Методическая статья

Изготовление расширяемой матрицы мозга, настраиваемой на разных этапах развития

DOI:

10.3791/68638

20 февраля 2026 г.

В этой статье

Краткое содержание

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Описан инновационный метод создания расширяемых матриц мозга для разрезания корональных или сагиттальных срезов для применения у новорождённых поросят. Этот бюджетный подход использует акриловые пластины, вырезанные по шаблонам из агарозного геля, применяется к нескольким видам и позволяет расширяться для роста мозга.

Аннотация

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Рост интереса к использованию новорождённых поросят в качестве модели для изучения неонатального развития и патологии вызвал необходимость в матриксе мозга для точного получения гистологических срезов. Однако быстрый рост мозга новорождённого ограничивает полезность коммерчески доступных матриц узким окном развития. Поэтому был разработан метод построения регулируемых матриц мозга. Сначала стеклянный контейнер помещался на влажный лёд, а на дно наносили слой 4% агарозного геля. Далее на этот слой наносили формалин-фиксированный мозг и вставляли 4% агарозный гель. После того как гель затвердевал, гель над мозгом аккуратно удаляли, а мозг — извлекались. Полость была заполнена 4% агарозным гелем с 2% индийскими чернилами. После затвердевания гелевый блок удалялся и нарезал на нужную толщину (2 мм или 5 мм) и ориентацию (корональный или сагиттальный) для печати шаблонов мозга на бумаге. Шаблоны копировали на серию прозрачных акриловых пластин (толщиной 2 мм или 5 мм) и соответственно вырезались на ленточной пиле. Наконец, пластины были собраны и закреплены тремя комплектами болтов и гайок через заранее просверленные отверстия для выравнивания, чтобы создать индивидуальную матрицу мозга. Построение как корональной, так и сагиттальной матриц иллюстрируется для неонатального мозга пятого дня с шагами 2 мм и корональной матрицы для мозга после родов 32-38 дней с шагами 5 мм. Добавляя или удаляя правильные акриловые пластины, матрица корректировалась под различные размеры мозгов поросят. Таким образом, в сообществе неврологических исследователей представлен простой и экономичный метод настройки матриц мозга для различных размеров крупных животных.

Введение

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Развитие мозга поросяток очень похоже на развитиечеловеческого 1,2,3,4. Таким образом, растёт интерес к использованию поросят для доклинических исследований нейроразвитийных расстройств, заболеваний новорождённых и детей, а также травм (рисунок 1A,B)5,6,7,8,9,10. Как показано на рисунке 1, новорождённый поросят, как модель крупного животного, имеет размер черепа и мозга, ближе к размеру недоношённого человеческого эмбриона (рисунок 1A,B), тогда как черепа взрослых мышей и крыс как минимум на два раза меньше.

Однако существуют сложности с использованием крупных млекопитающих в биомедицинских исследованиях по сравнению с более широко используемыми мышиными моделями. Мозг новорождённых поросят быстро растёт в первые 3 месяца после рождения. В первые 5 недель жизни мозг поросёнка почти удваивает вес и утрояется в объёме (рисунок 1C). В период с p5 по p38 заметно выделялись рост и развитие подвижнений и сулькусов в мозге (рисунок 1C). Вес и объём мозга поросёнка p5 составляли 29,5 г и 18,9 мл, тогда как мозги двух p32 — 51,4 и 52,6 г, а также 49,6 и 53,5 мл соответственно. Через 38 дней мозг вырос до 53,7 г и 52,5 мл, что означает увеличение веса на 80% и увеличение объема на 170% по сравнению с p5. Такой быстрый рост мозга новорождённой свиньи представляет собой сложность для точного гистологического сечения мозгов поросят разных возрастов, штаммов или полов, используя единую матрицу.

Коммерческие матрицы мозга для поросят имеют приблизительную стоимость от $1,000 до $3,600 каждая и доступны только в варианте одного размера, предназначенного для поросят от 2 недель и младше. Хотя существует несколько публикаций, которые использовали технику 3D-сканирования и 3D-печати для создания различных матриц мозга для данио-рерио, мышей иптиц 14, 15, 16 эти матрицы имеют относительно небольшой масштаб. Нет установленных серий МРТ или подробной схемы роста мозга новорождённых поросят, особенно на возрасте от 2 недель и младше. Поэтому мы создали несколько шаблонов срезов мозга, используя мозги, собранные с 5-го по 38-й день, на основе которых была создана регулируемая система матрицы мозга.

