Неконтролируемое кровоизлияние, являющееся важной причиной смертности среди пациентов с травмой, можно смоделировать с использованием стандартного разрыва печени в мышиной модели. Эта модель приводит к постоянной кровопотере, выживаемости и позволяет тестировать гемостатические агенты. В этой статье представлен пошаговый процесс выполнения этой ценной модели.
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
Неконтролируемый геморрагический шок, моделируемый разрывом печени у мышей с контролем гемодинамики в реальном времени
В этой статье
Краткое содержание
Аннотация
Неконтролируемое кровотечение является важной причиной предотвратимых смертей среди пациентов с травмой. Мы разработали мышиную модель неконтролируемого кровоизлияния через разрыв печени, что приводит к постоянной потере крови, гемодинамическим изменениям и выживанию.
Мышам подвергается стандартизированная резекция лево-средней доли печени. Им разрешено кровоточить без механического вмешательства. Гемостатические агенты можно вводить в качестве предварительной терапии или спасательной терапии в зависимости от интереса исследователя. Во время кровотечения проводится гемодинамический мониторинг в режиме реального времени через левую бедренную артериальную линию. Затем мышей умерщвляли, измеряли кровопотерю, собирали кровь для дальнейшего анализа, а органы собирали для анализа повреждений. Описана экспериментальная схема, позволяющая проводить одновременные испытания нескольких животных.
Геморрагия печени как модель неконтролируемого кровоизлияния существуетВ литературе, главным образом, в моделях крыс и свиней. Некоторые из этих моделей используют гемодинамический мониторинг или количественную оценку потери крови, но не имеют последовательности. Настоящая модель включает количественную оценку кровопотери, гемодинамический мониторинг в режиме реального времени в мышиной модели, которая дает преимущество использования трансгенных линий и механизма высокой пропускной способности для дальнейшего исследования патофизиологических механизмов при неконтролируемом кровотечении.
Введение
Травма является основной причиной смерти и инвалидности среди молодежи во всем мире. 1 Неконтролируемое кровоизлияние остается основной причиной смертности среди тяжело травмированных пациентов с травмой. 2 Управление пациентом с кровоточащей травмой двойное: контроль хирургического кровотечения, реанимация и замена потерянной крови.
Животные модели геморрагического шока были краеугольным камнем в исследовании травмы и могут быть использованы при оценке патофизиологии и лечения травматического / геморрагического шока. 3 , 4 Удар на ж....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Протокол
Мышей содержали в соответствии с Питтсбургским университетом (Питтсбург, Пенсильвания, США) и Национальными институтами здравоохранения (NIH, Bethesda, MD, USA) руководствами по уходу за животными в конкретных условиях без патогенов с 12-часовыми циклами светлого-темного цвета и свободным доступом к Стандартного корма и воды. Все эксперименты на животных были одобрены и проведены в соответствии с руководящими принципами, изложенными Комитетом по исследованиям и уходу за животными в Университете Питтсбурга.
1. Хирургическое поле и настройка прибора
- Перед процедурой стерилизуют все хирургические инструменты, шовный матери....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Результаты
Модель разрыва печени приводит к воспроизводимой и последовательной потере крови у мышей. Рисунок 1А демонстрирует постоянный вес рваной печени, которая может быть получена со стандартным отклонением всего 0,02 г. Эта последовательность в раздираемом весе печени позволяет воспроизводить модель между мышами и в различных экспериментальных установках, таких как различные реанимационные протоколы. Кроме того, воспроизводимый вес рваной печени со стандартной ошибкой всего 0,.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Обсуждение
Модель разрыва мышиной печени, описанная здесь, обеспечивает надежную, согласованную модель неконтролируемого кровоизлияния. Эта модель проста в исполнении, но есть важные шаги, которые требуют тщательного рассмотрения. Наиболее технически сложной частью модели является канюляция бедренных сосудов для гемодинамического мониторинга и введения жидкости / лекарств. Необходимо проявлять осторожность при вскрытии нерва и артериотомии / венотомии. Важно не касаться нерва во время вскрытия сосудов, чтобы избежать повреждения н.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Раскрытие информации
У авторов нет финансовых конкурирующих интересов.
