Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Мышиной модели необратимые и обратимые одностороннего мочеточника непроходимости

31.8K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/52559

⸱

20 декабря 2014 г.

 ,  ,  ,  ,  ,  , 
1MRC Centre for Inflammation Research, University of Edinburgh

В этой статье

Краткое содержание

Мышиная модель необратимой односторонней обструкции мочеточника (НН) представлена вместе с моделью обратимой ННД, в которой обструкция мочеточника снимается путем анастомоза разорванного мочеточника в мочевой пузырь. Эти модели позволяют изучать воспаление почек и рубцевание, а также ремоделирование тканей.

Аннотация

Обструкция почки может повлиять на родные или трансплантированные почки и привести к повреждению почек и рубцеванию. Представлена модель обструктивной нефропатии, вызванной односторонней обструкцией мочеточника (НН), которая может быть как необратимой (НН), так и обратимой (R-НВ). В модели необратимого UUO мочеточник может быть обструкционирован в течение различных периодов времени, чтобы вызвать все более тяжелое воспаление почек и интерстициальное фиброзное рубцевание. В обратимой модели R-UUO мочеточник обструкционирован, что приводит к гидронефрозу, расширению канальцев и воспалению. По прошествии подходящего периода времени обструкцию мочеточника хирургическим путем реверсируют путем анастомоза ранее обструкторного мочеточника в мочевой пузырь, чтобы обеспечить полную декомпрессию почки и восстановление потока мочи в мочевой пузырь. Модель необратимого UUO была использована для исследования различных аспектов воспаления почек и рубцевания, включая патогенез заболевания и тестирование потенциальных противовоспалительных или антифибротических методов лечения. Более сложная модель R-UUO была использована некоторыми исследователями и действительно предлагает значительный исследовательский потенциал, поскольку она позволяет изучать воспалительные и иммунные процессы и ремоделирование тканей в поврежденной и рубцовой почке после удаления поврежденного стимула. В результате, модель R-UUO предлагает исследователям возможность изучить разрешение воспаления почек вместе с ключевыми аспектами восстановления тканей. Эти экспериментальные модели имеют отношение к заболеваниям человека, поскольку пациенты часто обращаются с обструкцией почечных путей, требующей декомпрессии, и обычно остаются со значительным остаточным нарушением функции почек, которое не имеет современных вариантов лечения и может привести в конечном итоге к терминальной стадии почечной недостаточности.

Введение

Общая цель описанной здесь экспериментальной модели - вызвать обструктивную нефропатию путем односторонней обструкции мочеточника (UUO), которая может быть либо необратимой (UUO), либо обратимой (R-UUO). Представлена простая необратимая модель НВО, при которой левый мочеточник постоянно обструкционизирован путем перевязки швом или наложения лигирующего зажима. Это приводит к выраженному расширению мочеточника вместе со снижением почечного кровотока и клубочковой фильтрации. Гистология почек демонстрирует расширение канальцев и все более тяжелое интерстициальное воспаление почек и фиброз. Необратимый UUO является полезной моделью и был принят многими исследователями при изучении как воспаления почек, так и фиброза. 1-4 Несмотря на то, что необратимая модель НВО требует определенных хирургических знаний, она относительно проста и часто используется для изучения патогенеза интерстициального повреждения почек и последующего фиброза. Также представлена менее часто используемая модель R-UUO, использующая модификацию метода, первоначально описанного Tapmeier et al. 5 Модель R-UUO имеет большой потенциал в будущем для изучения воспалительных и иммунных процессов, клеточной и тканевой регенерации, а также последующего ремоделирования тканей после удаления повреждающего стимула.

