В данной статье подробно процедуры для оптического анализа изображений с опухолью целевой наночастицы, HerDox. В частности, подробную информацию об использовании многомодового изображения устройства для обнаружения нацеливания на опухоль и оценки опухоли проникновение описан здесь.
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
Анализ целевой вирусного белка Наночастицы доставляется в HER2 + опухолей
В этой статье
Краткое содержание
Аннотация
HER2 + опухолей целевых наночастиц, HerDox, экспонаты опухоли преимущественному накоплению и росту опухоли абляции в животной модели HER2 + рак. HerDox формируется нековалентными самосборки белка-мишени опухоли клетки с проникновением к препаратам, доксорубицин, через небольшой нуклеиновых линкер. Сочетание электрофильного, интеркаляции и олигомеризации облегчения взаимодействия самосборке в круглых частиц 10-20 нм. HerDox демонстрирует стабильность в крови, а также при длительном хранении при различных температурах. Системной доставки HerDox в опухоли мышей приводит к опухоли гибель клеток без заметного негативного воздействия на неопухолевых тканей, в том числе сердца и печени (которые подвергаются заметным повреждения нецелевой доксорубицин). HER2 высоте облегчает нацеливание на клетки, экспрессирующие человеческий рецептор эпидермального фактора роста, следовательно опухолей отображения повышенные уровни HER2 демонстрируют большему накоплению HerDox по сравнению с клетками экспрессиюпеть более низких уровнях, как в пробирке и в естественных условиях. Интенсивность флуоресценции в сочетании с конфокальной на месте и спектрального анализа позволило нам проверить в условиях Опухоль адресности и проникновения в опухоль клетки HerDox после системной доставки. Здесь мы подробно наши методы оценки нацеливания на опухоль с помощью многомодового изображений после системной доставки.
Введение
Опухоль-таргетинга химиотерапии имеет потенциал, чтобы устранить раковые клетки при снижении дозы препарата по сравнению с нецелевым наркотики, потому что больше поставляемого терапия может накапливаться на ее назначению, а не распространять без опухолевой ткани. В последнем случае ослабит из эффективности препарата и, следовательно, требуют более высоких доз чтобы быть эффективным, опухоли-таргетинга имеет как терапевтические и безопасность преимущества по сравнению со стандартными нецелевой лечения.
Таргетинг химиотерапии инкапсуляции в самоорганизующихся наночастиц позволяет наркотиков остается химически не модифицированной в отличие о....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Протокол
1. Системной доставки В естественных условиях
- Смешать достаточно HerDox стерильным физиологическим раствором приравнять 0,2 мл 0,004 мг / кг доза HerDox на инъекцию для возрасте 6-8 недель пи / пи мышь подшипника подкожной двусторонней опухоли ксенотрансплантата бок.
- Осторожно обратить HerDox смесь в 3/10 мл инсулина шприца, снабженного иглой 29G, избегая пузырьков.
- Анестезия индуцированный краткое изофлурана воздействия в индукционной камере, оборудованной газовой системы очистки (Oxygen Расход: 0,5-1 л / мин, изофлурана концентрация: 3-4% (или ниже).
- Введите всю смесь в хвостовую вену мышей анестезировали (0,2 мл на....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Результаты
На рисунке 1 показана в естественных прототипов оптических изображений, который был построен с целью получения изображения под несколькими условиями, в том числе интенсивность флуоресценции, спектральных, жизни, 2-фотона, внутри-жизненно конфокальной и биолюминесценции изображений. Кроме того, охлажденный высокочувствительные камеры и высоковольтные линии мощности лазера включены в эту систему дает более высокую контрастность изображения флуоресценции по сравнению с коммерческими оптической сис.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Обсуждение
Dox флуоресценция может быть обнаружена в естественных условиях использования многомодового Imager, когда подкожные опухоли. Тем не менее, терапевтически эффективной дозы HerDox (0,004 мг / кг) ниже порога обнаружения после однократной дозы. В противоположность этому, после 7 ежедневных инъекций (1 раз в день в течение 7 дней), опухоли накопление и удержание частиц достаточным, чтобы позволить визуализации флуоресценции доксорубицин.
Очень важно при работе с Dox или любой другой для.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Раскрытие информации
Автор, Даниэль Фаркаш, является председателем Спектральный молекулярной визуализации. Остальные авторы не имеют конкурирующие интересы.
Благодарности
Эта работа финансировалась грантами для ЛКМ-K от Национального института здоровья / Национальный Институт Рака (R01CA129822 и R01CA140995). Доктор Медина-Kauwe спасибо C. Rey, М. М-Kauwe и Д. Revetto за постоянную поддержку.
....Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Материалы
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| Флуоресцентный лазерный сканирующий конфокальный микроскоп | Leica | SPE | |
| em>In Vivo Оптический имиджер | Spectral Molecular Imaging | Multimode In Vivo Оптический имидж-сканер | |
| Doxorubicin-HCl | Sigma-Aldrich | D4035 | |
| Nude (NU/NU) мышь, самка, 6-8 недель | Charles River | Код штамма 088 | |
| MDA-MB-435 Опухолевые клетки человека HER2+ | NCI-Frederick Cancer DCTD Tumor/Cell Line | Repository 0507292 | |
| инсулиновый шприц объемом 3/10 куб. см U-100 с постоянно прикрепленной иглой 29G x 1/2" Ultra-FineIV BD | 309301 | ||
| Delta T камерой | Bioptechs | 04200417B |
Ссылки
- Agadjanian, H., Chu, D., et al. Chemotherapy Targeting by DNA Capture in Viral Protein Particles. Nanomedicine. 7 (3), 335-352 (2012).
- Agadjanian, H., Ma, J., et al. Tumor detection and elimination by a targeted gallium corrole. Proc. Natl. Acad. Sci....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Перепечатки и разрешения
Теги
