Эхокардиография наведением чрескожная интрамиокардиальные впрыска представляет собой эффективное, надежное и наведения модальность на поставку средств Перенос генов или клеток в мышиной сердце. После действия, описанные в данном протоколе, оператор может быстро стать компетентным в этой разносторонней, минимально инвазивной техники.
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
Ультразвуковая руководствуясь Трансторакальная интрамиокардиальной впрыска у мышей
В этой статье
Краткое содержание
Аннотация
Мышиные модели сердечно-сосудистых заболеваний важны для исследования патофизиологических механизмов и изучения потенциальных регенеративные методы лечения. Опыты с инфарктом инъекции в настоящее время выполняется путем прямого хирургического доступа через торакотомии. В то время как удобно, когда выполняется во время другой экспериментальной манипуляции, такие как лигирования коронарной артерии, потребность в инвазивной процедурой интрамиокардиальной доставки ограничивает потенциальные экспериментальные образцы. С постоянно улучшая разрешение ультразвуковое и передовые неинвазивные методов визуализации, то теперь это возможно, чтобы регулярно выполнять под ультразвуковым контролем, чрескожное интрамиокардиальной инъекции. Эта форма эффективно и надежно обеспечивает агентов к целевой области миокарда. Преимущества этого метода включают избегание хирургической заболеваемости, средство, чтобы целевых регионах миокарда выборочно под ультразвуковым контролем, и возможность поставлять вводимого в myocardiuм при многократных, заданные интервалы времени. С практикуется техники, осложнения от интрамиокардиальной инъекции редки, и мышей быстро вернуться к нормальной деятельности на восстановление от наркоза. После действия, описанные в данном протоколе, оператор с основной опыт эхокардиографии может быстро стать компетентным в этой разносторонней, минимально инвазивной техники.
Введение
Сердечно-сосудистые заболевания являются ведущей причиной смерти среди мужчин и женщин в Соединенных Штатах, что составляет 600 000 смертей в год 1. Мышиные модели сердечно-сосудистых заболеваний являются критически важными для исследования патофизиологических механизмов и для того, чтобы исследовать потенциальные методы лечения. Инфаркт доставка векторов генной терапии, стволовые клетки, модифицированные РНК и других разрешительных документов терапевтические агенты расследование их терапевтический потенциал для болезни сердца 2-7. В настоящее время, есть ограниченные варианты для инфаркта доставки терапевтических агентов в мышиных моделях ....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Протокол
Все описанные этапы проводили под протоколами, утвержденными уходу и использованию комитета Институциональная животных больницы Бостонской детской путем.
1 Подготовка
- Выполните базовую сердечной анатомическую и функциональную оценку по эхокардиографии до начала протокола впрыска, как оптимальное положение фиксируется преобразователь для интрамиокардиальной инъекции не может дать оптимальные стандартные представления для разграничения анатомии и оценку функции.
- Установка впрыска показано на фиг.1А-1С. Поместите пустой шприц с оболочкой иглы, конические ориентированных вверх, в шприце зажима (ри....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Результаты
Мышиный интрамиокардиальной впрыска с синим красителем или флуоресцентных микросфер
Инъекция синего красителя Эвана полезно для учебных целей. Вскоре после инъекции, усыпить мыши и удалить сердце визуализировать расположение введенного синего красителя. Рисунок 5 показывает пример успешного инъекций, с синим красителем проникает миокарда в середине папиллярные уровне мышечной (5А, область заключены пунктирной линией). Эванс синий краситель будет промыть ткани в.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Обсуждение
Biologics может быть доставлен в миокарде путем прямой инъекции, интрамиокардиальной intrapericardial инъекции или косвенного управления через кровоток. Недавние испытания клеточной терапии на основе в моделях инфаркта миокарда описали открытый подход торакотомии с доставкой вводимого вещества 12-14. Важным фактором в успехе инфаркта терапевтического вмешательства зависит от выбора маршрут перевозки. Самая высокая локальная доза биологических достигается интрамиокардиальной доставки 15,16. Интрамио.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Раскрытие информации
Авторам нечего раскрывать.
Благодарности
TWP был профинансирован Ирландским кардиологическим обществом Брайана Макговерна Traveling Fellowship. WTP был профинансирован R01 HL095712 и премией AHA Established Investigator Award.
....Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Материалы
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| Ультразвуковая система визуализации Vevo 2100 | Visualsonics | ||
| Vevo Integrated Rail System III | Датчик Visualsonics | ||
| Microscan MS400 | Датчик Visualsonics | ||
| Microscan MS550D | Иглы Visualsonics | ||
| PrecisionGlide | BD | 305128 | 30 G x 1 дюйм/2,5 см |
| 1 куб. см шприц с скользящим наконечником | Exel International | 26048 | или аналог |
| Газоплотный 50 μ l стеклянные шприцы | Hamilton | 1705 | |
| Трипан синий морилка (0.4%) | Gibco | 15250 | или эквивалент |
| изофлурана | Baxter | AHN3640 | или эквивалент |
| Aquasonic 100 | Parker Laboratories | (01-08) | или эквивалент |
| микросфер из полистирола (красный флуоресцентный) | Life Technologies | F-8842 | или эквивалент |
Ссылки
- Kochanek, K. D., et al. Deaths: final data for 2009. Natl Vital Stat Rep. 60 (3), 1-117 Forthcoming.
- Strauer, B. E., Steinhoff, G. 10 years of intracoronary and intramyocardial bone marrow stem cell therapy of the heart: fro....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Перепечатки и разрешения
