Методическая статья

Индуцирование априкового пародонтита у мышей

DOI:

10.3791/59521

⸱

6 августа 2019 г.

 ,  ,  , 
1Institute of Dental Sciences, Faculty of Dental Medicine, Hebrew University of Jerusalem, 2Department of Endodontics, Hadassah Ein Kerem Medical Center

* These authors contributed equally

В этой статье

Краткое содержание

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Здесь мы представляем протокол локально индуцировать актикпаронтит у мышей. Мы показываем, как просверлить отверстие в зубе мыши и разоблачить его пульпу, чтобы вызвать местное воспаление. Также демонстрируются методы анализа для исследования характера этого воспаления, такие как микроКТ и гистология.

Аннотация

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Механизмы, участвующие в локальном индуцированном воспалении, могут быть изучены с помощью нескольких доступных моделей животных. Одним из них является индукция априкового пародонтита (AP). Апригальный пародонтит является распространенной патологией воспалительного характера в пародонтальных тканях, окружающих корень зуба. Для того, чтобы лучше понять природу и механизм этой патологии, выгодно проводить процедуру у мышей. Индукция этого одонтогенного воспаления достигается путем бурения в зуб мыши, пока зубной пульпы подвергается. Далее, пульпа зуба остается загрязненной естественной флоры полости рта с течением времени, вызывая акический пародонтит. По истечении этого периода животное приносится в жертву, а зуб и челюстную кость можно анализировать различными способами. Типичные анализы включают микро-КТ изображения (для оценки костной резорбции), гистологическое окрашивание, иммуногистохимия, и экспрессия РНК. Этот протокол полезен для исследований в области устной биологии, чтобы лучше понять этот воспалительный процесс в экспериментальной обстановке in vivo с однородными условиями. Процедура требует тщательного обращения с мышами и изолированной челюстью, а визуальная демонстрация техники полезна. Продемонстрированы все технические аспекты процедур, приводящих к индуцированному акциклонантиту и его характеристике в модели мыши.

Введение

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Цель этого метода состоит в том, чтобы вызвать актикальный пародонтит у мыши, загрязняя вершину с естественной микрофлорой, а затем изучить различные характеристики этого патологического процесса.

Апригальный пародонтит (АП) является распространенной патологией воспалительного характера в пародонтальных тканях, окружающих корень зуба. Это стоматологическое заболевание может вызвать сильную боль и должны рассматриваться стоматологом. Варианты лечения включают лечение корневого канала (первичное или вторичное), эндодонтическую хирургию, удаление зуба или последующее наблюдение в зависимости от клинических и радиографических результатов, а так....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Все методы, описанные здесь, были одобрены Институциональным комитетом по уходу за животными и использованию (IACUC) Еврейского университета (Этика нет. MD-17-15093-5).

1. Анестезия и позиционирование животных

  1. Подготовьте стерильные растворы, описанные ниже.
    1. Приготовьте 5 мл 7 мг/мл кетамина и 0,09 мг/мл медетомидина, разбавленного в фосфатном буферном растворе (PBS)/Saline.
    2. Приготовьте стерильный раствор атипамезола (0,4 мг/мл), разбавленного PBS/Saline (рекомендуется для приготовления количества 5 мл).
    3. Приготовьте стерильный раствор мепивакаин (7,5 мг/мл), разбавленный PBS/Saline для местной анестез....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Диаграмма потока экспериментальных шагов представлена на рисунке 1. Как указано в протоколе, мыши обезвреживаются, и их первый мандибулярный моляр с одной стороны просверливается до облучения целлюлозы, в то время как контралатеральный зуб остается в качестве контроля. Далее зубы остаются загрязненными флорой полости рта в течение 42 дней, в течение которых они контролируются и получают обезболивающее. После 42 дней, мышей усыпножают, и зубы и смежные челюсти.......

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Здесь вводится метод индукции априкового пародонтита у мышей. Целью метода является использование акическом пародонтита для изучения механизмов и последствий этого воспалительного процесса. Апригальный пародонтит был индуцирован у 6-8 недельных мышей, возраст, в котором корни полностью развиты24. Для того, чтобы вызвать акический пародонтит в этой модели, зубная мякоть мыши mandibular моляров подвергается с помощью зуба заусенцы. Бактерии из пероральной флоры мышей (в условиях SPF) вт.......

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Авторам нечего раскрывать

Благодарности

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Мы хотели бы поблагодарить д-ра Одеда Хеймана за его помощь в позиционировании животных, Рафаэля Либера за помощь в анализе микро-КТ и профессора Андиару Де Росси Далдегана за совет ы по подготовке эксперимента. Мы также хотели бы отметить д-ра Сидни Коэна за критическое чтение и редактирование.

Эта работа была поддержана грантом научно-исследовательского фонда д-ра Изадора И. Кабакова Для МК и ИА, а также стипендией Ицхака Навона от Министерства науки и технологий Израиля в EG.

....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Атипамезола гидрохлоридEurovet Animal HealthCAS 104075-48-1
ATRdentsplytecnika
блокирующая машинаLeicaEG1150H
бупренорфинvetmarket163451
клинический микроскоп/бинокулярOlympusSz61
dental burKomet dentalZR8801L 315 008
стоматологический шпательPremier1003737
EDTAJ.T Baker8993
entelanmercury1.07961
Eosin Y раствор, спиртовойраствор SIGMAHT110116
гематоксилина, Mayer'sSIGMAMHS 16
Кетамина гидрохлоридVetoquinolCAS 1867-669
Медетомидина гидрохлорид (цептор)CP-pharma GmbHCAS 86347-15-1
Мепивакаин HCl 3%TevaCAS 96-88-8
микрощетки - регулируемые прецизионные аппликаторыPARKELLS379
микро-кт сканерscancouCT 40
парафинLeica39602004
PBSSIGMAD8537
PFAEMS15710
Хлорамфеникол глазная мазь (5%)Rekah фармацевтическийCAS 56-75-7
пинцетWAMRef-CT
ксилазинEurovet Animal HealthCAS 7361-61-7
ксилолGadotCAS 1330-20-7

Ссылки

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Azuma, M. M., Samuel, R. O., Gomes-Filho, J. E., Dezan-Junior, E., Cintra, L. T. The role of IL-6 on apical periodontitis: a systematic review. International Endodontics Journal. 47 (7), 615-621 (2014).
  2. Marton, I. J., Kiss, C. Overlapping pr....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на повторное использование текста или иллюстраций этой статьи JoVE

Запросить разрешение

Теги

Mouse ModelPulp ExposurePeriapical InflammationMicro CT ImagingHistological StainingImmunohistochemistryBone ResorptionDental Pulp NecrosisJaw Tissue Analysis

Похожие статьи