 а Сокол
Передача Pipet Fisher Scientific 13-711-9BM
Tube, покрытые ЭДТА Sarstedt 2013-08
Трубы 0,65 мл и 1,7 мл микро-центрифуге VWR
Трубы 12 х 75 мм, полипропилен Fisher Scientific 14-956-1D
Трубы, различных размеров, полипропилен Fisher Scientific
Инструменты
Пинцет, Дюмон # 5 Fine Средства изобразительных наук 11254-20
Пинцет, дополнительный штраф Грефе-0.5mm советы изогнутые Средства изобразительных наук 11152-10
Пинцет, дополнительно Fiпе Грефе-0.5mm советы прямой Средства изобразительных наук 11150-10
Канюля 18ga, 19 га BD Precision Glide иглы Смена оптимальной длины, притупляются и за ее пределами прохрипел для создания грубой внешней поверхности
Ножницы, ножницы Dissector-тонкий лезвия 9см Средства изобразительных наук 14081-09
Шовный для BAL, плетеный шовный материал шелк, 4-0 Средства изобразительных наук SP116
Шовный для катетеризации правых отделов сердца, плетеные шелковые шва, 6-0 Teleflex медицинских 18020-60
Шприц 1 мл BD 309659
Оборудование
Усилители, PowerLab 4/30 ADInstrument Модель ML866
Катетер, давление F1.4 Millar Instruments, Inc 840-6719
Препаровальная лупа Variscope
Щипцы, ножницы Vannas весна-2мм лезвия Средства изобразительных наук 15000-00
Галогенные освещенный бюро лупы Fisher Scientific 11-990-56
Портативный компьютер Asus Номер модели A52F i5 процессор; 15-дюймовых
Источник света Amscope HL-250-
Группа контроля давления Millar Instruments, Inc PCU-2000
Программное обеспечение, LabChart-Pro V.7 Н.э. Вприборов

