Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Синтез РГД-функционализированного гидрогелей в качестве инструмента для терапевтических применений

11K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/54445

⸱

7 октября 2016 г.

 ,  , 
1Department of Chemistry, Materials and Chemical Engineering "Giulio Natta", Politecnico di Milano

В этой статье

Краткое содержание

Мы представляем протокол синтеза функционализированных RGD гидрогелей в качестве устройств для доставки клеток и лекарств. Процедура включает в себя катализируемое медью алкин-азидное циклоприсоединение (CuAAC) между алкин-модифицированной полиакриловой кислотой (PAA) и производным RGD-азида. Гидрогели получают с помощью микроволновой поликонденсации и исследуют их физико-химические свойства.

Аннотация

Использование полимеров в качестве биоматериалов обеспечило значительные преимущества в терапевтических приложениях. В частности, возможность модификации и функционализации полимерных цепей соединениями, способными улучшать биосовместимость, механические свойства или жизнеспособность клеток, позволяет разрабатывать новые материалы для решения новых задач в биомедицинской области. Благодаря стратегиям функционализации полимеров, клик-химия является мощным инструментом для улучшения клеточной совместимости и свойств доставки лекарств полимерных устройств. Аналогичным образом, фундаментальная потребность биомедицины в использовании стерильных инструментов для предотвращения потенциальных неблагоприятных побочных эффектов, таких как токсичность или загрязнение биологической среды, вызывает растущий интерес к микроволновой стратегии.

Комбинация клик-химии и микроволнового метода подходит для производства биосовместимых гидрогелей с желаемыми функциональными возможностями и улучшенными характеристиками в биомедицинских приложениях. Данная работа направлена на синтез функционализированных РГД гидрогелей. RGD (аргинилглициласпарагиновая кислота) представляет собой трипептид, который может имитировать белки клеточной адгезии и связываться с рецепторами клеточной поверхности, создавая благоприятную микросреду для клеток внутри 3D-полимерной сети гидрогелей. Функционализация РГД происходит за счет 1,3-дипольного циклоприсоединения Гёйсгена. Некоторые карбоксильные группы ПАА модифицируются алкиновой группой, в то время как РГД функционализируется азидокислотой в качестве конечного остатка пептидной последовательности. Наконец, оба продукта используются в катализируемой медью клик-реакции для постоянного связывания пептида с ПАА. Этот модифицированный полимер используется с карбомером, агарозой и полиэтиленгликолем (ПЭГ) для синтеза гидрогелевой матрицы. 3D-структура формируется в результате реакции этерификации с участием карбоксильных групп из ПАА и карбомерных и гидроксильных групп из агарозы и ПЭГ путем микроволновой поликонденсации. Эффективность механизма гелеобразования обеспечивает высокую степень функционализации РГД. Кроме того, процедура загрузки терапевтических соединений или биологических инструментов в эту функционализированную сеть очень проста и воспроизводима.

Введение

Гидрогели представляют собой трехмерные сетки, образованные гидрофильными сшитые полимеры, которые являются природными или синтетическими, и характеризуется отличительным трехмерной структурой. Эти устройства становятся все более привлекательными в биомедицинской области доставки лекарственных средств, тканевой инженерии, носителей генов и интеллектуальных датчиков 1,2. В самом деле, высокое содержание в них воды, а также их реологические и механические свойства делают их пригодными кандидатами для имитации микросреды мягких тканей и сделать их эффективными инструментами для водорастворимого цитокина или доставки фактора роста. Одним из наиболее перспективных является использование в качестве инъекционного биоматериала несущей клетки и биологически активных соединений. Гидрогели может улучшить выживаемость клеток и судьбу контроля стволовых клеток путем проведения и точно доставлять регуляторные сигналы стволовых клеток в физиологической соответствующим образом, как это наблюдалось в в пробирке и в экспериментах 3,4 в естественных условиях. Ведущее преимуществом этого является возможностьдля поддержания клеток в инъекционные зоне прививки (на месте), сводя к минимуму количество клеток , которое оставляет область и экстравазатов в кровеносную поток, мигрируя по всему телу и потери целевой цели 5. Устойчивость трехмерных гидрогелевых сетей обусловлено его сшивающих сайтов, образованных ковалентными связями или силами сцепления между полимерными цепями 6.

