Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Один анастомоза желудочного шунтирования (OAGB) у крыс

10.8K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/58776

⸱

10 ноября 2018 г.

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Institut national de la santé et de la recherche médicale (Inserm) unité mixte de recherche (UMR) 1149, Unité de formation et de recherche (UFR) de Médecine Paris Diderot, Universit é Paris Diderot, Assistance Publique-Hôpitaux de Paris (AP-HP), 2Department of digestive Surgery, AP-HP Hôpital Européen Georges Pompidou, 3Department of General and Visceral Surgery, Bichat-Claude Bernard University Hospital

В этой статье

Краткое содержание

Этот протокол предназначен для выполнения одно анастомоза желудочного шунтирования (OAGB) на крыс. Оператор выполняет длинный и трубчатых stapled желудка мешочек, следуют ручной сшиты анастомоза. Для этой модели оператор воспроизводит же соотношение между Билио и общего здоровья людей; Таким образом конечности Билио меры 35 см.

Аннотация

Цель настоящего Протокола заключается в создать модель доклинических бариатрической хирургии и, более конкретно, OAGB ожирением крыс. На основании этой модели доклинические, продольных исследований может осуществляться для обеспечения более глубокого понимания механизмов, лежащих в основе результатов после бариатрической хирургии в организме человека. Для этой цели крысы эксплуатируются на через лапаротомия под общим наркозом с изофлюрановая. Во-первых, хирург создаёт длинные и трубчатых желудка мешочек: после более кривой и hiatal рассечение, nonglandular желудка сшитых и удалены. Затем оставшиеся желудка также сшиваются с целью создания желудка трубки и исключить антрального желудка. После этого хирург выполняет один конец в бок gastrojejunostomy 35 см от угла duodenojejunal. Эта длина конечностей была выбрана для того, чтобы воспроизвести же соотношение между Билио конечностей (BPL) и общей длины конечностей (CL) как человека бариатрической хирургии. Операция заканчивается апоневротический и кожный закрытия. Раннего послеоперационного управления состоит из подкожных гидратации, внутримышечной инъекции профилактической антибиотикотерапии, теменной инъекций xylocaine, администрация обезболивающие и прогрессивного реинтродукции диеты.

Введение

Morbid тучность является серьезной медицинской проблемой в западном мире, с увеличением распространенности1. Бариатрическая хирургия остается единственным долгосрочным эффективной терапии для болезненного ожирения2, с явные преимущества на сопутствующих заболеваний, связанных с ожирением3. Ру ан Y желудка обойти (RYGB) остается золотой стандарт как это один из старейших процедур и один из наиболее выполнены во всем мире с длинной последующих4. OAGB — более поздние процедура впервые описана в 2001 году Рутледж5. Он был описан как эффективной альтернативы RYGB6 и имеет ряд преимуществ. Ранние данные свидетельствуют аналогичные эффективности с RYGB потеря веса и решение сопутствующих заболеваний, связанных с ожирением6,7. Кроме того избежать рисков стеноз или утечки jejunojejunal анастомоза в RYGB, и риск внутренней грыжи может быть ниже, чем с RYGB8.

Физиологические механизмы основные потери веса после бариатрической хирургии остаются спорными и может быть трудно изучать в людей9. Животные модели полезны понять как бариатрической хирургии может повлиять на метаболизм глюкозы, нейроэндокринные изменения или механизмов сытости. Сравнительные данные между процедурами отсутствуют и долгосрочные последствия этих операций должны быть лучше понимать10. Это не возможно полностью стандартизировать пред- и послеоперационном периоде клинический уход, и удовлетворительных решений может быть сложно достичь: некоторые исследования доклад потери к следуют вверх цены до 30% за первый год11.

