Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Маркировка клеток и ориентации с Суперпарамагнитные наночастиц оксида железа

12.1K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/53099

⸱

19 октября 2015 г.

 ,  ,  ,  ,  , 
1Division of Cardiovascular Diseases, Mayo Clinic, 2Division of Engineering, Mayo Clinic, 3School of Medicine, Pharmacy and Health, Durham University, 4Regional Center for Applied Molecular Oncology, Masaryk Memorial Cancer Institute, 5Mayo Clinic College of Medicine, Mayo Clinic

В этой статье

Краткое содержание

Адресная доставка клеток полезна в различных биомедицинских приложениях. Целью этого протокола является использование суперпарамагнитных наночастиц оксида железа (SPION) для мечения клеток и тем самым обеспечение подходов к магнитному нацеливанию на клетки для высокой степени контроля над доставкой и локализацией клеток.

Аннотация

Направленной доставки клеток и терапевтических агентов выиграют широкий спектр биомедицинских применений концентрированием терапевтический эффект в сайте-мишени при сведении к минимуму вредное воздействие на офф-сайтов-мишеней. Магнитный таргетинг клеток является эффективным, безопасным и простым техника доставки. Суперпарамагнитных наночастицы оксида железа (Spion) являются биологически, биосовместимыми и могут быть эндоцитированный в клетки, чтобы сделать их реагировать на магнитных полей. Процесс синтеза включает в себя создание магнетит (Fe 3 O 4) наночастицы с последующей высокоскоростной эмульгирования с образованием поли (молочной-со-гликолевой кислоты) (PLGA) покрытие. В ПМГК-магнетитовых SPIONs примерно 120 нм в диаметре, включая примерно 10 нм диаметр магнетита ядра. При помещении в культуральной среде, SPIONs естественно эндоцитированный клетками и хранится в виде небольших кластеров внутри цитоплазмы эндосом. Эти частицы придают достаточную магнитную массу клетокдля обеспечения ориентации в магнитных полей. Многочисленные сортировка клеток и целеуказания приложения включены по оказанию различных типов клеток, реагирующих на магнитные поля. SPIONs есть множество других биомедицинских приложений, а также в том числе использования в качестве контрастного агента медицинских изображений, целевой наркотиков или генной доставки, диагностических тестов, и поколения локальной гипертермии для лечения опухолей или ткани пайки.

Введение

Целенаправленная доставка и захват клеток в определенные участки тела желательна для различных биомедицинских применений. Доставка нейральных стволовых клеток в мозг с помощью сфокусированного ультразвука под контролем МРТ была предложена в качестве возможного варианта лечения нейродегенеративных заболеваний, черепно-мозговой травмы и инсульта. Мезенхимальные стволовые клетки изучаются на предмет их способности доставлять противораковые препараты к опухолям благодаря их природным опухолево-тропнымсвойствам 2,3. Сердечные стволовые клетки были доставлены в сердце в качестве возможного лечения инфаркта миокарда4,5. Сосудистые стенты были разработаны с антителами к CD34 для захвата циркулирующих клеток-предшественников6. Несмотря на многообещающие перспективы, эти подходы к таргетированию клеток имеют недостатки, включая недостаточную специфичность клеток, непоследовательное удержание клеток и доставку клеток-мишеней вне мишени.

Общая цель текущего метода - обеспечить магнитно-направленное нацеливание на клетки для различных приложений доставки и сортировки клеток. Магнитное нацеливание позволяет осуществлять контролируемую доставку определенных клеток к определенному целевому участку с минимальными нецелевыми эффектами7. Магнитные поля могут создаваться имплантированными или внешними устройствами для безопасного управления движением магнитно-меченых клетокв организме. Многочисленные исследовательские усилия были сосредоточены на магнитно-направленном нацеливании стволовых клеток на поврежденные ткани, такие как сердце9-14, сетчатка15,легкие 16, кожа17, спинной мозг18,19, кости20, печень21 и мышцы22,23, с целью улучшения результатов регенерации.