В этом контексте ортогональным селективной химии применительно к полимерной цепи является универсальным инструментом , способным улучшить гидрогелевые выступления 7. Действительно, модификация полимеров с подходящими химическими группами, может помочь обеспечить надлежащее химические, физические и механические свойства для повышения жизнеспособности клеток и их использования в процессе формирования ткани. Таким же образом, среди методов для загрузки клеток или факторов роста в гелевой матрице, использование RGD-пептида позволяет улучшения адгезии клеток и выживаемости. РГД является трипептид, состоящийаргинина, глицина и аспарагиновой кислоты, которая на сегодняшний день является наиболее эффективным и часто используется трипептид из - за его способности решать более одного рецептора клеточной адгезии и его биологического воздействия на клетки анкеровки, поведение и выживание 8,9. В этой работе, синтез РГД-функционализированный гидрогели изучается с целью проектирования сетей характеризуется достаточной биохимическими свойствами для гостеприимного клеток микроокружения.

Использование СВЧ - излучения в синтезе гидрогеля предлагает простую процедуру , чтобы свести к минимуму побочные реакции и получить более высокие скорости реакции и урожайности в течение более короткого периода времени по сравнению с обычными тепловыми процессами 10. Этот метод не требует стадий очистки и дает стерильные гидрогели из - за взаимодействия полимеров и отсутствие органического растворителя в реакционной системе 11. Таким образом, он обеспечивает высокий процент РГД, связанных с полимерной сети, так как не модаifications необходимы для химических групп полимеров, участвующих в образовании геля. Карбоксильные группы, из ПАА и карбомер, и гидроксильных групп, с ПЭГ и агарозы, вызывают гидрогель трехмерную структуру с помощью реакции поликонденсации. Указанные полимеры используются для синтеза гидрогелей в повреждении спинного мозга ремонта лечения 12. Эти устройства, как сообщалось в предыдущих работах 13,14, показывают высокую биосовместимость, а также механические и физико - химические свойства, напоминающие многих живых тканей и в тиксотропной природе. Более того, они остаются локализованными на месте, в зоне инъекции.

В этой работе, PAA карбоксильные группы модифицируют с алкина фрагментом (фиг.1), и РГД-азид синтезируется эксплуатируют реакционную способность концевой группы трипептида -NH 2 с подготовленной химического соединения со структурой (CH 2) N - N 3 (<сильный> Рисунок 2). Впоследствии модифицированный ПАА реагирует с производным РГД-азида через CuAAC щелчка реакции 15-17 (рисунок 3). Использование меди (I) в качестве катализатора, приводит к значительному улучшению как скорость реакции и региоселективностью. Реакцию CuAAC широко используется в органическом синтезе и в науке о полимерах. Он сочетает в себе высокую эффективность и высокую толерантность к функциональным группам, и это не зависит от применения органических растворителей. Высокая селективность, быстрое время реакции и простая процедура очистки позволяют Получение звездообразных полимеров, блок - сополимеров или цепей прививаемых желаемых фрагментов 18. Эта стратегия щелчок позволяет модифицировать полимеры, после полимеризации, чтобы настроить физико-химические свойства в зависимости от конечного применения биохимического. Условия CuAAC экспериментальные легко воспроизводимым (реакция не чувствительна к воде, в то время как окисление меди может происходить в минимальной степени), и характерформируется триазола обеспечивает стабильность продукта. Использование металлической меди можно считать критической точкой, из-за его потенциальной токсического эффекта в отношении клеток и в биологическом микросреду, но диализ используется в качестве метода очистки, чтобы позволить полное удаление каталитических остатков. Наконец, РАА модифицированный РГД используется в синтезе гидрогеля (рисунок 4) и физико - химических свойств полученных сетей исследованы, чтобы проверить потенциальную функциональность этих систем в качестве клеток или наркотиков носителей.

