Оценка функции правого желудочка в экспериментальных моделях легочной артериальной гипертензии

Summary

Представление подробных методов оценки функции правого желудочка повысит качество и надежность исследований легочной гипертензии, предложит надежную основу для будущих исследований и повысит воспроизводимость в различных лабораториях.

Abstract

Легочная гипертензия (ЛГ) является хроническим заболеванием, связанным со снижением выживаемости, что делает ее критически важной областью исследований. Экспериментальные модели ЛГ значительно улучшили наше понимание ее патофизиологии и облегчили разработку небольших наблюдательных и клинических испытаний. Тем не менее, крайне важно разработать стандартизированные методологии для обеспечения сопоставимости между различными экспериментальными исследованиями и исследовательскими группами. Стандартизация не только повышает воспроизводимость, но и способствует сотрудничеству между исследовательскими группами.

В этом видео мы описываем методологические шаги, необходимые для точного анализа функциональных параметров PH. К ним относятся эхокардиографическая оценка, инвазивная пункция правого желудочка (ПЖ) и расчет индекса Фултона. Что касается эхокардиографии, то подробно представлены измерения времени ускорения легочной артерии и коэффициента времени легочного выброса, а также расчет выхода ПЖ. Что касается инвазивных измерений, описываются основные процедуры, включая протоколы анестезии, оптимальное позиционирование животных, настройку искусственной вентиляции легких, точное вскрытие стенки грудной клетки, визуализацию ПЖ и техники пункции ПЖ.

Подробно объясняется методика диссекции желудочков (индекс Фултона), а также расчет соотношения ПЖ/левый желудочек плюс перегородка, скорректированный на массу тела животного. Мы считаем, что подробное представление этих методов повысит качество и надежность исследований PH, предложит надежную основу для будущих исследований и повысит воспроизводимость в различных лабораториях.

Introduction

Адекватное функциональное измерение функции правого желудочка (ПЖ) у мелких животных стало необходимым в связи с увеличением числа исследований с использованием животных моделей в респираторных и сердечно-сосудистых науках. Существует несколько животных моделей легочной гипертензии (ЛГ), использующих монокроталин¹, гипоксию² или Суген + гипоксию³. Они хорошо послужили для разгадки новых патофизиологических путей ^1,4 и изучения новых потенциальных фармакологических⁵ и нефармакологических⁶ мето....

Protocol

Протокол исследования был одобрен Этическим комитетом по использованию животных (CEUA) Федерального университета Рио-де-Жанейро под номером 043/22. Все процедуры соответствовали Принципам ухода за лабораторными животными и Руководству Национальной академии наук США по уходу и использованию лабораторных животных. Исследование проводилось в соответствии с рекомендациями^ARRIVE11.

1. Подготовка животных и протокол эксперимента

1. Подсчитайте количество животных, о котором сообщалось ранее¹².
   ПРИМЕЧАНИЕ: Учитывая, что различия в RVSP между CTRL и ПАУ достигали величины ....

Results

Для статистического анализа каждая переменная была проверена на нормальность и дисперсию с помощью теста Шапиро-Уилка. Данные представлены в виде средних значений ± стандартного отклонения. Непарный t-критерий использовали для сравнения концентраций частиц в контрольной (CTRL) и легочной артериальной гипертензии (ЛАГ) (p<0,05).

Эхокардиографические изменения на животной модели ЛАГ
На рисунке 4 показано, что соотношение ПАТ/ПЭТ было.......

Discussion

ЛАГ является прогрессирующим заболеванием, характеризующимся чрезмерным ремоделированием сосудов, что способствует увеличению легочного сосудистого сопротивления, что приводит к увеличению постнагрузки на ПЖ¹⁴. Соответственно, RVSP представляет собой функциональную переменную, которая напрямую коррелирует с тяжестью PAH¹⁵. С течением времени адаптивной реакцией ПЖ является компенсаторная концентрическая гипертрофия (измеряется индексом Фулт.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
<сильный>Реагенты
Спирт 70%	Черногория	ALC70-001
Проводящий гель	Mercor	CG-002
Физиологический раствор (NaCl 0,9%)	BioPharma	SAL-009
Инструменты
19 г набор	для волосистых венDescarpack	SVS-19G
Изогнутые щипцы Келли	ABC instrumentos cirurgicos	CKF-003
Щипцы Келли	ABC instrumentos cirurgicos	KF-004
Иглы (18, 22 и 26 G)	Descarpack	NDL-MIX
чашка Петри	GlassLab	PD-150
Лезвие бритвы	ABC instrumentos cirurgicos	RB-005
Скальпель	ABC instrumentos cirurgicos	SC-006
Ножницы	ABC instrumentos cirurgicos	SCIS-007
Линия швов	ABC instrumentos cirurgicos	SUT-008
Шприцы (1, 3 и 5 мл)	Descarpack	SYR-135
Канюля для трахеостомии	MedTech	TC-010
Пинцет	ABC instrumentos cirurgicos	TWZ-011
Drugs
Dextroketamine hydrochloride 5%	Cristá lia	DXT-005	87,5 мг/кг внутрибрюшинного
изофлурана 1 мл/мл 240 мл	Cristá lia	ISO-240	2,5% ингаляционный раствор
лидокаина гидрохлорид 1%	Cristá lia	LID-001	400 µ L подкожно местно
монокроталин	Sigma-Aldrich	C2401	60 мг/кг внутрибрюшинно
Pancuronium bromide 2 мг/мл	Кристá lia	PAN-002	2 мг/кг внутривенно
гепарин 5000 МЕ/мл	Cristá lia	HEP-5000	разбавленный 1:4 в 1 мл
гидрохлорида ксилазина 2%	Syntec	XYL-002	12,5 мг/кг внутрибрюшинно
<сильно>Оборудование
GraphPad Prism 9	GraphPad Software, Inc	GP9
Сетевой многопараметрический ветеринарный монитор LifeWindow 9x	Digicare Animal Health	LW9x
Программное обеспечение LabView	National Instruments, Corp.	LV-2019
MATLAB R2019a (Версия) программное обеспечение	The MathWorks, Inc.	MATLAB-2019
Монитор и преобразователь сигнала	MedTech	MST-015
Прецизионные весы	Sartorius	PS-020
R540 Mice& Аппарат для анестезии крыс животных	RWD Life Schience Co., Ltd	R540-ANA
Scale	Ohaus	SCL-025
Servo-i Механический аппарат искусственной вентиляции легких	Getinge AB	SERVO-I	FiO2 = 21%; дыхательный объем = 8 мл/кг, частота дыхания = 70 уд/мин, а PEEP = 3 смH2O
Программное обеспечение SonoView	SONOTEC Ultraschallsensorik Halle GmbH	SV-2020
UGEO HM70A system	Samsung Eletrô nica da Amazô nia LTDA	HM70A
G*Power 3.1.9.7	University of Dü Ссельдорф, Германия	gpower