Магнитное нацеливание на клетки также широко изучалось как средство эндотелизации имплантируемых сердечно-сосудистых устройств. Однородный и полный эндотелий обеспечивает барьер между устройством и циркулирующими элементами крови для смягчения тромбоза и воспаления. Эндотелиальные клетки могут быть доставлены в устройство как до имплантации, так и через сосудистую систему после имплантации. В обоих случаях магнитные поля используются для захвата клеток на поверхности устройства и удержания клеток при воздействии напряжения сдвига, создаваемого циркулирующей кровью. Для этой цели были изготовлены и испытаны магнитные сосудистые стенты24-27 и сосудистые трансплантаты28.

Нацеливание на магнитные клетки требует стратегии для маркировки клеток частицами-магнитными носителями. Эти частицы могут связываться с поверхностью клеток через антитела или пары лиганд/рецептор, или они могут быть эндоцитозированы в клетках. Суперпарамагнитные наночастицы оксида железа (СИОН) биоразлагаемы, биосовместимы и легко эндоцитируются различными типами клеток29. Эти частицы эффективно делают клетку чувствительной к магнитным полям и естественным образом разрушаются с течением времени. SPION представляют собой простой и безопасный способ магнитного мечения клеток в культуре для различных применений магнитного нацеливания и сортировки. Предложен способ синтеза СПИОНОВ с сердцевиной из магнетита (Fe3O4) и оболочки из полимолочной ко-гликолевой кислоты (PLGA). Кроме того, предусмотрен метод мечения клеток в культуре со СПИОНами.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

1. Синтез магнетита гель

  1. Промыть все посуды с помощью концентрированной соляной кислоты с последующим деионизированной водой с последующим этилового спирта. Дать высохнуть O / N, предпочтительно в сушильном шкафу.
    ВНИМАНИЕ! соляной кислоты вредно - носить индивидуальное защитное оборудование и работу в вытяжном шкафу; этиловый спирт вреден - средства индивидуальной защиты.
  2. Используйте бутылку Dreschel де-газ 500 мл деионизированной H 2 O, осторожно пузырьков газа N 2 в течение 30 минут.
  3. Настройка синтез аппарат магнетита в пределах химической вытяжкой.
    1. Поставьте мл трехгорлую круглодонную колбу 500 в пределах isomantle нагревателя и закрепить центр шею с помощью зажима и стоять.
    2. Установка резиновой пробкой в ​​одном из боковых шеек в круглодонную колбу, и обратным холодильником с резиновой пробкой в ​​остальные стороны шеи. Непрерывно работать холодную воду через обратным холодильником.
    3. Прокол йе круглодонную колбу в резиновой перегородкой с иглой, соединенной с газовой линии N 2 и прокол резиновой перегородки дефлегматор с иглой, соединенной с газовым линии, проходящей в барботер (т.е. колбу с водой), чтобы визуализировать отток газа.
    4. Установите лезвие весло в центре шеи круглодонную колбу в через адаптер весло. Прикрепите вал лезвия манипулятора к мешалкой, установленной на подставке.
  4. Выпустите круглодонную колбу с N 2 газа и оставить N 2 газ течет по низкой ставке, но обнаруживаемой.
  5. Удалить дефлегматор с круглодонную колбу и добавляют 1,000 г железа (III), хлорид, 0,6125 г железа (II), хлорид тетрагидрата, и 50 мл дегазировали H 2 O.
    ВНИМАНИЕ! железа (III), хлорид железа (II), хлорид Тетрагидрат вредны - средства индивидуальной защиты.
  6. Заменить обратным холодильником и перемешивают при 1000 оборотов в минуту, при нагревании до 50° С. Перемешивание в этих условиях производит 10 нм наночастиц магнетита диаметром.
  7. После при 50 ° С, добавляют 10 мл 28% -ного раствора гидроксида аммония путем введения через резиновую прокладку в круглодонную колбу в то же время перемешивая.
    ВНИМАНИЕ! гидроксид аммония вредно - носить личное защитное оборудование.
    Примечание: раствор гидроксида аммония используют для осаждения магнетита и раствор должен стать черным.
  8. Снимите резиновой пробкой и N 2 к газопроводу от круглодонную колбу и нагревают до 90 ° С с целью выпаривания газообразного аммиака в то же время помешивая.
    Примечание: Это не является обязательным, чтобы поддерживать поток N 2 в круглодонную колбу путем прокалывания каучуковым затвором дефлегматор, однако, окисление магнетита в маггемитом незначительна на этом этапе.
  9. После при 90 ° С, добавляют 1 мл олеиновой кислоты к круглодонную колбу в то же время перемешивая. Олеиновую кислоту используют для покрытия магнетита наnoparticles, чтобы сформировать магнетит гель.
    ВНИМАНИЕ! олеиновая кислота вредна - средства индивидуальной защиты.
  10. Заменить резиновой пробкой и N 2 к газопроводу на круглодонную колбу и удалить обратным холодильником.
  11. Выключите огонь и движение на 500 оборотов в минуту в течение 2 ч.
  12. Извлеките круглодонную колбу с нагревателем и isomantle переливать любую оставшуюся жидкость при использовании сильного магнита проходит на дне колбы, чтобы сохранить магнетита гель.
    ВНИМАНИЕ! справиться с сильным магнитом с крайней осторожностью, чтобы избежать повреждения или травмы.
  13. Разрешить магнетит гель до воздушно-сухого O / N (опционально).