figure-introduction-1
Рисунок 1: РАА модифицированный синтез алкиновой схему ПАА функционализации с алкиновой группой;. "п" означает , мономеры с карбоксильной группой взаимодействия с пропаргиламина. Пожалуйста , нажмите сюда , чтобы просмотретьувеличенная версия этой фигуры.

figure-introduction-2
Рисунок 2:.. РГД-азид синтез Синтез РГД-азид производной Пожалуйста , нажмите здесь , чтобы посмотреть увеличенную версию этой фигуры.

figure-introduction-3
Рисунок 3: Нажмите реакции Схема реакции мыши между производным РГД-азида и алкинов-РАА.. Пожалуйста , нажмите здесь , чтобы посмотреть увеличенную версию этой фигуры.

figure-introduction-4
Рисунок 4: Гидрогель Synthesis. РГД функционализированный процедура синтеза гидрогеля. Пожалуйста , нажмите здесь , чтобы посмотреть увеличенную версию этой фигуры.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

Примечание: химические вещества используются как получено. Линейный РГД куплен, но он может быть получен с помощью стандартного твердофазного пептидного синтеза Fmoc - 16,19. Растворители аналитической чистоты. Диализ требует использования мембраны с М ш отсечения равна 3500 Да. Синтезированные соединения характеризуются с помощью 1 Н ЯМР - спектров , зарегистрированных на 400 МГц - спектрометра с использованием хлороформа (CDCl 3) или оксида дейтерия (D 2 O) в качестве растворителей, и химические сдвиги указаны в & delta ; значений в частях на миллион. Кроме того, гидрогели подвергают ИК-анализа с использованием методики KBr окатышей и их физическая характеристика включает в себя исследования желатинизации оценивали с использованием инвертированного пробирки при 37 ° С.

1. Синтез 4-Azidobutanoyl Хлорид 1

  1. Растворить 500 мг 4-azidobutanoic кислоты (3,90 ммоль) в 10 мл дихлорметана и 0,5 мл диметилформамида.
  2. Охлаждают раствор при 0 ° C, С использованием ледяной бани.
  3. Добавить 505 мкл оксалилхлорида (5,85 ммоль) в 5 мл дихлорметана и медленно добавляют по каплям к реакционной системе, при перемешивании.
  4. Через 1 ч при 0 ° С, используя ледяную баню, до комнатной температуры.
  5. Растворитель удаляют при пониженном давлении с использованием роторного испарителя.
  6. Охарактеризовать полученного продукта с помощью 1 Н-ЯМР - спектроскопии, растворением образца в CDCl 3 16.

2. Синтез РГД-азида производного 2

  1. Растворите 50 мг RGD (0,145 ммоль) в 1 мл 1 М NaOH.
  2. Растворите 24 мг 1 (0,16 ммоль) в 2 мл тетрагидрофурана.
  3. Добавьте все RGD раствора к раствору 1 по каплям при 0 ° С на бане со льдом.
  4. Возврат до комнатной температуры и перемешивают в течение ночи.
  5. Добавить 1 мл 1 М HCl.
  6. Растворитель удаляют при пониженном давлении с использованием роторного испарителя.
  7. Охарактеризовать ОБТained продукт с помощью 1 Н-ЯМР - спектроскопии, растворения образца в D 2 O 16.