Благодарности
Работа этой рукописи была поддержана финансированием доктору Нилу экспериментальной проектной программы Института сосудистой медицины в области гемостаза и сосудистой биологии (P3HVB) и стипендий для научных исследований AST. Эта работа поддерживается Национальными институтами здравоохранения США грантов 1 R35 GM119526-01 и UM1HL120877-01.
....Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Материалы
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| SS/45 dumonts | Fine Science Tools | 11203-25 | |
| хирургические ножницы | Fine Science Tools | 14068-12 | |
| гемостаты | Fine Science Tools | 13009-12 | |
| микроножницы | Fine Science Tools | 15000-08 | |
| 0,8 мм изогнутые щипцы | Fine Science Tools | 11009-13 | |
| катушка для швов 6-0 | Fine Science Tools | 18020-60 | |
| шовный материал 4-0 шелк с иглой | Owens Minor | K188H | |
| марля 4 x 4 | можно приобрести у любого глобального поставщика | ||
| ватный наконечник аппликатор | можно приобрести у любого глобального поставщика | ||
| игла 30 G | можно приобрести у любого глобального поставщика | ||
| игла | 23 Gможно приобрести у любого глобального поставщика | ||
| шприц 10 куб. см | можно приобрести у любого глобального поставщика | ||
| коническая трубка 50 куб. см | можно приобрести у любого глобального поставщика | ||
| шприц 1 куб. см с иглой 25G Fisher | Scientific | 14-826-88 | |
| полиэтиленовая трубка 10 футов 100 футов (PE-10) | Fisher Scientific | 14-170-12P | |
| Полиэтиленовая трубка 50 100'(PE-50) | Fisher Scientific | 14-170-12B | |
| 3-ходовой запорный кран | Fisher Scientific | NC9779127 | |
| хирургическая синяя прокладка | Fisher Scientific | 50-7105 | |
| Стерильные полевые повязки | Fisher Scientific | NC9517505 | |
| рулоны ленты 1" | Corporate Express | MMM26001 | |
| прямые боковые банки с широким горлышком | VWR | 159000-058 | |
| лоток из нержавеющей стали 8" x 11" | VWR | 62687-049 | |
| мужской-мужской замок leur замок 3-сторонний | VWR | 20068-909 | |
| стерилизационный пакет 3" x 8" | VWR | 24008 | |
| стерилизационный пакет 5" x 10" | VWR | 24010 | |
| абсорбционные треугольники | Fine Science Tools | 18105-03 | |
| 7 мм аппликатор для раневых зажимов | Fisher Scientific | E0522687 | |
| 1,000 7 мм 7 мм | Fisher Scientific | E0522687 | |
| бетадин (4 унции) | можно приобрести у любого глобального поставщика | ||
| стерильные перчатки | можно приобрести у любого глобального поставщика | ||
| eppendorfs | можно приобрести у любого глобального поставщика | ||
| 1/2 куб. см инсулиновый шприц Lo-Dose | Fisher Scientific | 12-826-79 | |
| маленькая весовая лодка | можно приобрести у любого глобального поставщика | ||
| лактатные звонари | можно приобрести у любого глобального поставщика | ||
| гепранизированный физиологический раствор (.1 & мкл л; геп + 9,9 & мкл ; NaCl) | можно приобрести у любого мирового поставщика | ||
| фосфатного буферного раствора | можно приобрести через любого мирового вендора | ||
| Пентобарбитал; | можно приобрести у любого мирового производителя | ||
| микроскоп Wild M650 со штанговой стойкой | Leica | ||
| Digi-Med BPA-400 анализатор и системный интегратор | Micro-Med | SYS-400 | |
| TXD-310 (Digi-Med Transducer) | Micro-Med | TXD-300 | |
| Компьютер | Dell | ||
| микрошариковый инструмент стерилизатор | VWR | 11156-002 | |
| Oster A5 ножницы с размером 40 лезвий | VWR | 10749-020 | |
| циркуляционная грелка 18 x 26 | Harvard | py872-5272 | |
| ректальный термометр | Kent Scientific | RET-3 |
Ссылки
- Chang, R., Cardenas, J. C., Wade, C. E., Holcomb, J. B. Advances in the understanding of trauma-induced coagulopathy. Blood. 128 (8), 1043-1049 (2016).
- Kutcher, M. E., et al. A paradigm shift in trauma resuscitation: evaluation of evolving massive transfusion practices. JAMA surgery. 148 (9), 834-840 (2013).
- Tsukamoto,....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Перепечатки и разрешения
