Нейрит Анализ нарост и нейротоксичность оценка с нейронным предшественником человека клетки-производные нейронов

Amir Bagheri; Seyedeh Fatemeh Razavipour; Claes Wahlestedt; Seyed  Javad Mowla; Mohammad  Ali Faghihi

doi:10.3791/60955

Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Нейрит Анализ нарост и нейротоксичность оценка с нейронным предшественником человека клетки-производные нейронов

7.3K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/60955

⸱

6 августа 2020 г.

Amir Bagheri¹^,² , Seyedeh Fatemeh Razavipour³ , Claes Wahlestedt² , Seyed Javad Mowla¹ , Mohammad Ali Faghihi²^,⁴

¹Department of Molecular Genetics, Faculty of Biological Sciences, Tarbiat Modares University, ²Center for Therapeutic Innovation and Department of Psychiatry & Behavioral Sciences, University of Miami Miller School of Medicine, ³Department of Biochemistry and Molecular Biology, University of Miami Miller School of Medicine, ⁴Persian BayanGene Research and Training Center

В этой статье

Краткое содержание

Представленный протокол описывает метод нейритового анализа наростов и оценки нейротоксичности малых молекулярных соединений.

Аннотация

Neurite анализ нарост и нейротоксичность оценки двух основных исследований, которые могут быть выполнены с использованием представленного метода здесь. Данный протокол обеспечивает надежный анализ нейрональной морфологии вместе с количественными измерениями модификаций по длине нейрита и локализации синаптического белка и изобилию при лечении небольшими молекулярными соединениями. В дополнение к применению представленного метода в исследованиях нейритового роста, оценка нейротоксичности может быть выполнена для оценки, разграничения и ранжирования коммерческих химических соединений на основе их потенциального эффекта нейротоксичности развития.

Хотя клеточные линии в настоящее время широко используются в сложных анализов скрининга в неврологии, они часто отличаются генетически и фенотипически от их происхождения тканей. Первичные клетки, с другой стороны, поддерживают важные маркеры и функции, наблюдаемые in vivo. Таким образом, из-за потенциала перевода и физиологической значимости, что эти клетки могут предложить нейрит анализ роста и нейротоксичность оценка может значительно извлечь выгоду из использования человеческих нейронных клеток-предшественников (HNPCs) в качестве основной модели клеток человека.

Представленный метод здесь может быть использован для проверки на способность соединений, чтобы вызвать нейритовой нарост и нейротоксичность, воспользовавшись человеческого нервного прародителя клеточных нейронов, клеточной модели тесно представляющих человеческой биологии ".

Введение

Neurite роста является процессом, основополагающим для формирования нейронной сети и регенерации нервов¹^,². После травмы, нейрит нарост играет ключевую роль в регенерации нервной системы. Нейрит нарост также является важным элементом внеклеточной сигнализации в индуцировании нейронных регенеративных мероприятий для повышения результатов для нейродегенеративных расстройств и нейрональных травм³^,⁴^,⁵^,⁶.

Поддерживая свой потенциал дифференциации в производстве....