3. РАА алкине Модификация 3

  1. Растворить 200 мг 35% вес / вес раствора ПАА (2,8 ммоль) в 15 мл дистиллированной воды.
  2. Добавить 15,4 мг гидрохлорида пропаргиламин (0,20 ммоль).
  3. Растворить 42,8 мг гидрата 1-гидроксибензотриазола (HOBt, 0,28 ммоль) в 14 мл 1: 1 об / об ацетонитрил: дистиллированная раствор воды при нагревании до 50 ° С.
  4. Добавить все решения HOBt к РАА раствору при комнатной температуре.
  5. Добавить 53,6 мг ethyldimethylaminopropylcarbodiimide (EDC, 0,28 ммоль) к реакционной смеси.
  6. С помощью 1 М HCl, чтобы довести рН до 5,5 и перемешивают реакционную систему в течение ночи при комнатной температуре.
  7. Диализировать решение. Растворить 11,2 г хлорида натрия в 2 л дистиллированной воды, а затем добавляют 0,2 мл 37% вес / вес HCl. Диализировать раствора с использованием мембраны с М ш отсечке 3,5 кДа.
  8. Перфогт диализ в течение трех дней. Изменение диализного раствора ежедневно с 2 л свежеприготовленной дистиллированной воды, содержащей 0,2 мл 37% вес / вес HCl.
  9. Запоминани конечного раствора при температуре -80 ° С. Лиофилизации его в лиофилизации в соответствии с протоколами производителя.
  10. Охарактеризовать функционализированного полимера с помощью 1 Н-ЯМР - спектроскопии, растворением образца в D 2 O 16.

4. Синтез РАА-RGD Полимерные 4

  1. Растворите 78 мг ПАА модифицированный алкина 3 (1,083 ммоль) в 10 мл дистиллированной воды.
  2. Растворите 25 мг азида 2 RGD производного (0,0722 ммоль) в 5 мл тетрагидрофурана.
  3. Добавить все RGD раствора полимерного раствора.
  4. Добавить 2,2 мг йодида меди (0,0116 ммоль) и 2,2 мг аскорбата натрия (0,0111 ммоль).
  5. Нагревание с обратным холодильником полученной смеси в течение ночи при 60 ° С, при перемешивании.
  6. Охлаждают смесь до 25 ° С.
  7. Dialyzе решение. Растворить 11,2 г хлорида натрия в 2 л дистиллированной воды, а затем добавляют 0,2 мл 37% вес / вес HCl. Диализировать раствора с использованием мембраны с М ш отсечке 3,5 кДа.
  8. Выполните диализ в течение трех дней. Изменение диализного раствора ежедневно с 2 л свежеприготовленной дистиллированной воды, содержащей 0,2 мл 37% вес / вес HCl.
  9. Запоминани конечного раствора при температуре -80 ° С. Лиофилизации его в лиофилизации в соответствии с протоколами производителя.
  10. Охарактеризовать полученного продукта с помощью 1 Н-ЯМР - спектроскопии, растворением образца в D 2 O 16.

5. РГД-функционализированный Гидрогель Синтез

  1. Подготовьте PBS. Растворить 645 мг ФБФР соли в 50 мл дистиллированной воды.
  2. Смешать 40 мг карбомер и 10 мг функционализированного ПАА 4 в 9 мл PBS (шаг 5,1), при комнатной температуре, до полного растворения (30 мин).
  3. Добавить 400 мг ПЭГ к раствору и держать перемешивания в течение 45 мин.
  4. Остановите перемешивание и дайте системе отстояться в течение 30 мин.
  5. С помощью 1 N NaOH для доведения рН до 7,4.
  6. К 5 мл полученной смеси добавляют 25 мг порошка агарозы.
  7. не облучать система с микроволновым излучением при 500 Вт до кипения, в течение времени, обычно от 30 сек до 1 мин, и электромагнитно нагреваться до 80 ° С.
  8. Оставьте смесь подвергается до комнатной температуры, пока его температура не снизится до 50 ° С и добавляют 5 мл PBS (шаг 5,1), для того, чтобы получить раствор в соотношении 1: 1 объемной.
  9. Подготовьте 12 Multiwell пластину, содержащую стальные цилиндры с диаметром 1,1 см.
  10. Взять 500 мкл аликвоты из раствора и помещают их между стальными цилиндрами.
  11. Оставьте в покое в течение 45 мин до полного гелеобразование системы.
  12. Удалить цилиндры, используя пинцет из нержавеющей стали для получения гидрогелей.

