Мышиных исследования в моделях воспаление толстой кишки показали, что небольшой процент (1-5%) мезенхимальных стволовых клеток (МСК) вводят внутривенно или внутрибрюшинно дома воспаление толстой кишки1,2. Это исследование показывает, что УЗИ руководствуясь внутрисердечной инъекции MSCs приведет к увеличению локализации в кишечник.
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
УЗИ руководствуясь внутрисердечной введения мезенхимальных стволовых клеток человека увеличить самонаведения для кишечника для использования в мышиных моделях экспериментальных воспалительные заболевания кишечника
В этой статье
Краткое содержание
Аннотация
Болезнь Крона (CD) является общей хроническим воспалительным заболеванием малых и толстого кишечника. Мышиных и человека мезенхимальных стволовых клеток (МСК) у иммунодепрессивных потенциал и было показано для подавления воспаления в моделях мыши кишечного воспаления, даже несмотря на то, что маршрут администрации можно ограничить их самонаведения и эффективности 1 , 3 , 4 , 5. Местное применение MSCs толстой травмы модели показали большую эффективность в улучшении воспаления в толстой кишке. Однако существует нехватка данных о методах улучшения локализации человека костный мозг производные MSCs (использования), тонкой кишки, месте воспаления в SAMP-1/YitFc (SAMP) модели экспериментальной крона. Эта работа описывает Роман технику для УЗИ руководствуясь внутрисердечной инъекций использования в SAMP мышей, хорошо изученных спонтанное модель хронического воспаления кишечного. Соответствием пола и возраста, воспаление бесплатно мышей AKR/J (AKR) были использованы в качестве контроля. Чтобы проанализировать накопление и локализации, использования были преобразованы с человека, содержащий тройной репортер. Тройной репортер состояла из Светлячок Люцифераза (fl), для биолюминесцентных изображений; мономерные красным флуоресцентный белок (mrfp), для сортировки клеток; и усеченные герпеса вирус Тимидинкиназа (ТТК), для томографии, позитронно-эмиссионная томография (ПЭТ). Результаты этого исследования показывают что 24 ч после внутрисердечной администрации, использования локализовать в тонком кишечнике SAMP мышей в отличие от воспаления бесплатно AKR мышей. Этот роман, УЗИ руководствуясь инъекций использования в левом желудочке SAMP мышей гарантирует высокий уровень успеха клеток доставки, что позволяет для быстрого восстановления мышей с минимальными заболеваемости и смертности. Этот метод может быть полезным методом для расширенной локализации MSCs в других моделях малых кишечного воспаления, такие как TNFΔRE6. Будущие исследования будет определять, если увеличение локализации использования, внутри артериальная доставка может привести к увеличению терапевтической эффективности.
Введение
Болезнь Крона (CD) является общим хроническим воспалительным заболеванием малых и толстого кишечника и считается неадекватную реакцию иммунной системы в результате кишечные микробы7,8. Недавние исследования показали, что мышиных и человека мезенхимальных стволовых клеток (МСК) может подавить воспаление в моделях мыши кишечного воспаления1,3,4,5. Есть несколько текущих клинических испытаний, которые используют для лечения пациентов с воспалительным заболеванием кишечника (IBD), котора....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Протокол
всех мышей экспериментов и процедур в рамках исследования были утверждены Западный резервный университет Кейза ' s, институциональный уход животных и использования Комитетом. Процедуры были проведены в ассоциации оценки и аккредитации лабораторных животных ухода (АААЛЖ) аккредитованных объекта. BM был придыханием под университет больницы институциональных Наблюдательный Совет утвердил протокол на объекте ядро стволовых клеток на Западный резервный университет Кейза после информированного.