2. Очистка магнетита гель

  1. Добавить 40 мл гексана в круглодонной колбе, чтобы растворить магнетита гель
    ВНИМАНИЕ! гексан вреден - средства индивидуальной защиты и работы в вытяжном шкафу.
  2. Используйте делительную воронку с 40 мл де-газом H 2 O, чтобы удалить остатки Н 2 О сюдам магнетит решение.
    1. Медленно влить магнетит раствор на H 2 O в течение делительную воронку и осторожно встряхните двухфазной жидкости в течение 5 минут.
    2. Слейте и выбросить нижнюю водной фракции.
    3. Медленно добавить 40 мл де-газом H 2 O в делительной воронке, так что он оседает под магнетита раствор и нежно вихревой и слейте, как раньше.
    4. Повторите мыть в третий раз.
  3. Перевести магнетит решение колбу Эрленмейера, добавить несколько шпателей на сумму безводным сульфатом натрия, и водоворот, чтобы удалить оставшиеся остаточного H 2 O из магнетита решения.
  4. Фильтр магнетит раствор через фильтровальную бумагу 1 мкм в воронку фильтра для удаления сульфата натрия и остаточного H 2 O.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Вакуумный помощь рекомендуется.
  5. Передача магнетит раствор в 50 мл колбу и испаряющейся использовать роторный испаритель для испарения гексана2 ч при следующих условиях: скорость вращения умеренным, вакуум применяется, выпаривание колбу в водяной бане при 50 °, и 24 ° С воды, циркулирующей через конденсатор.
    ПРИМЕЧАНИЕ: При желании, сохранить магнетит гель Перед покрытием PLGA.

3. Покрытие наночастицы магнетита с PLGA Shell

  1. Растворить 3,60 г PLGA (75/25 смесь) в 240 мл этилацетата, чтобы создать 1,5% (м / о) раствором. ВНИМАНИЕ: этилацетат вредно - носить индивидуальное защитное оборудование и работы в вытяжном шкафу.
  2. Растворить 25,00 г Pluronic F-127 в 500 мл дегазировали H 2 O с использованием магнитной мешалки, чтобы создать 5,0% (м / о) раствором.
    Примечание: Pluronic F-127 является неионным амфифильный блок-сополимер, который действует как поверхностно-активное вещество биосовместимого. Это помогает стабилизировать эмульсию масло-в-воде в шаге 3.3.2.
  3. Использование microspatula, собирать магнетит геля в шести 0,040 г аликвоты в пределах весовых стеклянных флаконах. PerfORM покрытия и стиральная следующий процесс для каждого аликвоту.
    ПРИМЕЧАНИЕ: аликвоты необходимы для обеспечения эффективной обработки и магнитное декантации, который будет максимизировать чистоту и выход при минимизации деградации перед сублимационной сушки в шаге 4.
    1. Добавить 0,040 г аликвоту магнетита геля и 40 мл раствора PLGA в пластиковый стакан и разрушать ультразвуком в ультразвуковом очистителе в течение 10 мин.
    2. Добавить 80 мл раствора Pluronic к пластиковый стакан и сразу же эмульсию с лабораторном смесителе при высокой установке на 7 минут, чтобы сформировать покрытие PLGA по магнетитовых наночастиц в виде эмульсии типа масло-в-воде.
    3. Сразу разбавить Spion решение в 1 л деионизированной H 2 O и разрушать ультразвуком в течение 1 ч в химическом вытяжном шкафу, чтобы испарить этилацетат.
    4. Поместите сильный магнит рядом с Spion решения и осторожно перемешать, чтобы собрать коричневатые SPIONs на магнит.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Это может быть необходимо периодически перемешивать в течение нескольких часовс в растворе оказывается беловатые, указывающий, что большинство SPIONs были собраны.
    5. Декантировать водного раствора при сохранении SPIONs в стакан с магнитом.
    6. Промыть SPIONs три раза следующим образом.
      1. Приостановить SPIONs в 1 л деионизированной H 2 O.
      2. Разрушать ультразвуком Spion решение для 20 минут.
      3. Поместите сильный магнит рядом с Spion решения и осторожно перемешать, чтобы собрать коричневатые SPIONs на магнит. Это может быть необходимо, чтобы периодически перемешивают в течение нескольких часов, прежде чем раствор становится ясно, что указывает, что большинство SPIONs были собраны.
      4. Декантировать водного раствора при сохранении SPIONs в стакан с магнитом.
  4. Сбор SPIONs синтезированы из каждой из шести магнетит гель аликвоты в одном флаконе взвешенной стеклянной в виде водной суспензии. При желании декантируют избыток воды магнитным мере необходимости.