6. Загрузка терапевтического инструмента (Наркотиков или клетки)

  1. Повторите улEPS 5,1-5,7.
  2. Когда смесь (уже в золь) достигает 37 ° С, добавляют 5 мл раствора, содержащего желаемый раствор лекарственного средства или клеточную культуру, с тем чтобы получить конечную систему при соотношении 1: 1 объемной.
  3. Повторите шаги 5.9-5.12 для получения полимерных сетей с biocompounds физически захваченными в геле.

7. Гидрогель Характеристика

  1. Анализ FT-IR
    1. После образования геля, замочить один из гидрогелей в синтезированных 2,5 мл дистиллированной воды в течение 24 ч.
    2. Удалите водную среду , где погруженные гидрогель и подвергают сублимационной сухим жидким N 2.
    3. Ламинат образец гидрогель по KBr методике гранул.
      1. Добавить шпателя полный КВг в агатовой ступке. Возьмем небольшое количество гидрогеля образца (около 0,1-2% от суммы KBr, или просто достаточно, чтобы покрыть кончик шпателя) и смешать с порошком KBr.
      2. Измельчите смесь, пока порошок не хорошо и однородным.
      3. С помощью набора гранул KBr с образованием ИК осадка. Нажмите порошок с помощью ручного лабораторного пресса: в течение 3 мин при давлении, равном давлению емкостью 5 тонн, а затем в течение 3 мин при емкости под давлением 10 тонн.
      4. Ослабить давление, чтобы получить конечный осадок в виде гомогенной и прозрачной по внешнему виду. Вставьте таблетку в держатель образца ИК и запустить спектр 16.
  2. Исследования гелеобразования
    1. Наполните 2 трубки микроцентрифужных мл с 900 мкл PBS и уравновешивания до 37 ° С.
    2. Добавьте 100 мкл приготовленного раствора полимера с образованием гидрогеля и инкубировать при 37 ° С.
    3. Переверните пробирку и наблюдать, если гель течет в 1, 2, 5, 10 и 20 мин. Регистрируют время, при котором гель не течет, как время гелеобразования.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

Производная ПАА алкиновая эффективно синтезируют из полиакриловой кислоты и пропаргиламина, как показано на рисунке 1 , где п нумерует мономеры которых карбоксильные группы взаимодействуют с амином. Идентичность продукта подтверждают с помощью 1 Н-ЯМР - спектроскопии. На рисунке 5 показан 1 H-ЯМР спектр ПАА модифицированного с тройной связью.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Модификация ПАА после полимеризации алкиновыми фрагментами и функционализация RGD с азидной группой гарантируют образование стабильной связи между полимером и пептидом. Действительно, триазол служит жесткой связующей единицей среди атомов углерода, прикрепленной к 1,4 позициям кольца 1,2,3-триазола, и он не может быть расщеплен гидролитически или иным образом. Кроме того, триазол чрезвычайно трудно окисляется и восстанавливается, в отличие от других циклических структур, таких как бензолоиды и родственные им ароматически...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов и не получали никакой оплаты за подготовку данной рукописи.