Более сложная модель R-UUO использовалась ограниченным числом исследователей, причем некоторые группы использовали значительно отличающуюся хирургическую технику от описанной здесь6,7, хотя и с интересными результатами. В представленной модели R-UUO мочеточник лигируют для индуцирования полной обструкции мочеточника в течение периода времени, достаточного для индуцирования желаемого уровня травмы и фиброза: 7 дней UUO были выбраны в описанном здесь методе. Обструкция мочеточника устраняется, и почкам разрешается декомпрессироваться в течение периода времени, определенного исследователем, прежде чем мыши будут выбракованы, а почка удалена для анализа: 7 дней декомпрессии были выбраны в описанном здесь методе, хотя более длительный период был бы выбран, если бы изучалось разрешение воспаления и фиброза. Несмотря на то, что описанный здесь метод требует значительных хирургических знаний, он имеет ряд преимуществ по сравнению с другими моделями R-UUO. Наложение пластиковой трубки с мягкими стенками на обструкцию мочеточника предотвращает чрезмерное расширение мочеточника, что облегчает последующие манипуляции и анастомоз мочеточника. Кроме того, в описанной модели R-UUO мочеточник разделен, что позволяет удалить любые остатки мочевого осадка и мусора. Это подтверждает, что оставшийся просвет мочеточника очищен и открыт до анастомоза мочевого пузыря.

Эксперименты, включающие как необратимые, так и обратимые модели UUO, могут предоставить исследователям мощное понимание молекулярных и клеточных механизмов как повреждения, так и последующего разрешения и регенерации. Таким образом, описанная здесь модель R-UUO будет очень актуальна для исследователей, заинтересованных в поствоспалительном ремоделировании тканей и в том, как оно может быть модулировано.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

Общее руководство: Эксперименты на животных были проведены в соответствии с руководящими принципами и нормами, установленными животных (научные процедуры) Закона 1986 года этот Протокол и сопровождающие видео на протоколе, как для стандартного ОМО и R-ОМО, которая может быть выполнена на многих линии мышей. В видеосюжета, обе процедуры выполняются на мужчин C57BL / 6 мышей в возрасте 8 недель. Данные, представленные в разделе репрезентативные результаты были получены из мужчин FVB / N мышах.

ПРИМЕЧАНИЕ: Этот протокол и сопутствующие сведения о видеозаписи, как выполнять стандартную ОМО и R-UUO использования левого мочеточника, однако те же методы могут быть легко использованы в нужном мочеточника.

1. Подготовка животных и Лапаротомию

  1. Выполните все процедуры стерильными (автоклавного) Инструменты и расходные материалы.
  2. Вводят кетамина гидрохлорид (70 мг / кг) и медетомидина гидрохлорид (1 мг / кг) внутрибрюшинно анестезиюмышь. Примечание: продолжительность результате анестезии плоскости 4 ч и не дополнительный анестезия не требуется.
  3. Подтвердите глубины анестезии потерей рефлексов, например, регулировка развала крайнем случае.
  4. Удалить все волосы вокруг области разреза и подготовить кожу с брюшка к операции с помощью применения разбавленным раствором хлоргексидина.
  5. Наведите на хирургическом площадку с подогревом в лежачем положении и зафиксировать конечности на площадку с помощью низкой липкости клейкую ленту.
  6. Во время процедуры, контролировать мышь на наличие признаков термических ожогов в результате хирургического площадку с подогревом. Если возможно использовать не электрический источник тепла.
  7. Администрирование анальгетик с помощью подкожной инъекции гидрохлорида бупренорфина (0.06mg / кг) и применить глаз смазки, чтобы предотвратить высыхание роговицы.
  8. Сделайте срединной лапаротомии и разрез бессосудистой белой линии с использованием мягкой ткани, разделяющая ножницы, чтобы получить доступ в брюшную полость.
  9. Накройте мышь и вставьте Colibriвтягивающее в разрез.

2. Одностороннее мочеточников Обструкция

  1. Использование стерилизованные ватные палочки подвергайте левого мочеточника путем смещения кишечника к правой стороне брюшной полости и покрывают их с увлажненными шторы.
  2. Использование угловые щипцы изолировать и поднять левого мочеточника.
  3. Для создания мочеточника препятствий, лигирования левого мочеточника дважды 6 / вывода черный плетеный шелковой нити в любом месте между мочевым пузырем и почечной лоханки. Для долгосрочных экспериментов, использовать рассасывающиеся нити для всех брюшных операций. Кроме того, ролик лигирования могут быть применены к мочеточника.
  4. Для выделения мочевой пузырь из мочеточника, разделить мочеточника между двумя швами.
  5. Тщательно заменить кишечника в брюшную полость.
  6. Следуйте инструкциям, приведенным в разделе 4 - послеоперационной реабилитации и уходу, чтобы закрыть разрез и обратить вспять анестезии.

