Методическая статья

Простой метод мышь интубации легких

DOI:

10.3791/50318

⸱

21 марта 2013 г.

 ,  ,  , 
1Department of Environmental Health Sciences, Program in Respiratory Biology and Lung Disease, Johns Hopkins Bloomberg School of Public Health, 2Department of Pediatrics, Oregon Health Sciences University

В этой статье

Краткое содержание

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Эта статья описывает striaghforward и эффективный метод интубации мышей для измерения легочной функции или легочной инстилляции, что позволяет мыши, чтобы восстановиться и быть изучен на более позднее время. Процедура включает в себя недорогие волоконно-оптический источник света, который освещает непосредственно в трахею.

Аннотация

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Простая процедура интубация мышей для измерения легочной функции будет иметь ряд преимуществ в продольных исследованиях с ограниченным числом или дорогих животных. Одной из причин того, что это не будет сделано более регулярно том, что это довольно сложно, несмотря на наличие нескольких опубликованных исследований, которые описывают способы его достижения. В этой статье мы покажем процедура, которая устраняет одно из основных препятствий, связанных с этим интубации, что визуализации трахеи в течение всего времени интубации. Этот подход использует 0,5 мм волоконно-оптический источник света, который служит интродьюсер направить интубации канюли в трахее мыши. Мы показываем, что можно использовать эту процедуру для оценки механики легких в отдельных мышей за время хода по крайней мере, несколько недель. Этот метод может быть установлен с относительно небольшими расходами и опыта, и она может быть выполнена регулярно с относительно небольшой подготовки. Это должно макE возможно в любой лаборатории регулярно проводят эту интубации, тем самым позволяя продольных исследований в отдельных мышей, уменьшая тем самым количество мышей необходима и повышения статистической мощности с помощью мыши, как каждый свой контроль.

Введение

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

В 1999 году Браун и др.. Опубликовал статью, описывающую метод интубации легких мыши 1. Такой метод имеет значительный полезный в этом повторные легочные функции или бронхоальвеолярного лаважа в отдельных мышей в продольных исследованиях 2. Так что оригинальная бумага, было несколько других работ, которые описал различные подходы к мыши интубации 3-9. Хотя все эти методы могут быть успешно использованы, они обычно требуют значительной подготовки или затрат. Одним из основных вопросов, с такой интубации в том, что по мере приближения интубации канюли приближается к трахее до вставки, канюли сама блокирует свет и, следовательно....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. Подготовка к процедуре

Надо сначала получить и подготовить следующие пункты:

  1. Канюли. Для интубации 20-35 мышей г, мы используем 1 или 1,5 дюйма длиной, 20 калибра IV катетер (BD Insylte, Sparks, MD или Jelco Optiva, Carlsbad, CA). Новый стерильный катетер может быть использован для каждой мыши, но катетеры также может быть повторно использован после стерилизации путем замачивания в 70% этаноле в течение ночи. Хотя ни глотки, ни трахеи мыши стерильную чистоту соответствующих процедур, в том числе использование стерильных перчаток и инструментов, должны быть соблюдены.
  2. Волоконно-оптического к....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

В качестве оценки этого метода, мы использовали четыре 20 неделя мужской линии BALB / C мышей среднего веса (± SEM) на 27,7 ± 0,40 г. Они были изучены на пять недель подряд, в котором легкого сопротивления измерялась с помощью системы, как описано выше 11. Каждая мышь была под наркозом с кетамином (100 мкг / г BW) и ксилазина (15 мкг / г BW) в физиологическом растворе с помощью IP-инъекции. Затем они были интубировали как описано выше. Если есть какие-либо сомнения в том, канюли в трахее, а не в пищевод, это .......

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Описанная здесь процедура имеет ряд преимуществ. Первое устройство является простым и относительно недорогим .. Изготовление аппарата не требует никаких специальных инструментов или дорогостоящего оборудования. Использование катетера вводится что также является источником света означает, что никто никогда не теряет из виду трахеи отверстие, как интродьюсер приближается к открытию трахеи. Использование 0,5 мм интродьюсер также служит для минимизации травм, которые могут возникнуть с начальной вставки больших канюли. Отме.......

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Ни один из авторов есть какие-то конфликты интересов раскрывать.

Благодарности

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Поддерживается NIH HL-10342.

....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Материал Компания Каталог # Комментировать
Интубация канюли BD Insylte, Sparks, MD или Jelco Optiva, Carlsbad, CA 1-дюйма длиной, 20-калибровочного внутривенное (IV) катетер
Волоконно-оптический кабель Эдмунд оптики, Баррингтон, штат Нью-Джерси # NT02-542 Около 2-футов длиной 0,5-мм оптическим волокном (Communication класса волокна пластика). Край торца волокна, который вставляется в трахею должна быть плавными, держа волокно ≈ 2 см от конца, а затем, делая небольшие круги при перемещении наконечника в течение нескольких секунд на 1000-абразивной бумагой Эмори.
Источник света Volpi NCL-150 Хотя мы используем 150-W галогенные источник света, любого эквивалентного источника света, даже с гораздо меньшей мощностиможет быть использован.
Силиконовые резиновой пробкой № 1 из силиконовой резины пробка подходит к источнику света, используемые в этой демонстрации. Различные источники света могут требовать разного размера.
Малая трубка силиконовая резина Cole-Palmer EW-96410-13 ≈ 1,5 см кусок резиновой трубки силиконовые (0,8 внутренним диаметром 4 мм, внешний диаметр)
Угловой стенд поддержки Наше constucted из оргстекла, но и любой материал, к которому нить или проволока может быть прикреплен к удерживайте кнопку мыши на почти вертикальный угол может быть использован.

Ссылки

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Brown, R. H., Walters, D. M., Greenberg, R. S., Mitzner, W. A method of endotracheal intubation and pulmonary functional assessment for repeated studies in mice. J. Appl. Physiol. 87, 2362-2365 (1999).
  2. Walters, D. M., Wills-Karp, M., Mitzner, W.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на повторное использование текста или иллюстраций этой статьи JoVE

Запросить разрешение

Теги

Похожие статьи