Благодарности

Авторы хотели бы поблагодарить профессора Маурицио Мази для плодотворной дискуссии и мисс Chiara Allegretti для редактирования языка. Исследование авторов поддерживается Бандо Джовани Ricercatori 2010 (Ministero делла Салюте GR-2010- 2312573).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Раствор поли(акриловой кислоты) в среднем Mw ~100,000, 35 мас.% в H2OSigma Aldrich523925CAS 9003-01-4
Poly(этиленгликоль) 2,000Sigma Aldrich84797CAS 25322-68-3
Carbomeer 974PFagron1387083
Agarose Корпорация «Инвитроген»16500-500UltraPure Agarose
RGD пептидabcamab142698
4-азидобутановая кислотаAurum PharmatechZ-2421  CAS 54447-68-6
ОксалилхлоридSigma AldrichO8801CAS 79-37-8
Пропаргиламна гидрохлорид 95%Sigma AldrichP50919CAS 15430-52-1
Йодид меди(I)Sigma Aldrich3140CAS 7681-65-4
Аскорбат натрияSigma AldrichY0000039CAS 134-03-2
Фосфатный буферный растворSigma AldrichP4417
Диализная мембранаSpectrum Laboratories, Inc.132725Диализная мембрана Spectra/POR 3  Стандартная железобетонная трубка
MWCO: 3,5 кД