Концепция желудочного шунтирования является сочетание ограничительные процедуры, за счет создания Желудочный сумке и умеренной степени малабсорбции, в результате исключения двенадцатиперстную кишку и проксимальной тощей кишки из желудочно-кишечного транзита. В настоящее время длина конечностей в бариатрической хирургии по-прежнему вызывает дебаты12,13. Имеющиеся данные показывают, что высокая изменчивость процедур и не консенсус пока еще не достигнуто на длину оптимального конечности OAGB14,15. Тем не менее многие авторы сообщили длиной 200 см BPL как стандарт для OAGB16,17,18. Средняя длина тонкой кишки составляет около 700 см19.

Несколько моделей грызунов RYGB были разработаны во всем мире20, с большие различия с точки зрения мешочек размера, длины конечностей и сохранение блуждающего нерва. Но очень немногие авторы сообщили модель экспериментальной OAGB; по этой причине theresearch команда разработала модель OAGB в сотрудничестве с бариатрических хирургов. Обоснование разработки модели заключается в том, чтобы имитировать желудочного шунтирования, практикуется в организме человека. Модель включает в себя строительство желудка мешочек с исключением антрального и тела желудка. Для него хирург делает абляция nonglandular желудка с использованием сшивание устройства. По сравнению с предыдущей протокол20, команда решила добавить-оперативная профилактического лечения антибиотиками в целях уменьшения заболеваемости связано с желудочно-кишечного анастомоза, как рутина в человека хирургии21.

Крыса длины конечностей, используется в этой модели был выбран, чтобы воспроизвести соотношение между BPL и CL в организме человека. Предварительные измерения показали Длина общая тонкого кишечника крыс между 90 и 120 см22. Следовательно длина BPL, выбрали для OAGB был 35 см. Кроме того эта модель практически без делать любой сосудистой перевязки, избегая Желудочный сумке ишемии.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

Использование всех животных соответствовал руководящим принципам Европейского сообщества и был одобрен местной Этический Комитет (Comité d' этики en исследования animale N ° 121) и Министерство высшего образования и исследований (Ref #02285.03).

1. Животные и диеты

  1. Крысы
    1. Использование самцов крыс Wistar весом 260-320 g, высоким содержанием жиров диеты (HFD) началась в возрасте 7 недель.
  2. Диета
    1. Побудить диета индуцированной ожирения, с по крайней мере 12 недель предоперационной HFD. Дать крысы свободный доступ к воде и HFD.
      Примечание: HFD состоит из очищенного Лаборатория продажи грызунов диеты, содержащей 45% жира (см. Таблицу материалы).
    2. Убедитесь, что крысы ожирением во время хирургии, с весом от 600-800 г.

2. материал

  1. Хирургическое оборудование
    1. Автоклав всех хирургических инструментов до операции.
    2. Выложить все хирургические инструменты, необходимые для процедуры (см. Таблицу материалы).
    3. Выполните анастомоза под увеличительные стекла, с использованием обычных и микрохирургических инструментов.
    4. Убедитесь, что крысы расположены на потепление пластине при температуре 37 ° C и под тепла лампы. Положение изотермический электрические Совет, при необходимости.
  2. Подготовка анестезии и животных
    1. Анестезировать Крыса с вдыханием изофлюрановая vol 3% в воздухе для индукции анестезии в поле грызунов.
    2. Передача крыса потепления тарелку и поддержания анестезии с маску одинаковой скоростью потока 3%. Убедитесь, что анестезии является полным путем сжимать хвост животного.
    3. Брить передней меха, соответствующий лапаротомия разрез зоны, ~ 3 см-широкий зоны от мечевидного животных таза, с использованием электрической бритвой.
    4. Бриться 3 см всей зоны на спине животного, сосредоточены на шею животного. Этот шаг облегчает монополярной питания проводимости.
    5. Спрей на основе спирта дезинфицирующим раствором на сайте операции.