4. Замораживание-drying из SPIONs

  1. Замораживание Spion решение.
  2. Мораторий высушить Spion решение O / N в лиофилизаторе.
  3. Взвесьте лиофилизированные SPIONs. Подвергают сублимационной сушке SPIONs можно хранить при -20 ° С до использования для маркировки клеток.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Хранение при -20 ° C резко снижает кинетика разложения и увеличивает срок годности.

5. Маркировка клетки с SPIONs

  1. Приостановка аликвоту SPIONs в фосфатно-солевом буфере (PBS) при концентрации 40 мг / мл и разрушать ультразвуком в течение 30 минут.
  2. Добавьте Spion решение почти сливной колбу клеток при концентрации 5 мкл / мл клеточной культуральной среды. Убедитесь, равномерное распределение, осторожно покачивая колбу.
  3. Инкубируйте клетки в течение 16 ч при 37 ° С.
  4. Осторожно аспирации культуральной среды и промыть клетки в два раза с PBS.
  5. Сбор магнитно-меченых клеток и использовать для экспериментов.
  6. Неиспользованный раствор Spion можно хранить при 4 ° С и должен быть с намиред в течение нескольких месяцев. Разрушать ультразвуком в течение 30 минут перед каждым использованием.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

Наночастиц магнетита примерно 10 нм в диаметре, в результате перемешивания водного раствора железа (III) хлорид и хлорид железа (II), тетрагидрата при 50 ° С и 1000 оборотов в минуту (рисунок 1). Эти результаты показывают, удачный синтез наночастиц магнетита. Важно, чтобы проверить размер и форму наночастицы магнетита, взятых из небольшого образца шихты при попытке синтеза впервые. Просвечивающей электронной микроскопии (ПЭМ) является предпочтительным методом визуализации этих частиц. Загрузку следует в...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Как и любой протокол синтеза наночастиц, чистота реагентов химических веществ является критическим для достижения высокого качества SPIONs, которые будут иметь минимальные цитотоксические эффекты. Поэтому важно, чтобы приобрести очень чистые реагенты, включая олеиновую кислоту (≥99%), железо (II) хлорида тетрагидрата (≥99.99%), железа (III) хлорида (≥99.99%), этилацетат (ВЭЖХ, ≥99.9% ), гексан (ВЭЖХ, ≥97.0%), гидроксид аммония (≥99.99%), и сульфат натрия (≥99.0%). Это имеет особое значение для приобретения очень чистый ...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Авторы заявляют, что у них нет конкурирующих финансовых интересов.

