Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Модель грызунов операции Росса: имплантация сингенного трансплантата легочной артерии в системном положении

2.7K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/63179

⸱

1 апреля 2022 г.

 ,  ,  ,  ,  ,  , 

* These authors contributed equally

В этой статье

Краткое содержание

Мы демонстрируем, как установить мышиную модель имплантации легочного корня в нисходящую аорту для имитации процедуры Росса. Данная модель позволяет проводить среднесрочную/долгосрочную оценку ремоделирования легочного аутотрансплантата в системном положении, представляя собой основу для разработки терапевтических стратегий содействия его адаптации.

Аннотация

Операция Росса по поводу заболевания аортального клапана вновь обрела новый интерес благодаря своим выдающимся долгосрочным результатам. Тем не менее, при использовании в качестве автономной замены корня описывается возможное расширение легочного аутотрансплантата и последующая аортальная регургитация. Было предложено несколько моделей на животных. Однако они обычно ограничиваются моделями ex-vivo или экспериментами in vivo с относительно дорогими моделями крупных животных. В этом исследовании мы стремились установить грызунную модель имплантации трансплантата легочной артерии (PAG) в системном положении. В общей сложности было включено 39 взрослых крыс Льюиса. Сразу после эвтаназии легочный корень был собран у животного-донора (n=17). Сингенных реципиентов (n=17) и фиктивных (n=5) крыс седировали и вентилировали. В группе реципиентов ПАГ имплантировали со сквозным анастомозом в инфра-почечном абдоминальном положении аорты. Крысы с фиктивной операцией подвергались только трансекции и повторному анастомозу аорты. За животными наблюдали серийные ультразвуковые исследования в течение двух месяцев и посмертный гистологический анализ. Медианный диаметр PAG в исходном положении составил 3,20 мм (IQR=3,18-3,23). При последующем наблюдении медианный диаметр PAG составлял 4,03 мм (IQR = 3,74-4,13) через 1 неделю, 4,07 мм (IQR = 3,80-4,28) через 1 месяц и 4,27 мм (IQR = 3,90-4,35) через 2 месяца (p<0,01). Пиковая систолическая скорость составляла 220,07 мм/с (IQR=210,43-246,41) на 1 неделе, 430,88 мм/с (IQR=375,28-495,56) на 1 месяц и 373,68 мм/с (IQR=305,78-429,81) на 2 месяца (p=0,02) и не отличалась от фиктивной группы в конце эксперимента (p=0,5). Гистологический анализ не показал никаких признаков эндотелиального тромбоза. Это исследование показало, что модели грызунов могут позволить оценить долгосрочную адаптацию легочного корня к системе высокого давления. Системно размещенная сингенная имплантация ПАГ представляет собой простую и осуществимую платформу для разработки и оценки новых хирургических методов и медикаментозной терапии для дальнейшего улучшения результатов операции Росса.

Введение

Врожденный стеноз аортального клапана – это подгруппа врожденных пороков сердца, характеризующаяся обструкцией левого желудочкового тракта, в которой поражение расположено на клапанном уровне. Порок развития поражает примерно 0,04-0,38 на 1000 живорождений1.

Доступных вариантов коррекции много, каждый со своими преимуществами и недостатками. Для пациентов, подходящих для бивентрикулярной коррекции2, подход может быть направлен на восстановление клапана (чрескожная или хирургическая вальвулотомия) или его замену3. Последнее предпочтительно, когда аортальный клапан считае....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

Все процедуры были одобрены Комитетом по уходу за животными Падуанского университета (OPBA, протокол No 55/2017) и одобрены Министерством здравоохранения Италии (разрешение No 700/2018-PR) в соответствии с Директивой Европейского союза 2010/63/UE и итальянским законом 26/2014 об уходе и использовании лабораторных животных.

1. Уход за животными и экспериментальная модель

  1. Убедитесь, что все крысы Льюиса получены от одной компании (Таблица материалов). Содержание крыс в обычных помещениях со свободным доступом к пище и воде.
  2. Убедитесь, что вес крыс колеблется в пределах 320-400 г для группы....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

В общей сложности 39 взрослых крыс Льюиса были включены в это исследование: 17 животных использовались в качестве доноров PAG, 17 животных в качестве реципиентов и 5 в качестве фиктивных (контрольная группа) (таблица 1). Самцов крыс было 22 (56%), а самок 17 (44%); последние использовались только в донорской группе.

Во время операции не произошло ни одного смертельного события со 100% выживаемостью. Во время наблюдения у двух животных группы трансплантации исход исходил через .......

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Замена аортального клапана аутологичным легочным корнем (операция Росса) представляет собой привлекательный вариант для восстановления врожденного стеноза аортального клапана благодаря благоприятному профилю и потенциальному росту аутотрансплантата10. Основным ограничением этой процедуры является потенциальная дилатация аортального неоклапана, что предрасполагает к развитию длительной регургитации. Возможность охарактеризовать модификации легочной артерии после воздействия системных давлений может.......

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Авторам нечего раскрывать.