Этот протокол описывает инновационный метод создания неонатальных шаблонов мозга поросят и разработки акриловых пластин, настраиваемой матрицы мозга, которая может использоваться для коронального или сагиттального секционирования мозга в разных размерах.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

В этой статье четыре мозга поросят были получены и подготовлены к гистологическому окрашиванию после гуманной эвтаназии согласно протоколу, утверждённому Институциональным комитетом по уходу и использованию животных (IACUC) Университета Кентукки для отдельного исследования. Все процедуры на животных были одобрены, и был принят надлежащий уход за животными, чтобы минимизировать стресс и боль, связанные с лечением или эвтаназией.

1. Животные

  1. Приобрести четырёх наивных самцов-неонатальных (4-й день после родов, p4) поросят (вес тела 1,5-1,8 кг) с генетическим фоном: 62,5% Ландрас, 25% крупных белых и 12,5% йоркширов.
  2. Поместите животных вместе в одну отдельную комнату в свинарнике, поддерживая лампу и пол, покрытый полотенцами. Кормите их спонтанно с заменительным молоком в первую неделю, а через 2-3 недели постепенно переходите на корм из гранул.
  3. Отслеживайте физиологическую активность и массу тела, а также проводите еженедельные МРТ-сканирования под анестезией изофтораном.
  4. Эвтаназия с помощью передозировки пентобарбитала и транскардиальная перфузия гепаринизированным физиологическим раствором, затем 10% нейтральный буферный формалин.
  5. Вскрыть мозг изчерепа 17, зафиксировать формалином на ночь, а затем поместить 30% сахарозы в PBS на 3 дня для криоконсервации.

2. Гель-молдинг из агарозы

  1. Погрузите стеклянный контейнер в ведро с влажным льдом до половины высоты (рисунок 2A).
  2. Используйте плотную пластиковую ленту в качестве вкладыша контейнера и убедитесь, что дно и боковые стенки полностью закрыты, оставляя оба конца не менее 5 см выше верхнего края.
  3. Нагрейте 150 мл PBS в стеклянном стакане до 90 °C на горячей плите с помощью магнитной мешалки и постепенно добавляйте и растворяйте 6 г агарозы, чтобы получить 4% агарозный гель в PBS.
  4. Налейте слой толщиной 0,5–1 см в стеклянную ёмкость (рисунок 2B) и дождитесь, пока он затвердеет.
  5. Нанесите тонкий слой минерального масла на мозг (рисунок 2C) и положите мозг на слой геля (рисунок 2D).
  6. Дайте раствору агарозы остыть до 50 °C. Внедрите в мозг охлаждённый агарозный гель (рисунок 2E) и дайте ему затвердеть (рисунок 2F), что обычно занимает ~10 минут на влажном льду.
  7. Аккуратно удалите верхний слой агарозного геля над мозгом (рисунок 2G) хирургическим зондом и извлеките мозг из затвердевшей формы (рисунок 2H, I).
  8. Разогрейте 98 мл PBS в другой стеклянной стаканке до 90 °C на размешивающей плите с магнитной мешалкой, добавьте 4 г агарозы и 2 мл индийских чернил, и дайте хорошо перемешать и перемешать. В полость, оставленную извлечённым мозгом (Рисунок 2J), залейте 4% агарозы с 2% индийскими чернилами (Рисунок 2J) до полной полости и дайте ей затвердеть на влажном льду в течение 15 минут (Рисунок 2K).
  9. Используя нависающие части пластиковой полоски, поднимите её, чтобы удалить весь блок агарозы из контейнера (рисунок 2L).