Благодарности

Авторы выражают признательность за финансирование от Европейского фонда регионального развития – FNUSA-ICRC (no. CZ.1.05/ 1.1.00/ 02.0123), грант Американской кардиологической ассоциации для ученых (AHA #06-35185N) и Национальные институты здоровья (NIH #T32HL007111).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Раствор гидроксида аммония, 28% NH3 в H2O, ≥ 99,99% микропримеси металлов на основеSigma-Aldrich338818-100ML Вредный реагент – износ средств индивидуальной защиты
Флакон Dreshel, 500 млAce Glass5516-16
Этилацетат, CHROMASOLVR Plus, для ВЭЖХ, 99,9% Sigma-Aldrich650528-1LВредный реагент - носить средства индивидуальной защиты и работать в вытяжном шкафу
Этиловый спиртSigma-AldrichE7023Вредный реагент - носить средства индивидуальной защиты
Испарительная колба, 50 мл, 24/40 для соединенияSigma-AldrichZ515558Для использования с ротиспарителем
Фильтровальная бумага, диаметр 3 см, класс 1Fisher09-805PДля использования со стеклянной фильтрующей воронкой
Стеклянные стаканы, 1 лFisherFB-101-1000Для промывки СПИОНОВ
Стеклянная фильтрующая воронка, адаптер для вакуумного шланга, подходит 24/40, 30 млFisherK954100-0344 
Крышки стеклянных флаконовFisher03-391-46Для использования со стеклянными флаконами
Стеклянные флаконы, 2 млFisher03-391-44Для сбора магнетитового геля & СПИОНЫ
Гексан, CHROMASOLVR, для ВЭЖХ, ≥ 97,0% (GC)Сигма-Олдрич34859-1L Вредный реагент - ношение средств индивидуальной защиты и работа в вытяжном шкафу
Соляная кислотаSigma-AldrichH1758Вредный реагент - носить средства индивидуальной защиты и работать в вытяжном шкафу
Тетрагидрат хлорида железа (II), > На 99,99% основано на микропримесях металлов Sigma-Aldrich380024-5GВредный реагент - износ средств индивидуальной защиты
Железо(III) хлорид безводный, порошок, ≥ 99,99% микропримесей металловна основе Sigma-Aldrich451649-1GВредный реагент - износ средства индивидуальной защиты
Изомантл нагреватель, 500 млVoight GlobalEM0500/CEX1
Лабораторный смесительSilversonL5M-A
ЛиофилизаторLabconco7670520
микрошпателиFisher21-401-25AДля переноса магнетита гель
магнит NdFeB, 1 в x 1 в x 1 вAmazing MagnetsC1000H-MОчень сильный магнит, ручка с осторожностью
Олеиновая кислота, ≥ 99% (GC)Сигма-ОлдричO1008-5G Хранить в морозильной камере; Вредный реагент - износ средства индивидуальной защиты
Верхняя мешалкаIKA2572201
Верхний зажиммешалки IKA2664000Для использования с верхней мешалкой
Верхняя мешалка H-образная подставкаIKA1412000Для использования с верхней мешалкой
Фосфат буферный физиологический LifeTechnologies10010-023
Пластиковые стаканы, 250 млFisher02-591-28
PLGA PURASORB PDLG (смесь 75/25)PuracPDLG 7502PDLG 7502A; Хранить в морозильной камере
порошок Pluronic F-127, биореагент, подходящий для клеточной культурыSigma-AldrichP2443-250G 
Расширяемое лопастное лопасти из ПТФЭ, диаметр 8 ммSciQuipSP4018
подходит для 24/40, диаметр 8 мм MonmouthScientificPTFE Vessel Adapteror A480Для использования с расширяемым лопастным лопастем из ПТФЭ
Рециркуляционный охладительClarkson696613Для использования с ротоиспарителем
Конденсатор рефлюкса, подходит 24/40, 250 ммAce Glass5997-133
РотоспарительClarkson216949
Резиновые перегородки, подходит для 24/40Ace Glass9096-56
Разделительная воронка с пробкой, 250 млFisher10-438E
Сульфат натрия ACS реагент, ≥ 99,0%, безводный, гранулированныйSigma-Aldrich239313-500G 
Колба с круглым дном с тремя горлышками, угловая, стыки 24/40, 500 млAce Glass6948-16
Ультразвуковой очиститель перфорированной сковородыFisher15-335-20AДля использования с ультразвуковым очистителем
Ультразвуковой очиститель, 2,8 л Fisher15-335-20
Контроллер вакуумаClarkson216639Для использования с ротиспарителем (опционально)
Вакуум насос Clarkson219959Для использования с ротиспарителем
Также можно использовать Адаптер для сосуда из ПТФЭ ,