3. Подготовка к Reversiblе Односторонний мочеточников Обструкция

  1. Подготовьте мышь для хирургии и изолировать левого мочеточника, как описано в шагах от 1,1 до 2,2 выше.
  2. Чтобы создать препятствие мочеточника, что может быть отменено, лигирования левого мочеточника дважды 6 / вывода черного плетеной шелковой нити близко к пузырь. Оставьте один конец верхней нити тех пор, пока это будет использоваться для закрепления мягкой стеной пластиковые трубы в месте вокруг мочеточника.
  3. Сделать продольный разрез в 5 мм длины мягкой стеной пластиковых труб таким образом, что он может быть распущенной открыт, чтобы позволить ему быть применены к мочеточника. Любой мягкой стеной силикон пластиковые трубы, с внутренним диаметром 1 мм и наружным диаметром 2 мм, могут быть использованы.
  4. Поместите мягкую стеной пластиковых труб мягко вокруг мочеточника. Убедитесь, что нить длиной выходит из центра щели в трубке, когда он закрыт вокруг мочеточника.
  5. Поместите длину 6 / вывода черный плетеный шелковой нити вокруг мягкой стеной трубы ограждающих мочеточник и галстукодин раз. Теперь поместите длинный конец шовного материала, возникающих от центра щели в трубопроводе, в продольном направлении через трубопровод так, что он лежит на верхней части ранее связанного шва.
  6. Свяжите шва, расположенных вокруг трубы в два раза, чтобы закрепить трубку и длинный конец шва в месте вокруг мочеточника.
    Примечание: Чтобы предотвратить образование спаек на мочеточник и мягкой стеной пластиковых труб, раствор снижение адгезии может быть применен к области вокруг трубы.
  7. Тщательно заменить кишечника в брюшную полость.

4. послеоперационной реабилитации и уход

  1. Закрыть брюшины с одеялом стежка с помощью 5 / вывода черный плетеный шелковый шов и приблизить кожу с помощью металлических зажимов кожи.
  2. Чтобы свести к минимуму риск послеоперационной инфекции, применяются антисептические, такие как йод / спиртовом растворе в кожу живота.
  3. Переменная обратной анестезия с Атипамезол гидрохлорида (2 мг / кг) подкожно.
  4. Администрирование жидкости с помощью подкожной инъекции 1 мл физиологического раствора нагревают.
  5. Монитор мыши, пока он не пришел в сознание.
  6. Разрешить мыши для восстановления в нагретом поле выдерживают при 29 ° С в течение 24 ч. Увлажненный пища также может быть предусмотрено, чтобы стимулировать жидкости и питания потребление.
  7. Оставьте мышь, чтобы восстановить, чтобы вызвать желаемый уровень обструкции, обычно на 7 дней.
  8. Для долгосрочных экспериментов по восстановлению, обеспечить текущие анальгетики. Если мышь, чтобы восстановить дольше, чем 7 дней, снимите зажимы кожным 7 дней после операции.
  9. После того, как желаемый уровень обструкции был вызван, либо в обратном ОМО, как описано ниже, или усыпить мышь смещением шейных позвонков и собирать почки для анализа патоморфологическую.

