В настоящем протоколе разработан метод оценки выхода соединений на пластине TLC с использованием метода сине-светодиодного освещения. Преимущества такого подхода заключаются в том, что он безопасен, эффективен, недорог и позволяет исследователю измерять несколько образцов одновременно.
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
Оценка выхода соединений на пластине TLC с помощью метода сине-светодиодного освещения
В этой статье
Краткое содержание
Аннотация
Тонкослойная хроматография (TLC) является доступным аналитическим методом, который широко используется в исследованиях органической химии для количественной оценки выхода неизвестных образцов. В настоящем исследовании был разработан эффективный, дешевый и безопасный метод оценки выхода образцов на пластине TLC с использованием синего светодиодного осветителя. Ловастатин, извлеченный из Aspergillus terreus , был примером соединения, используемого в настоящем исследовании. Регрессионные модели, основанные на стандарте ловастатина, были использованы для оценки выхода ловастатина. Сравнивались три метода: биоанализ, УФ-детектирование и сине-светодиодное освещение. Результат показал, что метод сине-светодиодного освещения значительно более эффективен по времени, чем методы обнаружения ультрафиолета и биоанализа. Кроме того, синее светодиодное освещение было относительно безопасным вариантом из-за обеспокоенности биологическими опасностями в методе биоанализа (например, микробная инфекция) и ультрафиолетовым воздействием в методе обнаружения ультрафиолета. По сравнению с дорогостоящими методами, требующими специализированных приборов и длительного обучения перед самостоятельной работой, такими как GC, HPLC и HPTLC, использование синего светодиодного осветителя было экономичным вариантом для оценки выхода образцов из пластины TLC.
Введение
Тонкослойная хроматография (ТЛК) широко используется как качественная и количественная методика в области органической химии 1,2,3. Основными преимуществами TLC являются то, что он обеспечивает быстрое обнаружение, гибкие требования к образцам и не требует специализированного оборудования4. На сегодняшний день, несмотря на то, что было установлено много передовых подходов, TLC по-прежнему является основным методом идентификации неизвестных образцов в смеси. Однако проблема этого подхода заключается в отсутствии безопасного и недорогого оборудования для....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Протокол
Настоящий протокол описан на примере ловастатина. Ловастатин был извлечен из недельного Aspergillus terreus.
1. Экстракция соединений
ПРИМЕЧАНИЕ: Для получения подробной информации об извлечении соединений см. Рисунок 1.
- Культура Aspergillus terreus на картофельный агар декстрозы (КПК, см. Таблицу материалов) в среде при 30 °C.
- Высушите культуру при 40 °C в течение 24 ч. Переложите высушенную культуру в 50 мл пробирку с помощью стерилизованного пинцета и добавьте 15 мл этилацетата.
- Смесь энергично встря....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Результаты
В этом исследовании был представлен метод сине-светодиодного освещения для оценки выхода соединений, и этот метод был валидирован и сопоставлен с методами биоанализа и УФ-детектирования (таблица 1). Регрессионные модели были разработаны на основе размеров полос и концентрации эталонов для трех методов, соответственно, для прогнозирования выхода образцов. Во-первых, в результатах метода биоанализа R-квадрат между размерами зоны ингибирования и эталонами ловастатина составил 0,99, а выход образца составил .......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Обсуждение
В настоящем исследовании описан новый подход, синий светодиодный осветитель, для количественной оценки соединений без использования дорогостоящего и специализированного оборудования, такого как метод ВЭЖХ, ВЭЖХ и ГК, и этот метод сравнивали с методами биоанализа и УФ-детектирования для оценки эффективности количественной оценки. В результате был сделан вывод о том, что метод сине-светодиодного освещения является относительно безопасным и эффективным протоколом, используемым для количественной оценки выхода целевых соедин.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Раскрытие информации
Все авторы заявляют, что у них нет конфликта интересов.
Благодарности
Это исследование было поддержано Министерством науки и технологий Тайваня (MOST 108-2320-B-110-007-MY3).
....Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Материалы
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| Американский бактериологический Agar | Condalab | 1802.00 | |
| Aspergillus terreus | ATCC 20542 | ||
| Сине-светодиодный осветитель | MICROTEK | Bio-1000F | |
| Центрифуга | Thermo Scientific | HERAEUS Megafuge 8 | |
| Компактная УФ-лампа | UVP | UVGL-25 | |
| Этилацетат | MACRON | MA-H078-10 | |
| Фильтровальная бумага 125 мм | ADVANTEC | 60311102 | |
| ImageJ | NIH | Freeware | https://imagej.nih.gov/ij/download.html |
| Ловастатин стандарт | ACROS | A0404262 | |
| MiBio Флуо | MICROTEK | V1.04 | |
| n-Hexane | C-ECHO | HH3102-000000-72EC | |
| OriginPro | OriginLab | 9.1 | https://www.originlab.com/origin |
| Картофельный отвар декстрозы H | STBIO MEDIA | ||
| Ротационный испаритель | EYELA | SB-1000 | |
| Серная кислота | Fluka | 30743-2.5L-GL | |
| TLC силикагель 60 F254 | MERCK | 1.05554.0001 | |
| Трифторуксусная кислота | Alfa Aesar | 10229873 | |
| Ультразвуковая вибрационная машина | DELTA | DC600 |
Ссылки
- Pyka, A. Detection progress of selected drugs in TLC. BioMed Research International. 2014, 732078(2014).
- Hess, A. V. I. Digitally enhanced thin-layer chromatography: An inexpensive, new technique for qualitative and qua....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Перепечатки и разрешения