Ссылки

  1. Burgess, A., et al. Targeted delivery of neural stem cells to the brain using MRI-guided focused ultrasound to disrupt the blood-brain barrier. PLoS One. 6 (11), e27877(2011).
  2. Nguyen, K. T. Mesenchymal Stem Cells as Targeted Cell Vehicles to Deliver Drug-loaded Nanoparticles for Cancer Therapy. J Nanomed Nanotechol. 4 (1), e128(2013).
  3. Kean, T. J., Lin, P., Caplan, A. I., Dennis, J. E. MSCs: Delivery Routes and Engraftment, Cell-Targeting Strategies, and Immune Modulation. Stem Cells Int. , 732742(2013).
  4. Suzuki, K., et al. Targeted cell delivery into infarcted rat hearts by retrograde intracoronary infusion: distribution, dynamics, and influence on cardiac function. Circulation. 110 (11 Suppl 1), II225-II230 (2004).
  5. Garbern, J. C., Lee, R. T. Cardiac stem cell therapy and the promise of heart regeneration. Cell Stem Cell. 12 (6), 689-698 (2013).
  6. Duckers, H. J., et al. Accelerated vascular repair following percutaneous coronary intervention by capture of endothelial progenitor cells promotes regression of neointimal growth at long term follow-up: final results of the Healing II trial using an endothelial progenitor cell capturing stent (Genous R stent). EuroIntervention. 3 (3), 350-358 (2007).
  7. Pan, Y., Du, X., Zhao, F., Xu, B. Magnetic nanoparticles for the manipulation of proteins and cells. Chem Soc Rev. 41 (7), 2912-2942 (2012).
  8. Huang, Z. Y., et al. Deep magnetic capture of magnetically loaded cells for spatially targeted therapeutics. Biomaterials. 31 (8), 2130-2140 (2010).
  9. Shen, Y., et al. Comparison of Magnetic Intensities for Mesenchymal Stem Cell Targeting Therapy on Ischemic Myocardial Repair: High Magnetic Intensity Improves Cell Retention but Has No Additional Functional Benefit. Cell Transplant. , (2014).
  10. Cheng, K., et al. Magnetic antibody-linked nanomatchmakers for therapeutic cell targeting. Nat Commun. 5, 4880(2014).
  11. Vandergriff, A. C., et al. Magnetic targeting of cardiosphere-derived stem cells with ferumoxytol nanoparticles for treating rats with myocardial infarction. Biomaterials. 35 (30), 8528-8539 (2014).
  12. Huang, Z., et al. Magnetic targeting enhances retrograde cell retention in a rat model of myocardial infarction. Stem Cell Res Ther. 4 (6), 149(2013).
  13. Chaudeurge, A., et al. Can magnetic targeting of magnetically labeled circulating cells optimize intramyocardial cell retention. Cell Transplant. 21 (4), 679-691 (2012).
  14. Cheng, K., et al. Magnetic targeting enhances engraftment and functional benefit of iron-labeled cardiosphere-derived cells in myocardial infarction. Circ Res. 106 (10), 1570-1581 (2010).
  15. Yanai, A., et al. Focused magnetic stem cell targeting to the retina using superparamagnetic iron oxide nanoparticles. Cell Transplant. 21 (6), 1137-1148 (2012).
  16. Ordidge, K. L., et al. Coupled cellular therapy and magnetic targeting for airway regeneration. Biochem Soc Trans. 42 (3), 657-661 (2014).
  17. El Haj, A. J., et al. An in vitro model of mesenchymal stem cell targeting using magnetic particle labelling. J Tissue Eng Regen Med. , (2012).
  18. Vanecek, V., et al. Highly efficient magnetic targeting of mesenchymal stem cells in spinal cord injury. Int J Nanomedicine. 7, 3719-3730 (2012).
  19. Sasaki, H., et al. Therapeutic effects with magnetic targeting of bone marrow stromal cells in a rat spinal cord injury model. Spine (Phila Pa 1976). 36 (12), 933-938 (2011).
  20. Oshima, S., et al. Enhancement of bone formation in an experimental bony defect using ferumoxide-labelled mesenchymal stromal cells and a magnetic targeting system. J Bone Joint Surg Br. 92 (11), 1606-1613 (2010).