5. Реверсивный Односторонний мочеточников Обструкция

  1. Для выполнения R-UUO подготовить мышь, которая претерпела подготовку к R-ОМО, для хирургии, как описано в шагах 10,1 до 1,7.
  2. Если присутствует, удалить зажимы кожи и разделить или удалить швы в брюшине, чтобы получить доступ к брюшной полости. Примечание: Если мочеточник был затруднен в течение длительного эксперимента кожи клипов, должен быть удален 7 дней после применения.
  3. Подготовьте мышь и изолировать левого мочеточника, как описано в шагах от 1,8 до 2,2.
  4. Использование угловых щипцов, освободить мягкую стеной пластиковых труб из любого гранулематозного ткани, которая может быть сформирована.
  5. Отрежьте нить проведении пластиковой трубки вокруг обструкцией мочеточника с помощью скальпеля и удалить трубку.
  6. Подтверждение успешного ОМО путем оценки на наличие гидронефроз в левой почке, почки должны также появляются бледно.
  7. Разделите мочеточника между швами.
  8. Поместите оставшуюся длину мочеточника, прикрепленный к почке, на маленьком кусочке стерильной марлей. Эта информация будет использоваться для сбора осадка мочи и отмершие клетки, которая будет вытекать из мочеточника ай почечной лоханки раз шва удаляется.
  9. Разделите выше мочеточника, но рядом, шовный и позволяют почек для слива на марлю. Оставьте нижний шов, ближе к мочевому пузырю, без изменений. Это делается для того, чтобы моча не будет течь из мочевого пузыря и в брюшную полость.
  10. После того, как мочеточник и почечной лоханки были осушены, применить длинный 6 / вывода черного плетеный шелковый шов до конца оставшегося длины мочеточника. Это будет использоваться, чтобы помочь в мочеточник анастомоза мочевого пузыря, осуществляемом позже.
  11. Следуйте инструкциям ниже, чтобы анастомозируют оставшуюся длину мочеточника в мочевой пузырь:
    1. Включите мочеточник таким образом, что она лежит впереди в исходное положение и лежит над почек.
    2. Поместите одной 9 / вывода полиамида мононити TACKING швом 2 мм от конца мочеточника таким образом, что она выходит в направлении мочевого пузыря. Позаботьтесь, чтобы убедиться, что шва остается в мышечной оболочки и не входит в мочеточник просвет. Лавировать шов Вильл быть использованы для закрепления мочеточник в мочевой пузырь.
    3. Чтобы создать канал через мочевой пузырь, пройти 21g иглу диагонали через мочевой пузырь таким образом, что он выходит в сторону передней (вентральной) стенки мочевого пузыря.
    4. Отдых в глазами иглу в скоса иглы 21G. Используйте 21G иглу, чтобы вести глазами иглу через мочевой пузырь. Глазами иглы будет использоваться, чтобы взять мочеточник через мочевой пузырь.
    5. Пропустите прихватки шва 9 / вывода, применяется мочеточника в шаге 5.11.2, через первый разрез в мочевом пузыре и выходит через стенку мочевого пузыря, примыкающей к точке входа. После того, как мочеточник проходит через мочевой пузырь, это будет связано с якорь мочеточник в мочевой пузырь.
    6. Поместите длинный 6 / вывода черного плетеный шелковый шов, приложенное к концу мочеточника на этапе 5,10 глазами через иглу.
    7. Осторожно снять глазами иглу из мочевого пузыря в то время гарантируя, что мочеточник и протягивают через мочевой пузырь.
    8. После того, как мочеточник выходит из гое мочевого пузыря удалить иглу глазами и применить зажим с длинной нити в конце мочеточника, чтобы предотвратить отвод назад в мочевой пузырь.
    9. Для привязки мочеточника в месте в мочевом пузыре, связать 9 / вывода полиамида мононити липкости шва, нанесенный на стадии 5.11.5.
    10. Применить дополнительные односпальные 9 / вывода полиамидные мононити галстук швов, как описано в шагах 5.11.2 и 5.11.5 в двух местах вокруг точки входа, чтобы твердо закрепить мочеточника в мочевом пузыре.
    11. Используя спину открытых ножниц, нажмите стенки мочевого пузыря немного назад, чтобы выставить больше, выходящего мочеточника.
    12. Разделить выше длинного шва, расположенного на конце мочеточника мочеточника. Мочеточника следует убрать в теле мочевого пузыря. Это обычно наблюдается мочи течет из отверстия в мочевом пузыре, подтверждающие открытые просвет мочеточника.
    13. Закройте выходное отверстие в мочевом пузыре с 9 / вывода полиамид мононити шва.
  12. Осторожно вставьте кишечника вбрюшной полости.
  13. Послеоперационного ухода, как описано в шагах от 4,1 до 4,8.
  14. Разрешить мыши, чтобы оправиться, пока почки не распакованы, как правило, 7 дней.
  15. В экспериментальной конечной точки, усыпить мышь смещением шейных позвонков и собирать почки для гистопатологического анализа.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

