Ортотопическая Глиобластома мышь Модель Поддержание Мозг паренхимы физических ограничений и подходит для прижизненной Двухфотонное микроскопии

Clément Ricard; Fabio Stanchi; Geneviève Rougon; Franck Debarbieux

doi:10.3791/51108

Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Ортотопическая Глиобластома мышь Модель Поддержание Мозг паренхимы физических ограничений и подходит для прижизненной Двухфотонное микроскопии

20.2K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/51108

⸱

21 апреля 2014 г.

Clément Ricard¹^,² , Fabio Stanchi¹^,³ , Geneviève Rougon¹^,² , Franck Debarbieux¹^,²

¹Developmental Biology Institute of Marseille, Aix Marseille University, ²European Research Center for Medical Imaging, Campus de la Timone, ³Vesalius Research Center, KU Leuven Campus Gasthuisberg

В этой статье

Краткое содержание

Мы создали корковой ортотопической модели глиобластомы у мышей для прижизненной двухфотонного микроскопии, что повторяет биофизических ограничений обычно при игре в процессе роста опухоли. Хронический стекла замена череп выше опухоли позволяет наблюдение за прогрессированием опухолевого с течением времени по двухфотонного микроскопии.

Аннотация

Глиобластомой мозга (GBM) является наиболее агрессивной формой опухоли головного мозга без каких-либо лечебных процедур, доступных на сегодняшний день.

Мышиные модели этой патологии полагаться на инъекции суспензии клеток глиомы в паренхимы мозга следующей разрез твердой мозговой-матер. В то время как клетки должны быть введены поверхностно, чтобы быть доступным для прижизненной двухфотонного микроскопии, поверхностные инъекции не в Повторим патофизиологические условия. Действительно, спасаясь через инъекции тракта большинство опухолевые клетки достигают экстра-дурального пространства, где они расширить аномально быстро в отсутствии механических ограничений из паренхимы.

Наши улучшение состоит не только в фокально имплантации глиомы сфероид, а не путем инъекций суспензии клеток глиомы в поверхностных слоях коры головного мозга, но и в засорение место инъекции с помощью сшитого декстрана гель геми-шарик, который приклеен к surrounдинь паренхимы и опечатаны в длительности матер с цианоакрилата. В целом эти меры применять физиологический расширение и проникновение опухолевых клеток внутри паренхимы мозга. Краниотомия был окончательно закрыт с оконное стекло укрепил к черепу, чтобы позволить хронический изображений над недель в отсутствии развития рубцовой ткани.

Воспользовавшись люминесцентных трансгенных животных, привитых с люминесцентными опухолевых клеток, мы показали, что динамика взаимодействий, происходящих между клеток глиомы, нейронов (например Thy1-CFP мышей) и сосудистой (выделено внутривенной инъекции флуоресцентного красителя) могут быть визуализированы прижизненный двухфотонного микроскопа во время прогрессирования заболевания.

Возможность изображение опухоли на микроскопическом резолюции в минимально угрозу головного среды представляет собой улучшение существующих моделей GBM животных, которые должны принести пользу поле нейро-онкологии и тестирования на наркотики.

Введение

Глиобластомой мозга появляется как наиболее агрессивной формой опухоли головного мозга у взрослых с медианой выживаемости 12 месяцев и 5-летняя выживаемость 5%. Тактика ведения зависит от хирургии, лучевой и химиотерапии часто используется в комбинации. Тем не менее, влияние этих методов лечения остаются паллиативной ^1-3.

До сих пор, большинство из нейро-онкологии исследований полагаются на методы, которые может предоставить только статический вид и выполненных на больших когорт животных с опухолью в жертву на разных временных точках (см., например, ^4,5). Недавнее развитие методов Последующие меры на основании прижиз....