3. хирургия

  1. Лапаротомия
    1. Применить на спиртовой основе местным антисептиком на бритой кожи.
    2. Откройте живота с срединной Кожный разрез от мечевидного отростка около 3 см в длину с помощью скальпеля. Откройте фасции и брюшины вдоль linea alba с монополярной скальпелем.
    3. Убедитесь, что брюшной полости открыт по всей длине Кожный разрез.
      Разоблачить брюшной полости с самостоятельной втягивающего устройства.
  2. Более кривой и hiatal рассечение
    1. Вскрыть кривой больше желудка от развязки между железистой и nonglandular живот к левой стороне брюшной пищевода с Ножницы хирургические.
    2. Постепенно свертываться gastrosplenic судов с монополярной скальпель, для того, чтобы полностью освободить большой желудка кривой его угол. Затем подвергайте hiatal области путем разрезания тонкой связок.
    3. Вскрыть в правой части брюшной пищевода, сохраняя левой желудочной артерии и блуждающего нерва, используя ручной диссектор.
  3. Желудочный сумке конфекционную
    1. Nonglandular желудка абляция
      1. Применить штапель 35 мм пистолет (см. Таблицу материалы) на стыке между железистой и nonglandular живот к левой стороне перекрестка гастроэзофагеальная. Убедитесь, что nonglandular желудок находится на правой стороне степлер.
      2. Огонь ружье, а затем удалить nonglandular резекции желудка.
    2. Желудочный сумке
      1. Применить второй степлер, используя устройство тораколюмбальный абдоминальная (TA) (3-3,5 мм) (см. Таблицу материалы), параллельно с первым сшивание, на правой стороне перекрестка гастроэзофагеальная исключить антрального и часть тела желудка.
      2. Убедитесь, что в результате двух основных линий Желудочный сумке около 0,5 см в ширину.
  4. OAGB
    1. Тонкой кишки измерение
      1. Найдите угол duodenojejunal. Проксимальный тощей кишки является часть тонкого кишечника, расположенный под медиальной части толстой кишки; Это не только для мобильных устройств часть тонкого кишечника крыс.
      2. С 5 см длинные ленты вручную Измерьте 35 см от угла duodenojejunal. Затем выполните punctiform enterotomy на antimesenteric стороне тощей кишки.
    2. Анастомоз Gastrojejunal
      1. Выполните punctiform gastrotomy с монополярной скальпель на большей стороне кривой Желудочный сумке, точно между двух предыдущих основных линий. Если Желудочный сумке не полностью пустой, выполнить мягкий ручной давление на Желудочный сумке очистить его.
      2. Выполните gastrojejunal конец в бок анастомоза с нетравматических щипцы и небольшой иглодержателя.
      3. Запустите шовный материал с двумя стежками конечности 7-0 изотактические полипропилена (см. Таблицу материалы), сшивания двух конечностей gastrotomy с конечностей enterotomy.
      4. Затем с же потоки, используемые для двух конечности швы, выполняют два запущенных швы на каждой стороне анастомоза. В случае необходимости, верните анастомоза для облегчения маневр. Обеспечить качество анастомоза, поместив тесном стежки, по крайней мере семь или восемь на каждой стороне анастомоза.
      5. Возьмите 1 мм в ширину serosa в каждой строчки. Избегайте брать любой слизистой в стежка для того, чтобы осторожно похоронить кишечных и желудочных слизистой внутри шва.
        Примечание: В результате этого является terminolateral gastrojejunal анастомоза с Билио конечности на левой стороне и желудочно-кишечного /CL (AL) справа. Убедитесь, что анастомоза проницаема с нежным давлением на Желудочный сумке.
  5. Закрытие и немедленного ухода
    1. Промойте брюшной полости с 0,9% раствор NaCl и вручную заменить органов брюшной полости в их физиологических позициях.
    2. Закрыть брюшной стенки с одной работающей шов Плетеный полиэстер швом 2-0 (см. Таблицу материалы) с классической иглодержателя.
    3. Закройте кожи с одним швом работает полиглактин 910 4-0 (см. Таблицу материалы).
    4. Выполняют два париетальной инъекции лидокаина 1% на каждой стороне лапаротомии. Администрирование общей дозы 1 мл/кг 1% лидокаина в апоневроз брюшной мышцы влагалища прямой мышцы живота.