Появление изменений в почках заметно после мочеточника препятствий, и она становится бледнее и напряженной при пальпации времени (рис 1). Существует увеличение дилатация мочеточника проксимальнее обструкции и почечной лоханки. Почек становится все более атрофический, как продолжительность обструктивных нефропатии возрастает при длительном обструкции вследствие значительного утончения почечной коры и мозгового вещества. После разворота мочеточника препятствий, цвет почек становится темнее по мере увеличе...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Обструкция почки может повлиять на нативные или трансплантированные почки и привести к повреждению почек и образованию рубцов. Модель R-UUO имеет отношение к заболеванию человека, поскольку у пациентов часто наблюдается обструкция почечного тракта на фоне гипертрофии предстательной железы, задние уретральные клапаны и т. д., что требует декомпрессии, у пациентов обычно остается значительное остаточное нарушение функции почек, которое не имеет современных вариантов лечения и в конечном итоге может привести к терминальной ...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Авторы не имеют конкурирующих или противоречивых интересов раскрывать.

Благодарности

Настоящее исследование было поддержано грантами от Kidney Research UK (ST4/2011), Cunningham Trust (CT11/14), Mrs AE Hogg Charitable Trust for Kidney Research и Renal Endowment Fund Королевской больницы Эдинбурга.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Тупые ножницы для препарированияFine Science Tools14072-10
Пружинные ножницы – прямыеFine Science Tools15000-10
Зубчатые щипцыFine Science Tools11021-12
Угловые щипцы x 2Fine Science Tools00649-11
Прямые щипцыFine Science Tools00632-11
Colibri 3 см Проволочный втягивательFine Science Tools17000-03
Иглодержатель Castroviejo с замкомFine Science Tools12565-14
Аппликатор с зажимом для ранFine Science Tools12031-07
Зажимы для ран 7 ммFine Science Tools12032-07
Микроиглодержатель Castroviejo с замкомFine Science Tools12060-01
OPMI пикомикропCarl ZeissS100
Нагревательная электронная прокладкаCozee Comfortn/a
6/O шелковый плетеный шовный материалHarvard Apparatus72-3287
9/O Дафилон (полиамид) шовный материалB-BraunG1111434
5/O плетеный шелковый шовный материалHarvard Apparatus51-7680
Обычная игла со скосом, 1 дюйм, 21 гBecton, Dickinson and Company305175
1 мл шприц с скользящим наконечникомBecton, Dickinson and Company300184
Wypall бумажные тампоныKimberley-ClarkL40Sterilised (Autoclave)
Ватные палочкиJohnson and Johnsonn/aSterilised (Autoclave)
Простые простыниGuardianCB03Стерилизованный (автоклав)
Мягкостенная силиконовая резиноваяСиликоновая трубка - внутренний диаметр 1,0 мм; внешний диаметр 2,0 мм; толщина стенки 0,6 мм
(Lacri-Lube) Белый мягкий парафин 57,3%, минеральное масло 42,5% и ланолиновые спирты 0,2%Allergan Ltd21956GB10X
(Videne) Повидон-йод 10%Ecolab LtdPL 04509/0041
(Vetalar V) Кетамина гидрохлоридPfizer AnimalHealth Vm 42058/4165100 мг/мл раствор
(Domitor) Медетомидина гидрохлоридOrionPharma Vm 06043/40031 мг/мл
(Vetergesic) Бупернорфина гидрохлоридAlsto AnimalHealth Vm 00063/40020,3 мг/мл
(Антиседан) Атипамезола гидрохоридOrion PharmaVm 06043/40045 мг/мл
(Adept) 4% ИкодекстринРаствор для снижения адгезииBaxter
NaCl 0,9%BaxterFKE1323
трубка