  21. Luciani, A., et al. Magnetic targeting of iron-oxide-labeled fluorescent hepatoma cells to the liver. Eur Radiol. 19 (5), 1087-1096 (2009).
  22. Oshima, S., Kamei, N., Nakasa, T., Yasunaga, Y., Ochi, M. Enhancement of muscle repair using human mesenchymal stem cells with a magnetic targeting system in a subchronic muscle injury model. J Orthop Sci. 19 (3), 478-488 (2014).
  23. Ohkawa, S., et al. Magnetic targeting of human peripheral blood CD133+ cells for skeletal muscle regeneration. Tissue Eng Part C Methods. 19 (8), 631-641 (2013).
  24. Tefft, B. J., et al. Magnetizable Duplex Steel Stents Enable Endothelial Cell Capture. Ieee T Magn. 49 (1), 463-466 (2013).
  25. Uthamaraj, S., et al. Design and validation of a novel ferromagnetic bare metal stent capable of capturing and retaining endothelial cells. ABME. 42 (12), 2416-2424 (2014).
  26. Polyak, B., et al. High field gradient targeting of magnetic nanoparticle-loaded endothelial cells to the surfaces of steel stents. Proc Natl Acad Sci U.S.A. 105 (2), 698-703 (2008).
  27. Pislaru, S. V., et al. Magnetically targeted endothelial cell localization in stented vessels. J Am Coll Cardiol. 48 (9), 1839-1845 (2006).
  28. Pislaru, S. V., et al. Magnetic forces enable rapid endothelialization of synthetic vascular grafts. Circulation. 114 (1 Suppl), 314-318 (2006).
  29. Wang, Y. X., Xuan, S., Port, M., Idee, J. M. Recent advances in superparamagnetic iron oxide nanoparticles for cellular imaging and targeted therapy research. Curr Pharm Des. 19 (37), 6575-6593 (2013).
  30. Yellen, B. B., et al. Targeted drug delivery to magnetic implants for therapeutic applications. J Magn Magn Mater. 293 (1), 647-654 (2005).
  31. Granot, D., et al. Clinically viable magnetic poly(lactide-co-glycolide) particles for MRI-based cell tracking. Magn Reson Med. , (2013).
  32. Levy, M., et al. Long term in vivo biotransformation of iron oxide nanoparticles. Biomaterials. 32 (16), 3988-3999 (2011).
  33. Mirshafiee, V., Mahmoudi, M., Lou, K., Cheng, J., Kraft, M. L. Protein corona significantly reduces active targeting yield. Chem Commun (Camb). 49 (25), 2557-2559 (2013).
  34. Salvati, A., et al. Transferrin-functionalized nanoparticles lose their targeting capabilities when a biomolecule corona adsorbs on the surface. Nat Nanotechnol. 8 (2), 137-143 (2013).
  35. Landazuri, N., et al. Magnetic targeting of human mesenchymal stem cells with internalized superparamagnetic iron oxide nanoparticles. Small. 9 (23), 4017-4026 (2013).
  36. Sun, J. H., et al. In vitro labeling of endothelial progenitor cells isolated from peripheral blood with superparamagnetic iron oxide nanoparticles. Mol Med Rep. 6 (2), 282-286 (2012).
  37. Zhang, B., et al. Detection of viability of transplanted beta cells labeled with a novel contrast agent - polyvinylpyrrolidone-coated superparamagnetic iron oxide nanoparticles by magnetic resonance imaging. Contrast Media Mol Imaging. 7 (1), 35-44 (2012).
  38. Song, M., et al. Labeling efficacy of superparamagnetic iron oxide nanoparticles to human neural stem cells: comparison of ferumoxides, monocrystalline iron oxide, cross-linked iron oxide (CLIO)-NH2 and tat-CLIO. Korean J Radiol. 8 (5), 365-371 (2007).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Теги

Синтез наночастиц магнетитапокрытие PLGAвысокоскоростная эмульгациямагнитный таргетингфлуоресцентная микроскопияпросвечивающая электронная микроскопиясканирующая электронная микроскопиялиофилизация
Маркировка клеток и ориентации с Суперпарамагнитные наночастиц оксида железа
Связаться с нами
Порекомендовать библиотеке

Конфиденциальность

Условия использования

Политики

© 2026 MyJoVE Corporation. Все права защищены.