Абдоминальные спайки, которые образуются после операции, являются основной причиной боли, бесплодия, госпитализации и повторной операции по поводу непроходимости тонкой кишки. Наша хирургическая процедура создания брюшных спаек у мышей является надежным инструментом для изучения механизмов, лежащих в основе образования спаек.
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
Создание спаек в брюшной полости у мышей
В этой статье
Краткое содержание
Аннотация
Абдоминальные спайки состоят из фиброзной ткани, которая образуется в брюшном пространстве в ответ на воспалительное повреждение, обычно хирургическое вмешательство или внутрибрюшную инфекцию. Точные механизмы, лежащие в основе формирования адгезии, плохо изучены. Многие соединения и физические барьеры были проверены на их способность предотвращать спайки после операции с разной степенью успеха. Мышь и крыса являются важными моделями для изучения брюшных спаек. В литературе существует несколько различных методик создания спаек у мышей и крыс. Здесь мы опишем протокол с использованием истирания слепой кишки наждачной бумагой и наложением швов на правую боковую стенку брюшной полости. Мышь обезболивается, а брюшная полость подготавливается. Создается срединная лапаротомия и определяется слепая кишка. Наждачная бумага используется для аккуратной шлифовки поверхности слепой кишки. Затем в брюшину правой брюшной боковой стенки накладывается несколько швов в форме восьмерки. Брюшную полость орошают, наносят небольшое количество крахмала, а разрез закрывают. Мы обнаружили, что этот метод дает наиболее устойчивые спайки с наименьшей смертностью.
Введение
Спаек в брюшной полости являются формой рубцовой ткани, которые образуют в брюшной полости в ответ на воспаление, как правило, после операции или внутрибрюшного инфекции. Спайки являются основной причиной хронической боли в области живота и бесплодия, и являются наиболее частой причиной непроходимости тонкой кишки 1. Присутствие спаек делает выполнение второй полостной операции более трудным и увеличивает вероятность осложнений 2.
Несмотря на многолетние исследования, механизмы, лежащие образование спаек остаются плохо понятыми. Известно , что первоначальное повреждение поверхности брюшины вызывает экссудацией фибрин....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Протокол
Следующий протокол был одобрен Институциональные уходу и использованию животных комитета Стэнфордского университета (IACUC) путем и соответствует всем институциональным этических принципов в отношении использования лабораторных животных.
1. Создание спаек брюшной полости
- Запуск мыши на антибактериальной чау диеты за одну неделю до процедуры.
- Автоклав хирургических инструментов и предварительно согреть солевой раствор для орошения.
- Обезболить мышь, используя 2% вдыхаемого изофлуран.
- С помощью машинки для стрижки волос с последующим быстрым приложением (5 - 10 сек) для депиляции агента, удалить волос....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Результаты
В семь дней после операции, слепой кишки и, возможно, восходящей ободочной кишки, печени и петли тонкой кишки должен быть приверженцем правосторонней брюшной стенки. (Рисунок 8) иссекают ткань может быть вложена и секционного и даст отличные гистологические слайды. (Рисунок 11, 12)
Когда процедура выполняется должным образом, 100% мышей должны иметь существенные спаек в семь дней. Смертн.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Обсуждение
Критические шаги в этой процедуре являются: тщательно абразивной слепой кишки, не вызывая перфорацию, размещение швов в брюшной боковой стенки, и применяя нужное количество крахмала. применять наждачную бумагу только в слепую кишку, или в небольшой определенной части кишечника. Широкое использование наждачной бумаги на больших объемах тонкой кишки, как правило, вызывают значительную непроходимость. Позаботьтесь, чтобы обдирать слепая кишка с достаточной силой, что поверхность становится шероховатой, но не так много, что.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Раскрытие информации
Авторы заявляют, что у них нет конкурирующих финансовых интересов.
Благодарности
МЧР был поддержан Американской коллегии хирургов (ACS) Resident Research Scholarship. MSH была поддержана Калифорнийского института регенеративной медицины (CIRM) подготовка гранта Клинический сотрудник TG2-01159. MSH, HPL, и MTL были поддержаны Американским обществом челюстно-лицевых хирургов (ASMS) / Фонд челюстно-лицевых хирургов (MSF) Research Award Грант. HPL была поддержана грантом NIH R01 GM087609 и подарок от Ingrid Лай и Билл Шу в честь Энтони Шу. HPL и MTL были поддержаны лабораторией Hagey для детской регенеративной медицины и The Oak Foundation. MTL была поддержана Ганна / Оливье фонда.
....Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Материалы
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| Впитывающие пеленки Fisherbrand, 20" x 24" | Fisher Scientific | 14-206-62 | |
| Polylined Sterile Field, 18" x 24" | Busse Hospital Disposables | 696 | Вырежьте прямоугольное отверстие соответствующего размера |
| Isothesia isoflurane | Henry Schein | ||
| Стерильный ватный марлевый диск Fisherbrand, 4 дюйма x 4 дюйма | Fisher Scientific | 22-415-469 | |
| Офтальмологическая мазь Puralube petrolatum, тюбик 1/8 унции | Dechra Veterinary Products | NDC 17033-211-38 | |
| Крем для депиляции | Nair Church & Дуайт Ко. | 22339-05 | |
| Buprenex бупренорфин 0,3 мг/мл | Reckitt Benckiser Pharmaceuticals Inc. | NDC 12496-0757-5 | |
| Шприц инсулиновый 1 куб. см, 27 G | Becton Dickinson | 329412 | |
| Povidone Iodine Prep Solution | Medline | MDS093944H | |
| Webcol спиртовые тампоны для приготовления | Covidien | 6818 | |
| Лабароторная маркировочная лента | общего назначения VWR | 89097-912 | |
| BioGel PI хирургические перчатки | Mö lnlycke Health Care | ALA42675Z | |
| Микрощипцы с зубьями | Roboz | RS-5150 | |
| Тонкие ножницы - острые | Fine Science Tools | 14060-09 | |
| Прямые зубчатые щипцы | Fine Science Tools | 11050-10 | |
| Castro-Viejo игольчатый инструмент | Fine Science Tools | 12565-14 | |
| 100 зернистость 1/4 листа наждачной бумаги | ACE Аппаратные | 1010446 | Разрезанные на полоски |
| 4-0 шелковые шовные нити, 30", SH игла | Ethicon | K831 | |
| 7-0 PDS II рассасывающаяся монофиламентная шовная ткань, 30", BV-1 игла | Ethicon | Z135 | Обычно поставляется двуручной. Разрежьте шов на полпути, чтобы получить два пригодных для использования шва. |
| Рисовый крахмал | MP Biomedicals | 102955 | |
| 0,9% хлорида натрия Ирригация | Baxter | BHL2F7121 | теплая до 37°С; C перед использованием |
| шприц 10 мл | Becton Dickinson | 309604 | |
| 6-0 Викрил рассасывающийся плетеный шовный материал, 18", RB-1 коническая игла | Ethicon | J212H | |
| 6-0 Этилон нейлоновый монофиламент шовный материал, 18", игла P-3, | Ethicon | 1698G | |
| Tegaderm Прозрачная пленочная перевязочная рамка, 6 см x 7 см | 3M | 1624W | Разрезать пополам вдоль |
Ссылки
- Ellis, H., et al. Adhesion-related hospital readmissions after abdominal and pelvic surgery: a retrospective cohort study. Lancet. 353 (9163), 1476-1480 (1999).
- Brochhausen, C., et al. Current strategies and fut....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Перепечатки и разрешения