Ссылки

  1. Chevalier, R. L., Forbes, M. S., Thornhill, B. A. Ureteral obstruction as a model of renal interstitial fibrosis and obstructive nephropathy. Kidney Int. 75, 1145-1152 (2009).
  2. Kipari, T., et al. Nitric oxide is an important mediator of renal tubular epithelial cell death in vitro and in murine experimental hydronephrosis. Am J Pathol. 169, 388-399 (2006).
  3. Henderson, N. C., et al. Galectin-3 expression and secretion links macrophages to the promotion of renal fibrosis. Am J Pathol. 172, 288-298 (2008).
  4. Kitamoto, K., et al. Effects of liposome clodronate on renal leukocyte populations and renal fibrosis in murine obstructive nephropathy. J Pharmacol Sci. 111, 285-292 (2009).
  5. Tapmeier, T. T., et al. Reimplantation of the ureter after unilateral ureteral obstruction provides a model that allows functional evaluation. Kidney Int. 73, 885-889 (2008).
  6. Cochrane, A. L., et al. Renal structural and functional repair in a mouse model of reversal of ureteral obstruction. J Am Soc Nephrol. 16, 3623-3630 (2005).
  7. Puri, T. S., et al. Chronic kidney disease induced in mice by reversible unilateral ureteral obstruction is dependent on genetic background. Am J Physiol Renal Physiol. 298, F1024-F1032 (2010).
  8. Heikkila, J., Holmberg, C., Kyllonen, L., Rintala, R., Taskinen, S. Long-term risk of end stage renal disease in patients with posterior urethral valves. J Urol. 186, 2392-2396 (2011).
  9. Ravanan, R., Tomson, C. R. Natural history of postobstructive nephropathy: a single-center retrospective study. Nephron Clin Pract. 105, c165-c170 (2007).
  10. Bascands, J. L., Schanstra, J. P. Obstructive nephropathy: insights from genetically engineered animals. Kidney Int. 68, 925-937 (2005).
  11. Park, H. C., et al. Postobstructive regeneration of kidney is derailed when surge in renal stem cells during course of unilateral ureteral obstruction is halted. Am J Physiol Renal Physiol. 298, F357-F364 (2010).
  12. Manson, S. R., Niederhoff, R. A., Hruska, K. A., Austin, P. F. Endogenous BMP-7 is a critical molecular determinant of the reversibility of obstruction-induced renal injuries. Am J Physiol Renal Physiol. 301, F1293-F1302 (2011).
  13. Manson, S. R., Niederhoff, R. A., Hruska, K. A., Austin, P. F. The BMP-7-Smad1/5/8 pathway promotes kidney repair after obstruction induced renal injury. J Urol. 185, 2523-2530 (2011).
  14. Chaves, L. D., et al. Contrasting effects of systemic monocyte/macrophage and CD4+ T cell depletion in a reversible ureteral obstruction mouse model of chronic kidney disease. Clin Dev Immunol. 2013, 836-989 (2013).
  15. Haque, M. E., et al. Longitudinal changes in MRI markers in a reversible unilateral ureteral obstruction mouse model: preliminary experience. J Magn Reson Imaging. 39, 835-841 (2014).
  16. Bai, Z. M., et al. Arterially transplanted mesenchymal stem cells in a mouse reversible unilateral ureteral obstruction model: in vivo bioluminescence imaging and effects on renal fibrosis. Chinese Med J. 126, 1890-1894 (2013).
  17. Chaabane, W., et al. Renal functional decline and glomerulotubular injury are arrested but not restored by release of unilateral ureteral obstruction (UUO). Am J Physiol Renal Physiol. 304, F432-F439 (2013).
  18. Thornhill, B. A., Burt, L. E., Chen, C., Forbes, M. S., Chevalier, R. L. Variable chronic partial ureteral obstruction in the neonatal rat: a new model of ureteropelvic junction obstruction. Kidney Int. 67, 42-52 (2005).
  19. Thornhill, B. A., Chevalier, R. L. Variable partial unilateral ureteral obstruction and its release in the neonatal and adult mouse. Methods Mol Biol. 886, 381-392 (2012).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Теги

Модель обратимой обструкции мочеточника (ООМ)модель необратимой обструкции мочеточника (ООМ)процедура лигирования мочеточникатехника анастомоза мочеточникаанализ декомпрессии почекисследование ремоделирования тканейхирургическая модель на мышахоценка гидроуретераоценка фиброза
Мышиной модели необратимые и обратимые одностороннего мочеточника непроходимости
Связаться с нами
Порекомендовать библиотеке

Конфиденциальность

Условия использования

Политики

© 2026 MyJoVE Corporation. Все права защищены.