4. послеоперационный уход

  1. Выполните внутримышечной инъекции 20 000 единиц/кг пенициллина G.
  2. Выполните подкожного введения 10 мл polyionic изотонический раствор калия (2 г KCl/Л, 4 g NaCl/л и 50 г глюкозы/л). В этот раствор для инъекций можно смешивать с подходящим анальгетики, такие как бупренорфин (0,1 мг/кг) и мелоксикам (2 мг/кг).
  3. Место крыс в отдельных клетках, разогревается с помощью лампы до тех пор, пока они полностью проснуться.
  4. Часто проверяйте животных для того, чтобы администрировать послеоперационного лечения с подходящим анальгезию и гидратации (polyionic изотонический раствор).
  5. Придать подходит анальгетик, бупренорфин (0,1 мг/кг) и мелоксикам (2 мг/кг), подкожно от немедленного послеоперационного периода до 4-й день, каждые 12 ч.
  6. Держите крыс с свободный доступ к воде в течение 1 дня. День 2/3, дать им свободный доступ к жидкой диете. День 4 дать им Ад Либитум доступ к нормальной диете.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

Этот протокол является воспроизводимость и имитирует OAGB, как практикуется на людей. Безопасность этот протокол поддерживается с опубликованных данных23,24 с низкой смертности между 12 и 25%. Различные хирургов в исследовательской группы с аналогичными смертности практикуют этот протокол.

Тем не менее обучение грызунов хирургии является сложным, и использование увеличит...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Этот протокол имеет преимущество подражая OAGB регулярно практикуется в организме человека. Его безопасность и воспроизводимость в крыс были продемонстрированы в результаты клинических и метаболизма.

Анастомоза в этот протокол создает технические трудности и является основным важным шагом. Для этого необходимо использовать конкретные микрохирургические инструменты, такие как микрохирургии иглодержатель или увеличительные стекла. Для того чтобы реализовать герметичные анастомоза без каких-либо ...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Авторы не имеют ничего сообщать.