1. Культура и трансдукция из костного мозга человека-производные мезенхимальных стволовых клеток (использования)
Примечан....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Результаты
Рисунок 1 показывает, что использования могут быть преобразованы с тройной репортером в высокой эффективности, сохраняя их свойств стволовых клеток. Transduced использования могут быть визуализированы в реальном времени BLI (рис. 1 c, рис. 3). Этот роман, УЗИ руководствуясь инъекций использования в левый желудочек SAMP мышей обеспечивает очень высокий уровень успеха инъекции, что позволяет для быстро.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Обсуждение
Это исследование описывает Роман технику для УЗИ руководствуясь внутрисердечной инъекций использования в малых кишечного мыши модели экспериментальной CD. Эта техника имеет очень высокий показатель выживания и успеха, как траектории игла может быть скорректирована основан на реальном времени, с высоким разрешением изображения мыши левого желудочка, предоставляемый УЗИ. Преимуществом доставки для левого желудочка является использования затем распределяются внутри arterially и обойти венозное кровообращение, таким образом .......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Раскрытие информации
Авторы не имеют ничего сообщать.
Благодарности
Maneesh Dave поддерживается грант Министерства обороны PR141774 и крона и колит фонда карьеры развития премию Америки. Лаборатория Фабио Cominelli поддерживается NIH предоставляет DK042191 (ФК), DK055812 (ФК), DK091222 (ФК) и DK07948 (ФК). Лаборатория Арнольд Caplan частично поддерживается Дэвид л и е. Вирджиния Болдуин фонд. Финансирующие учреждения имели никакой роли в анализ исследования или написания манускрипта. Его содержание отвечают исключительно авторов.
....Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Материалы
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| DMEM-LG | Gibco | 31600-091 | |
| 0,25% трипсин-ЭДТА | Gibco | 25-200-072 | |
| Протрумина сульфат | Sigma Aldrich | P4020-1G | |
| D-люциферин | Goldbio | luck-500 | |
| Фетальная бобиновая сыворотка | Gibco | 26140-079 | |
| Антибиотик-антимикотик | Gibco | 15240-062 | |
| PBS | HyClone | SH30256.01 | |
| 175 см тканевые колбы для кутлуза | Corning | 431080 | |
| 75 см тканевые колбы для кутлуза | Corning | 430720 | |
| Центрифужные пробирки | Crysalgen | 23-2265 | |
| Tissue-Plus O.C.T. компаунд | Fisher HealthCare | 4585 | |
| Cryomold Standard | Tissue-Tek | 4557 | |
| Lenti-Pac Система упаковки экспрессии ВИЧ | GeneCopoeia | HPK-LvTR-20 | |
| Повидон Ионидин тампоны | Medline | MDS093901 | |
| Крем для эпиляции | Nair | N/A | |
| Isoflurane | Piramal Helathcare | NDC 66794 013 25 | |
| Щипцы | Fine Science Tools | 11200-33 | |
| Ножницы для препарирования (Wagner) | Fine Science Tools | Wagner 14068-12 | |
| Puralube vet мазь | Puralube | NDC 17033-211-38 | |
| Aquasonic 100 гель для ультразвуковой передачи | Parker laboratories | 01 08 | |
| Чашка | Петри Fisher Scientific | FB0875711A | |
| мыши SAMP | Кливлендский центр исследований заболеваний пищеварительной системы Основной центр | ||
| AKR | Кливлендские исследования | ||
| Vevo 770 система визуализации | Visual Sonics, Торонто, Канада | ||
| Система серии IVIS Spectrum | PerkinElmer, Waltham, MA | ||
| Программное обеспечение для создания живых изображений | CaliperLifeSciences, PerkinElmer, Waltham, MA | ||
| Тройной репортер | Любезно предоставлено доктором Чжэн-Хонг Ли, CWRU, (цитата 19) |
Ссылки
- Duijvestein, M., et al. Pretreatment with interferon-gamma enhances the therapeutic activity of mesenchymal stromal cells in animal models of colitis. Stem Cells. 29 (10), 1549-1558 (2011).
- Sala, E., et al.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Перепечатки и разрешения