3. Разрезание блоков Agarose и копирование шаблона на бумагу

  1. Чтобы защитить бумагу от влаги во время нарезки, поместите один лист бумаги между двумя прозрачными акриловыми пластинами толщиной 0,76 мм (0,03") (рисунок 3A), а ламинированную бумажно-акриловую пластину положите у края стола.
  2. Закрепите угловые квадраты на скамейке с помощью зажимов в нужном положении, чтобы две акриловые пластины толщиной 5 мм стояли и крепко удерживали гелевый блок между ними с нужной ориентацией (сагитталь на рисунке 3). Убедитесь, что край каждой вертикальной акриловой пластины выровнен с одной линией на бумаге для нарезки гелевого блока. Используйте груз, чтобы закрепить гелевый блок на конце, противоположном от места нарезки (рисунок 3B).
  3. Используя подлежащую бумагу в качестве ориентира, переместите гелевый блок вперёд из-под акриловых пластин на нужном шаге (2 мм или 5 мм), удержите клинок микротома обеими руками и разрежьте часть за передний край акриловой пластины (рисунок 3B).
  4. Соберите каждый ломтик (рисунок 3C), поместите его на отдельную бумагу для масштабов (рисунок 3D), аккуратно прижмите окрашенную индийскими чернилами часть отливки на бумагу, чтобы передать контур (рисунок 3E), обведите контур всей гелевой секции ручкой, удалите гелевую секцию и обведите индийский отпечаток тушью также ручкой (рисунок 3F). Обращайте внимание на то, чтобы ориентация каждого среза и скопированный шаблон оставались согласованными.
  5. Повторяйте шаги 2.3 и 2.4, пока все детали геля не будут скопированы на бумагу и пронумерованы последовательно. Перепроверьте срезы и их отпечатки (репрезентативные изображения корональных срезов и отпечатков на рисунках 3G, H).

4. Резьба на акриловых пластинах

  1. Вырежьте канавки на большой акриловой пластине ножом из плексигласа и разбейте крупные пластины на кусочки размером 10 x 8,5 см.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Общее количество кусочков зависит от размера мозга, желаемой толщины среза и ориентации нарезки. Обычно мы готовим 25 кусочков акриловых пластин диаметром 2 мм для корональной или сагиттальной матрицы для мозгов новорождённых поросят и 15 пластин 5 мм для больших мозгов для облегчения обращения.
  2. Ориентир — три крепящих отверстия на акриловой пластине по координатам x, y, измеренные от нижнего левого угла (в мм): (11, 42); (45, 15); и (88, 42).
  3. Закрепите акриловые пластины с помощью угловых квадратов и зажимов на платформе сверильного станка. Просверлите три анкерных отверстия по указанным выше координатам с помощью акрилового сверла (рисунок 4A). Нарисуйте цветовую линию справа от всех пластин, чтобы указать ориентацию.
  4. Снимите защитную плёнку с акриловой пластины и разместите её над шаблоном на бумаге, выровняя верхний край акриловой пластины с верхними линиями шаблона, скопированного на бумагу. Обведите контур мозга на акриловой пластине перманентным маркером (рисунок 4B). Маркируйте пластину последовательно, как в шаблоне.
  5. Вырежьте акриловую пластину на ленточной пиле вдоль линий шаблона (рисунок 4C). В качестве альтернативы используйте ротационный инструмент с универсальным набором для резки и наконечником для резьбы по дереву, чтобы удалить нежелательные участки.
  6. Полировка обрезанного края с помощью роторного инструмента с наконечником для шлифовки, чтобы сгладить края, оставленные режущим инструментом (рисунок 4D).
  7. Перепроверьте вырезы на акриловых пластинах относительно шаблона на бумаге для масштаба (рисунок 4E). При необходимости подстригайте и полируете.
  8. Предварительно собрать матрицу, разместив вырезанные пластины в последовательном порядке, и проверить их выравнивание (рисунок 4F).

5. Сборка и расширение матрицы мозга

  1. Разместите три шайбы между акриловыми пластинами, каждая по центру в одном отверстии для крепления (рисунок 5A). Приклейте их вокруг анкерных отверстий суперклеем с той же стороны всех акриловых пластин, чтобы сократить время сборки (рисунок 5A).
  2. Положите акриловые пластины последовательно, вставьте нержавеющие болты через каждое отверстие для сборки матрицы и затяните гайки для закрепления (рисунок 5A).
  3. Нанесите окончательную полировку на срезанные края, которые будут соприкасаться с мозгом, чтобы сгладить пластины.
  4. Цветом обозначьте верхнюю часть матрицы, чтобы помочь определить этапы при разрезании. Поочерёдно окрашивайте верхние края пластины в чёрный, красный и затем пустой цвет, чтобы получить узор. Повторяйте этот шаг, пока все пластины не будут окрашены по цвету одинаковым узором (рисунок 5).
  5. Чтобы скорректировать геометрию или изменить размер полости, чтобы лучше соответствовать определённым мозгам, удалите или добавьте отдельные акриловые пластины (рисунок 5B), чтобы адаптироваться к разным размерам мозга, что значительно увеличивает гибкость этих матриц и экономит материалы и усилия.