Благодарности

Авторы хотели бы поблагодарить Жан Пьер Marmuse за его постоянную помощь и поддержку; Eglantine Voitellier, Жан-Батист балка и Houneyda-Эль-Джинди для создания моделей и иллюстрации; Анна-Шарлотта Jarry и Andreia Гонсалвес за их помощь с видео; Сара J. Заат для редактирования текста на английском языке. А. Зиберт Matthieu и Лара Рибейро-Паренти были получателей спонсорство от Фонд залить Ла изысканных сообщала (FRM) и ассоциации française de общества (АФК).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Диета с высоким содержанием жиров, 45 % жиров Genestil, Руайокур, ФранцияC 1090-45http://www.genestil.com/
Metzenbaum ScissorsWorld Precision instrument, Сарасота, США501739https://www.wpi-europe.com
Dumont TweezersWorld Precision instrument, Сарасота, США14098https://www.wpi-europe.com
Iris PincepsWorld Precision, Сарасота, США15915https://www.wpi-europe.com
Iris Scissors 10 смWorld Precision instrument, Сарасота, US14218
https://www.wpi-europe.com ИглодержательWorld Precision Instrument, Сарасота, US14110https://www.wpi-europe.com
Alm Self Retention RetractorWorld Precision instrument, Сарасота, US14240https://www.wpi-europe.com
Детский микстер Гемостатические щипцы,  Прямоугольныйинструмент World Precision, Сарасота, США501240https://www.wpi-europe.com
Нетканые стерильные тампоныLCH Medical Products, Париж, ФранцияSN40-0755www.lch-medical.com
Галилеева бинокулярная лупа 2,5xWorld Precision инструмент, Сарасота, США504056 https://www.wpi-europe.com
Пищеварительная нить: Изотактический полипропилен, монофил пролен 7-0& НБСП;Ethicon, Issy les  Мулино, ФранцияEH7813Ewww.ethicon.com
Теменная нить: Плетеный полиэстер с покрытием Ti-Cron 2-0Covidien, Mannsfield, MA, США3003-52www.covidien.com
Кожная нить: Полиглактин, VICRYL RAPIDE 4-0 Ethicon, Issy les  Moulineaux, FranceVR3100www.ethicon.com
ETS-Flex 35-мм степлерEthicon, Issy les  Moulineaux, FranceATS45www.ethicon.com
Быстрозарядные степлерыEthicon, Issy les  Мулино, ФранцияXR30Vwww.ethicon.com
TA-DST 30мм-3.5ммEthicon, Issy les  Moulineaux, FranceTX30Bwww.ethicon.com
алкоголь 5% BetadineMEDA Pharma, Merignac, France41085
www.medapharma.fr LIDOCAINE AGUETTANT 20 мг/млLABORATOIRE AGUETTANT, Lyon, France3400940000000.0
https://www.aguettant.fr Penicillin G 5MUIPanpharma, Luitre, France3.40E+12https://www.panpharma.eu/fr
Бионолит G5 ; Хлорид натрия 0,4%, глюкоза 5%, хлорид калия 0,2%)Baxter, Maurepas, Франция
Liquid DietGenestil, Royaucourt, FranceC-0200Thttp://www.genestil.com/
Изофлуран 100%Centravet, Plancoet, FranceISO007http://cooperative.centravet.net

