Субарахноидальное кровоизлияние продолжает нести высокое бремя смертности и заболеваемости человека. Для облегчения дальнейших исследований состояния и его патофизиологии представлена дохиазматическая модель однократной инъекции.
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
Прехиазматическая однократная инъекция аутологичной крови для индукции экспериментального субарахноидального кровоизлияния на крысиной модели
В этой статье
Краткое содержание
Аннотация
Несмотря на успехи, достигнутые в лечении за последние десятилетия, субарахноидальное кровоизлияние (САК) по-прежнему несет на себе тяжелое бремя заболеваемости и смертности, в основном затрагивая довольно молодое население. Было разработано несколько моделей САК на животных для исследования патофизиологических механизмов, лежащих в основе САК, и для тестирования фармакологических вмешательств. Прехиазматическая модель однократной инъекции на крысах, представленная в этой статье, представляет собой экспериментальную модель САК с заданным объемом крови. Вкратце, животное обезболивают, интубируют и держат под искусственной вентиляцией легких. Температура регулируется с помощью грелки. Катетер помещается в хвостовую артерию, что позволяет непрерывно измерять артериальное давление, а также брать кровь. Атлантоокципитальная мембрана разрезается, и катетер для регистрации давления помещается в большую цистерну, чтобы обеспечить измерение внутримозгового давления. Этот катетер также может быть использован для интратекальных терапевтических вмешательств. Крысу помещают в стереотаксическую рамку, просверливают отверстие для заусенца спереди от брегмы, а через отверстие для заусенца вводят катетер и помещают прямо перед хиазмой зрительного нерва. Аутологичная кровь (0,3 мл) извлекается из хвостового катетера и вводится вручную. Это приводит к повышению внутримозгового давления и уменьшению мозгового кровотока. Животное держат под действием седативных препаратов в течение 30 минут и дают подкожный физиологический раствор и анальгетики. Животное экстубируют и возвращают в клетку. Дохиазматическая модель имеет высокую скорость воспроизводимости и ограниченную вариабельность между животными из-за заранее определенного объема крови. Он имитирует САК у людей, что делает его подходящей моделью для исследований САК.
Введение
Нетравматическое субарахноидальное кровоизлияние (САК) является одной из форм инсульта, составляющей около 5% всех случаев. Наиболее распространенной причиной нетравматического САК является внезапный разрыв аневризмы (САК), на долю которого приходится 85% САК. Другие причины включают разрыв артериовенозной мальформации, коагулопатии и разрыв вен при перимезенцефальном кровоизлиянии1. Уровень заболеваемости составляет 9 на 100 000 человеко-лет, при этом смертность составляет примерно каждый третий, а другая треть требует поддержки повседневной жизни послеSAH 2,3.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Протокол
Эта процедура выполняется в соответствии с Директивой Европейского Союза 2010/63/ЕС о защите животных, используемых в научных целях, и одобрена Датской инспекцией по экспериментам на животных (лицензия No 2016-15-0201-00940). Хирургическое вмешательство проводится с использованием асептической техники в максимально широком объеме, включая стерильные инструменты, перчатки, катетеры и швы. В исследовании использовались самцы и самки крыс Sprague-Dawley весом 230-350 г, группа, размещенная в 12-часовом цикле света / темноты, с постоянной температурой 22 ° C (± 2 ° C) и влажностью 55% (± 10%). Животные обеспечиваются стандартным кормом и водой ad libitum. После операции ж....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Результаты
Женщины имеют повышенный риск развития аСАК по сравнению с мужчинами. Несмотря на это, самцы грызунов в основном используются в экспериментах из-за возможного смещения из-за гетерогенности цикла течки у самок. Репрезентативные результаты, представленные здесь, взяты из недавней публикации, сравнивающей самок и самцов крыс, подтверждая, что модель дает аналогичные результаты у самок животных по сравнению с самцами21. В исследование были включены 34 самки крыс Sprague-Dawley (18 SAH и 16 Shams). Шам.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Обсуждение
Прехиазматическая модель САК с однократной инъекцией имитирует несколько важных элементов САК человека, включая всплеск ВЧД, снижение CBF, транзиторную глобальную ишемию, активацию нейровоспалительных маркеров и CVS 14,15,16,18,19,20. ICP-зонд также использовался в качестве порта для интратекального введения (
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Раскрытие информации
У авторов нет противоречащих друг другу интересов, о которых можно было бы заявить.
Благодарности
Работа была поддержана Фондом Лундбека и Грантом передового опыта Лундбека (No R59-A5404). Спонсоры не играли никакой роли ни в одной части рукописи.
....Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Материалы
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| Катетер периферических вен 16 G | BD Venflon | 393229 | Игла укороченная, дистальная на 1 см изогнутая. Крылья удалены |
| Колокольчик / камера для анестезии | Неизвестно | ||
| Анализатор газов крови | Радиометр | ABL80 | |
| Монитор артериального давления (АД) | Adinstruments | ML117 | Подключается к Powerlab |
| Изогнутые щипцы, 12 см x 3 | F.S.T | 11001-12 | Для анестезии |
| Цилиндрическая подушка, 28 см x 4 см | Самодельная | Сделано из хирургические полотенца | |
| сбора данных | Adinstruments | ML870 Powerlab | |
| Программное обеспечение для сбора данных | Adinstruments | LabChart 6.0 | |
| Дрель | KMD | 1189 | |
| Контроллер дрели | Silfradent | 300 IN | |
| Гибкий свет | Schott | KL200 | |
| Грелка | Minco | 1135 | |
| Игла для подкожных инъекций, 20 г KD | Medical | 301300 | Подключается к стереотаксической рамке |
| ICP монитор | Adinstruments | ML117 | Подключается к |
| испарителю изофлурана | Powerlab Ohmeda | TEC3 | |
| Ноутбук | Lenovo | T410 | |
| Лазерный допплеровский монитор | Adinstruments | ML191 | |
| Лазерный допплеровский зонд | Oxford Optronics | MSF100XP | Подключается к лазерному допплеровскому монитору |
| Иглодержатель, 13 см | F.S.T | 12001-13 | Для анестезии |
| Прецизионный шприц, 0,025 мл | Hamilton | 547407 | |
| Стереотаксическая рамка | Kopf Instruments | M900 | |
| Хирургический микроскоп | Carl Zeiss | F170 | |
| Шовный материал игла | Allgaier | 1245 | Для анестезии |
| контроллер Temperaure | CWE,INC. | TC-1000 | |
| Преобразователь x 2 | Приспособления | MLT0699 | Подключается к монитору BP и ICP |
| Аппарат искусственной вентиляции легких | Ugo Basile | 7025 | |
| Ветеринарная машинка для стрижки | Aesculap | GT421 | |
| 3-контактный ретрактор Blair, 13,5 см | Agnthos | 17022--13 | |
| Тупой втягивающий инструмент Alm | F.S.T | 17008-07 | |
| Изогнутые щипцы, 12 см x 2 | F.S.T | 11001-12 | |
| Иглодержатель, 13 см | F.S.T | 12001-13 | |
| Прямые щипцы Дюмона, 11 см | F.S.T | 11252-00 | |
| Прямой гемостат от комаров Холстеда x 2 | F.S.T | 13008-12 | |
| Прямые ножницы для радужной оболочки, 9 см | F.S.T | 14090-09 | |
| Прямые ножницы Ванна, 10,5 см | F.S.T | 15018-10 | |
| Впитывающиеся тампоны | Kettenbach | 31603 | |
| Черная шелковая нить, 4-0, 5 x 15 см | Vö mel | 14757 | |
| Костный воск | Aesculap | 1029754 | |
| Карбомер гель для глаз 2 мг/г | Паранова | ||
| Ватный тампон | Heinz Herenz | WA-1 | |
| Аппликатор с ватным наконечником x 4 | Selefa | 120788 | |
| Игла для подкожных инъекций, 23 г x2 | KD Медицинский | 900284 | Подключается к запорному крану. Снимите дистальный конец |
| иглы для подкожных инъекций, 23 г x3 | KD Medical | 900284 | Снимите дистальный конец. 2 соединяет с запорным краном, 1 к шприцу |
| зонд ВЧД: | Самодельный | Изготовлен из следующего: | |
| Полиэтиленовая трубка, 20 мм | Smiths medical | 800/100/200 | Внутренний диаметр (ID): 0,58 мм, Внешний диаметр (OD): 0,96 мм. |
| Силиконовая трубка, 10 мм | Fisher | 15202710 | ID: 0,76 мм, Наружный диаметр: 2,4 мм. |
| Силиконовая трубка, 2 мм | Fisher | 11716513 | Внутренний диаметр: 1,0 мм, Внешний диаметр: 3,0 мм. |
| Микрогематокритные тубы | Марка | 7493 11 | |
| OP-полотенце, 45 см x75 см | Mö lnlycke | 800430 | |
| Адаптер PinPort, 22 г | Instech | PNP3F22 | |
| Инжектор PinPort | Instech | PNP3M | |
| Полиэтиленовая трубка, 2 x 20 см | Smiths medical | 800/100/200 | Подключается к шприцу. Внутренний диаметр: 0,58 мм, внешний диаметр: 0,96 мм. |
| Резиновая лента | Unknown | ||
| Scalpel, 10 лезвий | Kiato | 23110 | |
| Spinalneedle, 25 G x 3.5'' | 'Braun | 5405905-01 | |
| Система запорного крана, Discofix x 2 | Braun | 16494C | Подключается к датчику |
| Шовный материал, 4-0, монофил, нерезорбируемый x 3 | Ethicon | EH7145H | |
| Шприц, 1 мл | BD Пластипак | 1710023 | |
| Шприц, люэр-лок, 10 мл x 4 | BD Пластипак | 305959 | Подключается к преобразователю |
| Тканевый клей | 3M | 1469SB | |
| 0,5% Хлоргексидиновый спирт | Faaborg Pharma | 210918 | |
| Карпрофен 50 мг/мл | ScanVet | 43715 | Разведенный 1:10 |
| Изофлуран | Бакстера | ||
| Изотонический физиологический раствор | Amgros | 16404 | |
| Лидокаин-Адреналин 10 мг/5 и микро; г/мл | Amgros | 16318 |
Ссылки
- van Gijn, J., Kerr, R. S., Rinkel, G. J. Subarachnoid haemorrhage. Lancet. 369 (9558), London, England. 306-318 (2007).
- de Rooij, N. K., Linn, F. H. H., vander Plas, J. A., Algra, A., Rinkel, G. J. E. Incidence of subarachnoid haemorrhage: ....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Перепечатки и разрешения
