Заказ Микродиализ зонд Дизайн

Summary

Микродиализ является широко используется метод в области нейронаук. Поэтому коммерческие зонды в большой demand.In эта работа сборка зонд подробно, чтобы построить надежный, концентрические, на заказ микродиализа зонд менее чем за $ 10.

Abstract

Микродиализ является широко используется метод в области нейронаук. Поэтому коммерческие зонды большим спросом контролировать физиологические, фармакологические и патологические изменения в спинномозговой жидкости. К сожалению, коммерческие зонды дорого для научно-исследовательских групп в государственных учреждениях. В этой работе, сборка зонд подробно построить надежную, концентрические, на заказ микродиализа зонд менее чем за $ 10. Микродиализ зонд состоит из полисульфона мембраны с молекул рным отсечением 30 кДа. Зонд в пробирке восстановление веществ с различной молекулярной массой (в диапазоне 100-1,600 DA) и различными физико-химическими свойствами по сравнению. Зонд дает восстановление в пробирке примерно 20% для небольших соединений глюкозы, лактата, ацетилхолина и АТФ. В пробирке извлечения для нейропептидов с молекулярной массой от 1,000-1,600 Да составляют 2-6%. Таким образом, в то время как более высокой молекулярной Wвосемь из нейропептидов снижена значений пробирке восстановления, диализ соединений в нижнем диапазоне (до 500 Da) молекулярных весов не имеет огромное влияние на в пробирке скорости восстановления. Данный способ позволяет использование диализа мембраны с другим значением отсечения и мембранного материала. Таким образом, этот заказ сборки зонда имеет преимущество достаточной гибкостью, чтобы диализа веществ в широком диапазоне молекулярных масс. Здесь мы вводим микродиализа зонд с обменным длиной 2 мм, которая применима для микродиализа в мыши и крысы областях головного мозга. Тем не менее, размеры зонда может быть легко адаптирована для больших длин обмена для использования в более крупных животных.

Introduction

Микродиализ является широко используется метод в области нейронаук. За последние 50 лет, минимально-инвазивная методика микродиализа постоянно совершенствовалась, чтобы стать хорошо создана метод контроля локальных концентраций мелких соединений молекулярным весом в межклеточное пространство. Почти каждый межклеточной жидкости ткани могут быть исследованы в свободно движущихся животных.

Gaddum представил технику двухтактный в 1960-х. Он изменил подход от Feldberg и др., В которых тубокурарин вливают через канюлю заканчивается в боковой желудочек и сбора эффлюента также через канюлю ^1. Gaddum разработана методика двухта....

Protocol

1. Подготовка ПТФЭ-трубка

1. Сократить PTFE-трубы в 2.5 см. Используйте бумагу масштаб оценить физические размеры. (Рис 3а)
2. Отрежьте один конец под углом для облегчения подключения на выходе трубы. (Рис 3а)
3. Шероховатым ПТФЭ-трубки с использованием наждачной бумаги, чтобы склеивание с эпоксидным клеем.

2. Подготовка плавленого кварца

1. Сократить кварцевого стекла в 2,25 см кусок. (Рис 3а)

3. Установка кварцевой в PTFE-трубы

1. Вставьте 30 G канюли в полый PTFE волокна пробить его на расстоянии 1 см от пло....

Results

Концентрические заказ микродиализ зонд состоит из полисульфона мембраны с молекул рным отсечением 30 кДа. Сборка зонд показано на рисунке 3.

Это выставлены восстановление в пробирке для глюкозы мало энергии метаболитов (180,16 Da) и лактата (112,06 Da) в 19.10 ± 1.2% и 21.2 ± 1.6%, соответственно. Для положительно заряженной ацетилхолина с молекулярной массой 181.66 Да, он показал ин витро восстановительной стоимости 22,6 ± 1,4%. АТФ с молекулярной массой 5.......

Discussion

Фиг.3 показывает примерную сборку зонда. Правильные размеры внутренней и внешний диаметр должны быть внимательно следили за труб (OD 1,6 мм; ID 350 мкм), плавленого кварца (OD 105 мкм; ID 40 мкм) и диализной мембраны (OD 245 мкм; ID 210 мкм). Важно также, чтобы сохранить пространство между мембраной и плавленого кварца из (105 мкм), а также между мембраной и трубкой (105 мкм), а. Если значения различаются, давление в зонде может расти и привести к утечке мембраны.

Здесь мы в.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Эпоксидный клей	SunChrom GmbH, Фидрихсдорф, Германия
Плавленый диоксид кремния ID 40 &микро; m OD 105 &микро; m	Ziemer-Chromatographie, Мангейм, Германия	Арт. No: 6.040105
Полисульфоновая мембрана (фильтр для гемодиализа FX Cor Diax 600)	Fresenius Medical Care AG & Co. KGaA, Бад Хомбург, Германия	REF: F00001593
Цианакрилатный клей (суперклеевой пластик Pattex®);	ссельдорф, Германия
ТЕФЛОНОВАЯ трубка 1,6 x 0,35 мм	SunChrom® GmbH, Фридберг, Германия	Арт. No: 969-195.219
Скальпель (Перо® Хирургическое лезвие No 10)	pfm medical ag, кёльн, Германия	Арт. No: 07310
Микроскоп	MEIJI Techno	Канюля EMZ-8TR
30 G x 11" (0,3 x 25 мм) Sterican® Z	B.Braun Melsungen AG, Мельзунген, Германия	REF: 9324500
25 G x 11/2" (0,5 x 40 мм) канюля 100 Sterican®	B.Braun Melsungen AG, Мельзунген, Германия	REF: 9186166
Fine pen (Stabilo point 88 fine 0.4)	Schwan-STABILO Schwanhä uß er GmbH & Co. KG	Art. No: 88/36
Клей горячий  (Клеевые стержни ULTRA Power x 11 мм)	Steinel® GmbH, Herzebrock-Clarholz, Германия	Арт. No: 4007841046910
Наждачная бумага P60 230 x 280	Robert Bosch GmbH, Герлинген-Шиллерх; he, Германия	Каталожный номер: 2608605397