Ссылки

  1. Ogden, C. L., et al. Prevalence of overweight and obesity in the United States, 1999-2004. Journal of American Medical Association. 295, 1549-1555 (2006).
  2. Buchwald, H. Consensus Conference Panel. Consensus conference statement bariatric surgery for morbid obesity: health implications for patients, health professionals, and third-party payers. Surgery for Obesity and Related Disease. 1, 371-381 (2005).
  3. Mingrone, G., et al. Bariatric-metabolic surgery versus conventional medical treatment in obese patients with type 2 diabetes: 5 year follow-up of an open-label, single-centre, randomised controlled trial. Lancet. 386, 964-973 (2015).
  4. Nguyen, N. T., Varela, J. E. Bariatric surgery for obesity and metabolic disorders: state of the art. Nature Reviews. Gastroenterology & Hepatology. 14, 160-169 (2017).
  5. Rutledge, R. The mini-gastric bypass: experience with the first 1,274 cases. Obesity Surgery. 11, 276-280 (2001).
  6. Lee, W. J., et al. Laparoscopic Roux-en-Y vs. mini-gastric bypass for the treatment of morbid obesity: a 10-year experience. Obesity Surgery. 22, 1827-1834 (2012).
  7. Victorzon, M. Single-anastomosis gastric bypass: better, faster, and safer? Scandinavia Journal of Surgery. 104, 48-53 (2015).
  8. Magouliotis, D. E., Tasiopoulou, V. S., Tzovaras, G. One anastomosis gastric bypass versus Roux-en-Y gastric bypass for morbid obesity: a meta-analysis. Clinical Obesity. 8, 159-169 (2018).
  9. Seyfried, F., le Roux, C. W., Bueter, M. Lessons learned from gastric bypass operations in rats. Obesity Facts. 4 Suppl 1, 3-12 (2011).
  10. Wang, F. G., Yu, Z. P., Yan, W. M., Yan, M., Song, M. M. Comparison of safety and effectiveness between laparoscopic mini-gastric bypass and laparoscopic sleeve gastrectomy: A meta-analysis and systematic review. Medicine (Baltimore). 96, e8924(2017).
  11. Hong, J., Park, S., Menzo, E. L., Rosenthal, R. Midterm outcomes of laparoscopic sleeve gastrectomy as a stand-alone procedure in super-obese patients. Surgery for Obesity and Related Disease. 14 (3), 297-303 (2017).
  12. Abellan, I., et al. The influence of the percentage of the common limb in weight loss and nutritional alterations after laparoscopic gastric bypass. Surgery for Obesity Related Disease. 10, 829-833 (2014).
  13. Nora, M., Morais, T., Almeida, R., Guimarães, M., Monteiro, M. P. Should Roux-en-Y gastric bypass biliopancreatic limb length be tailored to achieve improved diabetes outcomes? Medicine (Baltimore). 96, e8859(2017).
  14. Madan, A. K., Harper, J. L., Tichansky, D. S. Techniques of laparoscopic gastric bypass: on-line survey of American Society for Bariatric Surgery practicing surgeons. Surgery for Obesity and Related Disease. 4, 166-173 (2008).
  15. Himpens, J. M., Vilallonga, R., Cadière, G. B., Leman, G. Metabolic consequences of the incorporation of a Roux limb in an omega loop (mini) gastric bypass: evaluation by a glucose tolerance test at mid-term follow-up. Surgical Endoscopy. 30, 2935-2945 (2016).
  16. Parmar, C. D., et al. Mini Gastric Bypass: first report of 125 consecutive cases from United Kingdom. Clinical Obesity. 6, 61-67 (2016).
  17. Chevallier, J. M., et al. One thousand single anastomosis (omega loop) gastric bypasses to treat morbid obesity in a 7-year period: outcomes show few complications and good efficacy. Obesity Surgery. 25, 951-958 (2015).
  18. Kular, K. S., Manchanda, N., Rutledge, R. A 6-year experience with 1,054 mini-gastric bypasses-first study from Indian subcontinent. Obesity Surgery. 24, 1430-1435 (2014).
  19. Tacchino, R. M. Bowel length: measurement, predictors, and impact on bariatric and metabolic surgery. Surgery for Obesity Related Disease. 11, 328-334 (2015).
  20. Bruinsma, B. G., Uygun, K., Yarmush, M. L., Saeidi, N. Surgical models of Roux-en-Y gastric bypass surgery and sleeve gastrectomy in rats and mice. Nature Protocols. 10, 495-507 (2015).
  21. Jeppsson, B., Mangell, P., Thorlacius, H. Use of probiotics as prophylaxis for postoperative infections. Nutrients. 3, 604-612 (2011).
  22. Cavin, J. B., et al. Differences in Alimentary Glucose Absorption and Intestinal Disposal of Blood Glucose After Roux-en-Y Gastric Bypass vs Sleeve Gastrectomy. Gastroenterology. 150, 454-464 (2016).
  23. Bruzzi, M., et al. Long-Term Evaluation of Biliary Reflux After Experimental One-Anastomosis Gastric Bypass in Rats. Obesity Surgery. 27, 1119-1122 (2017).
  24. Cavin, J. B., et al. Malabsorption and intestinal adaptation after one anastomosis gastric bypass compared with Roux-en-Y gastric bypass in rats. American Journal of Physiology-Gastrointestinal and Liver Physiology. 311, G492-G500 (2016).
  25. Jacob, P. S., et al. Isocaloric intake of a high-fat diet promotes insulin resistance and inflammation in Wistar rats. Cell Biochemistry and Function. 31, 244-253 (2013).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Теги

Модель OAGB на крысахпротокол бариатрической операциисоздание желудочного резервуараметод гастроеюностомиибилиопанкреатическая петлядлина общей петливысокожировая диетакрысы линии Wistarприменение хирургического степлера
Один анастомоза желудочного шунтирования (OAGB) у крыс
Связаться с нами
Порекомендовать библиотеке

Конфиденциальность

Условия использования

Политики

© 2026 MyJoVE Corporation. Все права защищены.