Здесь мы обучаем мыши на задачу ассоциативные обучения для тестирования запах дискриминации. Этот протокол также позволяет для исследований по вопросам обучения индуцированная структурные изменения в головном мозге.
Method Article
* These authors contributed equally
Здесь мы обучаем мыши на задачу ассоциативные обучения для тестирования запах дискриминации. Этот протокол также позволяет для исследований по вопросам обучения индуцированная структурные изменения в головном мозге.
Обоняние является преобладающим сенсорные модальности в мышах и влияет на многие важные поведения, включая нагула, обнаружения хищника, спаривания и воспитания. Важно отметить, что мыши могут быть обучены связать Роман запах с конкретных поведенческих реакций, чтобы обеспечить проницательность в функцию обоняния цепи. Этот протокол подробно процедура подготовки мышей на Go / оперантной обучения задачу. В этом подходе мышей обучаются на сотни автоматизированных процессов ежедневно для 2 – 4 недели и затем могут быть проверены на роман Go / запаха пар для оценки обонятельных дискриминации, или использоваться для исследований как запах обучения изменяет структуру или функцию обоняния цепи. Кроме того мышь обонятельные луковицы (OB) есть Продолжающаяся интеграция взрослого родился нейронов. Интересно, что обонятельные обучения увеличивает выживание и синаптических связей этих нейронов, взрослого родился. Таким образом этот протокол может сочетаться с другими биохимическими, электрофизиологических и изображений методами учиться обучения и деятельности зависимых факторов, которые посредником выживаемость нейронов и пластичности.
Мышь Обь, где запах информации впервые входит центральной нервной системы (ЦНС), обеспечивает отличную модель для изучения опыта-зависимых от структурных изменений. OB-амперный постоянно интегрирует взрослого родился нейронов образом зависящих от деятельности. Взрослый родился нейрон прекурсоров разделить покинуть из прародителей, которые выстилают субвентрикулярной зоны, прилегающей к боковых желудочков1. После переноса в Обь, эти нейронные прекурсоров выжить, дифференцировать и интегрировать как тормозной блок ячеек или проходят apoptosis2. Выбор для ячейки судьба зависит от обонятельных деятельности, включая обонятельных обучения3,4,5,6. После интеграции обучения индуцированная синаптических изменения происходят в клетках гранул в течение двух недель критического периода7,8. Таким образом анализы для обоняния обучения являются полезными для изучения как опыт зависимых пластичности влияния структурных и функциональных реорганизации цепи зрелых мозга.
Этот протокол предлагает один из подходов к обонятельной обучения с использованием парадигмы оперантного кондиционирования. В этой задаче лишен воды мышей обучаются связать один запах («Go» запах) с наградой воды и другой запах («Закрытых» запах) с ожидания судебного наказания. Мышей прогресс через серию градуированных подготовки фаз в течение 2-4 недель. После завершения подготовки мышей реагировать на ходу или бесполезное запах с дискретной, соответствующего поведения (ищу награду воды на ходу испытаний и не ищет воды награду на запретную испытаний) (рис. 1A). После обучения, мышей может оспариваться далее с химически аналогичные запах пар для тестирования дискриминации или стать transitioned к изучает расследования как обонятельных обучения изменяет структуру или функцию Оби. Хотя запах дискриминации задачи описали ранее, наиболее полагаться на субъективные измерений, таких как количество нюхает между двумя отдушки9,10. Кроме того потребность человека забил такие задачи также требует больших затрат времени. Go / обонятельных обучения задачи, описанные в настоящем Протоколе предлагает беспристрастной, прямое измерение запах дискриминации и обонятельные обучения.
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
Все мыши были использованы под протоколом, утвержденным Baylor колледж медицины институциональных животных ухода и использования Комитетом в соответствии со стандартами NIH. Мышей, используемые в настоящем протоколе были все взрослых мышей (> 6 недель возраста) на C57BL6/j фон и включали как мужчин, так и женские мышей. После подготовки/постановка задачи мышей возвращаются в свои дома клетке.