Ссылки

  1. Slaughter, B. V., Khurshid, S. S., Fisher, O. Z., Khademhosseini, A., Peppas, N. A. Hydrogels in Regenerative Medicine. Adv. Mater. 21 (32-33), 3307-3329 (2009).
  2. Rossi, F., Perale, G., Papa, S., Forloni, G., Veglianese, P. Current options for drug delivery to the spinal cord. Expert Opin. Drug Deliv. 10 (3), 385-396 (2013).
  3. Huebsch, N., et al. Harnessing traction-mediated manipulation of the cell/matrix interface to control stem-cell fate. Nat. Mater. 9 (6), 518-526 (2010).
  4. Mothe, A. J., Tam, R. Y., Zahir, T., Tator, C. H., Shoichet, M. S. Repair of the injured spinal cord by transplantation of neural stem cells in a hyaluronan-based hydrogel. Biomaterials. 34 (15), 3775-3783 (2013).
  5. Khetan, S., et al. Degradation-mediated cellular traction directs stem cell fate in covalently crosslinked three-dimensional hydrogels. Nat. Mater. 12 (5), 458-465 (2013).
  6. Ashley, G. W., Henise, J., Reid, R., Santi, D. V. Hydrogel drug delivery system with predictable and tunable drug release and degradation rates. Proc. Natl. Acad. Sci. U S A. 110 (6), 2318-2323 (2013).
  7. Rossi, F., van Griensven, M. Polymer Functionalization as a Powerful Tool to Improve Scaffold Performances. Tissue Eng. Part A. 20 (15-16), 2043-2051 (2014).
  8. Gould, S. T., Darling, N. J., Anseth, K. S. Small peptide functionalized thiol-ene hydrogels as culture substrates for understanding valvular interstitial cell activation and de novo tissue deposition. Acta Biomater. 8 (9), 3201-3209 (2012).
  9. Azagarsamy, M. A., Anseth, K. S. Wavelength-Controlled Photocleavage for the Orthogonal and Sequential Release of Multiple Proteins. Angew. Chem. Int. Edit. 52 (51), 13803-13807 (2013).
  10. Larrañeta, E., et al. Microwave-Assisted Preparation of Hydrogel-Forming Microneedle Arrays for Transdermal Drug Delivery Applications. Macromol. Mater. Eng. 300 (6), 586-595 (2015).
  11. Cook, J. P., Goodall, G. W., Khutoryanskaya, O. V., Khutoryanskiy, V. V. Microwave-Assisted Hydrogel Synthesis: A New Method for Crosslinking Polymers in Aqueous Solutions. Macromol. Rapid Comm. 33 (4), 332-336 (2012).
  12. Perale, G., et al. Multiple drug delivery hydrogel system for spinal cord injury repair strategies. J. Control. Release. 159 (2), 271-280 (2012).
  13. Rossi, F., Perale, G., Storti, G., Masi, M. A Library of Tunable Agarose Carbomer-Based Hydrogels for Tissue Engineering Applications: The Role of Cross-Linkers. J. Appl. Polym. Sci. 123 (4), 2211-2221 (2012).
  14. Frith, J. E., et al. An injectable hydrogel incorporating mesenchymal precursor cells and pentosan polysulphate for intervertebral disc regeneration. Biomaterials. 34 (37), 9430-9440 (2013).
  15. Kolb, H. C., Finn, M. G., Sharpless, K. B. Click chemistry: Diverse chemical function from a few good reactions. Angew. Chem. Int. Edit. 40 (11), (2001).
  16. Sacchetti, A., Mauri, E., Sani, M., Masi, M., Rossi, F. Microwave-assisted synthesis and click chemistry as simple and efficient strategy for RGD functionalized hydrogels. Tetrahedron Lett. 55 (50), 6817-6820 (2014).
  17. Ossipov, D. A., Hilborn, J. Poly(vinyl alcohol)-based hydrogels formed by "click chemistry". Macromolecules. 39 (5), 1709-1718 (2006).
  18. Truong, V., Blakey, I., Whittaker, A. K. Hydrophilic and Amphiphilic Polyethylene Glycol-Based Hydrogels with Tunable Degradability Prepared by "Click" Chemistry. Biomacromolecules. 13 (12), 4012-4021 (2012).
  19. Hou, R. Z., et al. New synthetic route for RGD tripeptide. Prep. Biochem. Biotechnol. 36 (3), 243-252 (2006).
  20. Rossi, F., Chatzistavrou, X., Perale, G., Boccaccini, A. R. Synthesis and Degradation of Agar-Carbomer Based Hydrogels for Tissue Engineering Applications. J. Appl. Polym. Sci. 123 (1), 398-408 (2012).
  21. Mauri, E., Rossi, F., Sacchetti, A. Tunable drug delivery using chemoselective functionalization of hydrogels. Mater. Sci. Eng. C. 61, 851-857 (2016).
  22. Joaquin, A., Peppas, N. A., Zoldan, J. Hydrogel Polymer Library for Developing Induced Pluripotent Stem Cell Derived Cardiac Patches. Tissue Eng. Part A. 20, S55-S55 (2014).
  23. Rossi, F., et al. Tunable hydrogel-Nanoparticles release system for sustained combination therapies in the spinal cord. Colloids Surf. B Biointerfaces. 108, 169-177 (2013).
  24. Kolb, H. C., Sharpless, K. B. The growing impact of click chemistry on drug discovery. Drug Discov. Today. 8 (24), 1128-1137 (2003).
  25. Ossipov, D. A., Yang, X., Varghese, O., Kootala, S., Hilborn, J. Modular approach to functional hyaluronic acid hydrogels using orthogonal chemical reactions. Chem. Commun. 46 (44), 8368-8370 (2010).
  26. Anderson, S. B., Lin, C. C., Kuntzler, D. V., Anseth, K. S. The performance of human mesenchymal stem cells encapsulated in cell-degradable polymer-peptide hydrogels. Biomaterials. 32 (14), 3564-3574 (2011).
  27. Caron, I., et al. A new three dimensional biomimetic hydrogel to deliver factors secreted by human mesenchymal stem cells in spinal cord injury. Biomaterials. 75, 135-147 (2016).
  28. Lee, J. W., Kim, H., Lee, K. Y. Effect of spacer arm length between adhesion ligand and alginate hydrogel on stem cell differentiation. Carbohyd. Polym. 139, 82-89 (2016).
  29. Liu, Y., Fan, Z., Wang, Y., Yu, L. Controlled Release of Low Molecular Protein Insulin-like Growth Factor-1 through Self-Assembling Peptide Hydrogel with Biotin Sandwich Approach. J.Biomed. Eng. 32 (2), 387-392 (2015).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Теги

Синтез РГД-функционализированного гидрогелей в качестве инструмента для терапевтических применений
Свяжитесь с нами
Рекомендовать библиотеке

Конфиденциальность

Условия эксплуатации

Политика

Авторские права © 2026 MyJoVE Corporation. Все права защищены.