Ссылки

  1. Price, L. C., et al. Inflammation in pulmonary arterial hypertension. Chest. 141, 210-221 (2012).
  2. Olschewski, H., et al. Cellular pathophysiology and therapy of pulmonary hypertension. J. Lab. Clin. Med. 138, 367-377 (2001).
  3. Hassoun, P. M., et al. Inflammation, growth factors, and pulmonary vascular remodeling. J. Am. Coll. Cardiol. 54, S10-S19 (2009).
  4. Rabinovitch, M. Molecular pathogenesis of pulmonary arterial hypertension. J. Clin. Invest. 118, 2372-2379 (2008).
  5. Steudel, W., et al. Sustained pulmonary hypertension and right ventricular hypertrophy after chronic hypoxia in mice with congenital deficiency of nitric oxide synthase 3. J. Clin. Invest. 101, 2468-2477 (1998).
  6. Zaidi, S. H., You, X. M., Ciura, S., Husain, M., Rabinovitch, M. Overexpression of the serine elastase inhibitor elafin protects transgenic mice from hypoxic pulmonary hypertension. Circulation. 105, 516-521 (2002).
  7. Guignabert, C., et al. Tie2-mediated loss of peroxisome proliferator-activated receptor-gamma in mice causes PDGF receptor-beta-dependent pulmonary arterial muscularization. Am. J. Physiol. Lung Cell Mol. Physiol. 297, L1082-L1090 (2009).
  8. West, J., et al. Pulmonary hypertension in transgenic mice expressing a dominant-negative BMPRII gene in smooth muscle. Circ. Res. 94, 1109-1114 (2004).
  9. Cook, S., et al. Increased eNO and pulmonary iNOS expression in eNOS null mice. Eur. Respir. J. 21, 770-773 (2003).
  10. West, J., et al. Mice expressing BMPR2R899X transgene in smooth muscle develop pulmonary vascular lesions. Am. J. Physiol. Lung Cell Mol. Physiol. 295, L744-L755 (2008).
  11. Tu, L., et al. Autocrine fibroblast growth factor-2 signaling contributes to altered endothelial phenotype in pulmonary hypertension. Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 45, 311-322 (2011).
  12. Daley, E., et al. Pulmonary arterial remodeling induced by a Th2 immune response. J. Exp. Med. 205, 361-372 (2008).
  13. Song, Y., et al. Inflammation, endothelial injury, and persistent pulmonary hypertension in heterozygous BMPR2-mutant mice. Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 295, 677-690 (2008).
  14. Thibault, H. B., et al. Noninvasive assessment of murine pulmonary arterial pressure: validation and application to models of pulmonary hypertension. Circulation. Cardiovascular imaging. 3, 157-163 (2010).
  15. Otto, C., et al. Pulmonary hypertension and right heart failure in pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide type I receptor-deficient mice. Circulation. 110, 3245-3251 (2004).
  16. Burton, V. J., et al. Attenuation of leukocyte recruitment via CXCR1/2 inhibition stops the progression of PAH in mice with genetic ablation of endothelial BMPR-II. Blood. 118, 4750-4758 (2011).
  17. Fujita, M., et al. Pulmonary hypertension in TNF-alpha-overexpressing mice is associated with decreased VEGF gene expression. J. Appl. Physiol. 93, 2162-2170 (2002).
  18. Motley, H. L., Cournand, A., Werko, L., Himmelstein, A., Dresdale, D. The Influence of Short Periods of Induced Acute Anoxia Upon Pulmonary Artery Pressures in Man. Am. J. Physiol. 150, 315-320 (1947).
  19. Liljestrand, G. Regulation of Pulmonary Arterial Blood Pressure. Arch. Intern. Med. 81, 162-172 (1948).
  20. Euler, U. S. V., Liljestrand, G. Observations on the pulmonary arterial blood pressure in the cat. Acta Physiol. Scand. 12, 301-320 (1946).
  21. Van den Broeck, W., Derore, A., Simoens, P. Anatomy and nomenclature of murine lymph nodes: Descriptive study and nomenclatory standardization in BALB/cAnNCrl mice. Journal of immunological. 312, 12-19 (2006).
  22. Rabinovitch, M., et al. Angiotensin II prevents hypoxic pulmonary hypertension and vascular changes in rat. Am. J. Physiol. 254, 500-508 (1988).
  23. Rabinovitch, M., Gamble, W., Nadas, A. S., Miettinen, O. S., Reid, L. Rat pulmonary circulation after chronic hypoxia: hemodynamic and structural features. Am. J. Physiol. 236, 818-827 (1979).
  24. Rabinovitch, M., et al. Changes in pulmonary blood flow affect vascular response to chronic hypoxia in rats. Circ. Res. 52, 432-441 (1983).
  25. Kugathasan, L., et al. The angiopietin-1-Tie2 pathway prevents rather than promotes pulmonary arterial hypertension in transgenic mice. J. Exp. Med. 206, 2221-2234 (2009).
  26. Bearer, C., Emerson, R. K., ORiordan, M. A., Roitman, E., Shackleton, C. Maternal tobacco smoke exposure and persistent pulmonary hypertension of the newborn. Environ. Health Persp. , 105-202 (1997).
  27. Graham, B. B., et al. Schistosomiasis-induced experimental pulmonary hypertension: role of interleukin-13 signaling. Am. J. Pathol. 177, 1549-1561 (2010).
  28. Butrous, G., Ghofrani, H. A., Grimminger, F. Pulmonary vascular disease in the developing world. Circulation. 118, 1758-1766 (2008).
  29. Crosby, A., et al. Praziquantel reverses pulmonary hypertension and vascular remodeling in murine schistosomiasis. Am. J. Respir. Crit. Care Med. 184, 467-473 (2011).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Теги

Правого желудочка систолическое давление измерений в сочетании с Harvest легких и иммунной образцы тканей у мышей
Связаться с нами
Порекомендовать библиотеке

Конфиденциальность

Условия использования

Политики

© 2026 MyJoVE Corporation. Все права защищены.