Благодарности

Исследование финансировалось из интегрированного бюджета межведомственных исследований (BIRD) 2019.

....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
0,9% хлорида натрияMonico SpAAIC 030805105двух флаконах по 100 мл. Холодный (4° В) для промывания извлекаемого органа; теплый (39&d; C) для увлажнения и регидратации реципиента
7,5% Povidone-IodineB BraunAIC 032151211
BarraquerAesculapFD 232RПрямой микроиглодержатель для сосудистых анастомозов
Castroviejo иглодержательОтсутствуетJ 4065Для закрытия животного
Зажим с применением щипцовRudolf MedicalRU 3994-05Для зажима
Ватные палочкиJohnson & Johnson Medical SpAN/AПродукт для супермаркета. Стерилизованные
изогнутые микро ювелирные щипцыRudolf MedicalRU 4240-06Используются для наложения швов под вазы.
Крем для депиляцииRB healthcareН/ДПродукт из супермаркета
Электрокоагуляционная машинаLED SpASurton 200
Тонкие ножницыRudolf MedicalRU 2422-11Для вскрытия живота (реципиент)
Микроножницы Vannas с тонким наконечникомAesculapOC 497RТолько для подготовки легочного корня, разрежьте поясничные вазы и 10/0 Prolene
Fluovac Isoflurane/Halotane Scavanger unitHarvard Apparatus LtdK 017041Полный комплект из наркозного аппарата, анестезиологической трубки, индукционной камеры и поглотителя с абсорбируемым фильтром
GentamycinMSD Italia SrlAIC 020891014антибиотиком. Однократная доза, 5 мг/кг внутримышечно, вводится во время операции
HeparinPharmatex Italia SrlAIC 034692044500 МЕ в брюшную полую вену реципиента
I.V. CatheterSmiths Medical Ltd403620G
Инсулиновый шприц, 1 млFisher Scientific14-841-33Для введения гепарина животному-донору и для промывания разделенной аорты у реципиента
Биполярный щипец JewelerGIMA SpA30665наконечник 0,25 мм. Для электрокоагуляции очень маленьких ваз
Lewis rats (LEW/HanHsd)Envigo RMS SRL, San Pietro al Natisone, Udine, Italy86104MСамец или самка, весом 200-250 г (животные, собирающие легочные корни) и 320-400 г (реципиенты)
Micro-MosquitoRudolf MedicalRU 3121-10В количестве четырех, с наконечниками, покрытыми силиконовыми трубками. Для удержания проленового шва во время анастомоза
Операционный микроскопLeica MicrosystemsM 400-EИспользуется с 6-кратным, 10-кратным и 16-кратным сменными увеличениями в процедуре
Perma-Hand silk 2-0Johnson & Johnson Medical SpAC026DДля поднятия аорты
Петролатум офтальмологическая мазьDechraNDC 17033-211-38
Prolene 10-0Johnson & Johnson Medical SpAW2790Очень тонкий нерассасывающийся шовный материал, с круглой иглой BV75-3, для сосудистых анастомозов
РетракторыНе любыеН/ДДва самодельных ретрактора
Микрощипцы с кольцевым наконечникомRudolf MedicalRU 4079-14Для деликатных манипуляций
СевофлуранAbbVie SrlAIC 031841036Смешанный с кислородом, для ингаляционной анестезии
Микроножницы пружинного типаRudolf MedicalRU 2380-14Прямые; длина 14 см
Стандартные зажимы для аневризмыRudolf MedicalRU 3980-12Два зажима (7,5 мм; 180 г; 1,77 Н) для закрытия аорты
Стерильная марля из нетканого материалаLuigi Salvadori SpA26161V7,5x7,5 см, четыре слоя
Прямые ножницы DoyenRudolf MedicalRU/1428-16Для использования донору
Прямые микро ювелирные щипцыRudolf MedicalRU 4240-04длиной 10,5 см. Используется для всего анастомоза
шприцыArtsana SpAN/A20 мл (для животного-сборщика) и 5 мл (для реципиента). Для промывания и погружения солевым раствором
TiCron 4-0CovidienCV-331Для сжатия мышц и кожи
Тканевые щипцы V. MuellerMcKessonCH 6950-009Используется для кожи и мышц
ТрамадолSALF SpAAIC 044718029Анальгетик. Разовая доза, 5 мг/кг внутримышечно
Virgin silk 8-0Johnson & Johnson Medical SpAW818Для лигирования артериальных ветвей

Ссылки

  1. Botto, L. D., Correa, A., Erickson, J. D. Racial and temporal variations in the prevalence of heart defects. Pediatrics. 107 (3), 32(2001).
  2. Vergnat, M., et al. Aortic stenosis of the neonate: A single-center experience. The Journal of Thor....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Больше статей

Модель Росса на грызунахимплантация сингенного трансплантатазаболевание аортального клапанаThere-to-end анастомозбрюшная аортасерийное ультразвуковое исследованиегистологический анализаутотрансплантат легочного клапанадилатация трансплантата