1. Строительство и общие правила для использования оперантного обучения Box (Рисунок 1B, C)
2. мыши подготовка: 1 – 3 дня
3. инструкции для всех этапов
4. Подготовка 1 этап: Связывание воды вознаграждение с совать нос центр, 1-3 дня
5. обучение этап 2: Связывание в сторону порта воды награду с центр Порт совать нос, 1 – 5 дней
6. обучение этап 3: Связывание воды вознаграждение со специфическим запахом и в течение определенного времени окна, 1-3 дня
7. этап 4A: ассоциировать запах бесполезное (S-) и ожидания наказания, 1 – 2 дня
8. этап 4B: сопоставление запах бесполезное (S-) и время ожидания наказания, 5 – 11 дней
9. Go/анализа задачи: 1 день, 20 мин на мышь в день
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
После мышей научились обонятельные обучения задачи, они могут теперь связать Роман запах пар с награду и наказание. Эти обученные мыши обычно начинаются с около 50% точность на Go / задача. Процент правильных можно изобразить на испытательный блок как кривой обучения для Роман запах пар (рисA). В пределах 10 испытаний блока, которые принимают большинство мышей менее чем за 30 минут для выполнения, мышей способны правильно различать запахи с б...
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
Грызун обонятельной системы обеспечивает уникальную модель для изучения сенсорных зависимых пластичности. Здесь мы представляем обонятельных обучения парадигмы обучить мышей, чтобы связать одоранта пар с награду или наказание. Посредством этой задачи обучения ниже по течению цепи изменения могут быть изучены в последующих экспериментах (электрофизиологии, в естественных условиях нейрональных изображений, и т.д.). После завершения будет учиться мышей для выполнения простой запах снабженные задачи для свя...
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
Авторы заявляют, что без конфликта интересов и не конкурирующие интересы.
Этот протокол приспособлен от предыдущей работы в нашей лаборатории (Хуан и др. 8). все методы, описанные здесь были одобрены животное уход и использование Комитета (ACUC) колледж Бейлор. Она поддерживается Макнэйр медицинский институт, Грант R01NS078294 NINDS для B.R.A., низ IDDRC Грант U54HD083092, NIDDK Грант F30DK112571 СПМ и Грант F31NS092435 NINDS в CKM.
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
|---|---|---|---|
| Стеклянный флакон | Qorpak | GLC-01016 | |
| Силиконовая трубка | Thermo Scientific | 86000030 | |
| иглы 18 калибра | BD | 305196 | |
| 1-бутанол | Sigma Aldrich | 437603 | |
| пропионовая кислота | Sigma Aldrich | 402907 | |
| мышиной камерой | Med Associates | ENV-307W | |
| Пол камеры | Med Associates | ENV-307W-GFW | |
| Порт для воды | Med Associates | ENV-313W | Требуется два |
| стимула запаха | Med Associates | ENV-275 | Содержит 2 клапана для подачи запаха |
| Odor Port | Med Associates | ENV-375W-NPP | |
| USB Интерфейс | Med Associates | DIG-703A-USB | |
| Настольный компьютер с Windows 2000, XP, Vista или 7 | |||
| Расходомер | VWR | 97004-952 | |
| Поведенческое программное обеспечение | Med Associates | SOF-735 | Это программное обеспечение, которое запускает каждый этап обучения, теперь заменено на Программное обеспечение для |
| передачи данных | Med-PC V Med Associates | SOF-731 | Это программное обеспечение форматирует данные в |
| программное обеспечение для обучения | Excel Med Associates | DIG-703A-USB | Это программное обеспечение используется для программирования каждого этапа обучения |
| Водяной клапан | Neptune Research | 225P012-11 | Этот клапан используется для затвора подачи воды. Нужен два |
| клапана для запаха | Neptune Research | 360P012-42 | Этот клапан используется для перекрытия подачи запаха. Нужно два |
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article
Request Permission