6. Корональное или сагиттальное разрезывание мозга

  1. Оберните один конец высокопрофильного криостатного лезвия лабораторной лентой не менее 2 см длиной, чтобы защитить руку пользователя. Надёжно поместите мозг в матричную полость. Держа обёрнутый конец лезвия, аккуратно поместите лезвие между акриловыми пластинами матрицы, а затем разрежьте мозг на корональные или сагиттальные срезы, поддерживая и закрепляя мозг другой рукой (рисунок 6A,B).
    ПРИМЕЧАНИЕ: Внимание: 1) Поскольку каждая часть мозга имеет разную текстуру после фиксации формалина, следует проявлять осторожность при равномерном давлении на лезвие. 2) Кроме того, мозг поросёнка большой, поэтому лучше использовать резкое движение для разреза, чем прямое «толкающее вниз» движение. 3) Крайне важно, чтобы мозг плотно вписался в матрицу при поддержке другой руки во время резки, чтобы избежать наклона или изменения ориентации. Чрезмерное давление на мозг на матрицу следует избегать постоянно.
  2. Положите все ломтики в тарелку с 6 лунками PBS или противень из нержавеющей сталки. Аккуратно выложите срезы в одной ориентации (рисунок 6C,D) и сохраняйте или продолжайте по мере необходимости.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Одно поросёнок было усыплено с передозировкой пентобарбиталом в возрасте п5 лет. Остальные три животных демонстрировали нормальную физиологическую активность и аналогичный набор массы тела (достигая 7,44–8,4 кг). Два поросята еженедельно проходили МРТ под анестезией изофлураном, пока их не эвтаназировали на p32. Четвёртый поросёнок оставался наивным до эвтаназии на стр. 38.

Сходство размеров головы между поросёнком и человеческим плодом можно визуализировать н...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Этот протокол предлагает методологию создания доступных и простых в сборке матриц мозга, которые могут помочь в разрезе мозга поросят или любого другого вида крупных животных в нужной ориентации и толщине. Важно, что в отличие от коммерческих «фиксированных» матриц, которые работают с ограниченным диапазоном размеров мозга, этот подход позволяет удобно настраивать или расширять матрицу под широкий диапазон размеров мозга. В этом отчёте матрица, построенная для мозга поросёнка весом 30 г,...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

У авторов нет конфликтов интересов, которые нужно раскрывать.

Благодарности

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Эта работа была поддержана Национальными институтами здоровья (NIH ) #R21-NS114771 (K.E.S.), #R56-NS117587, #R01-EB028792, #R01-HD101508, #R21-HD091118, #R41-NS122722, #R42-MH135825 (G. Y.), Американской кардиологической ассоциацией (AHA) #16GRNT30820006 (G.Y.) и #14SDG20480186 (L.C.), а также Приоритетной областью исследований нейронауки Университета Кентукки (L.C.). Наивные самцы неонатальных свиней были приобретены через Отдел ресурсов лабораторных животных (DLAR) в Свиноводческом центре Колледжа сельского хозяйства Университета Кентукки.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
1/4"-20 x 3-1/2" нержавеющий крестовый винтовой головка с ферменной головкой (25 штук), крупная резьба, 18-8 (304) нержавеющая сталь, с болтовой дропперомБолт-дропперhttps://www.amazon.com/
Нержавеющая Филлипс-Машина
-Болт-дроппер/dp/B07D1L8
7VB/ref=sr_1_2?crid=38M
PNERXG39Q3& ключевые слова
=1%2F4%22+3,5+дюйм+
нержавейка+болты& qid=16427
82626& s=промышленные & префикс
=1%2F4+3,5+дюйм+нержавеющая
+болты%2Cindustrial%2C62
& sr=1-2
10 упаковок по 8 x 10" ПЭТ-лист/панели из плексигласа 0,03" Thick КАЛПАЛМИhttps://www.amazon.com/dp
/B084P4YSST/?coliid=I1S59
82XD9P6CB& colid=XJ78FAX
D85BF& psc=1& ref_=lv_ov_lig_dp_it
3 упаковки 3/16" (4,5 мм) прозрачный акриловый лист 8" x 12" литого плексигласа (0,177") Толстый номинальный размер AZMДисплеи AZMhttps://www.amazon.com/4-5mm
-Акрил-Плексиглас-Номинал-AZM
/dp/B082CGYSCK/ref=sr_1_12?
dchild=1& ключевые слова=акрил+лист
%2C+4,5 мм& qid=1617572206& sr=8-12
3  Плоская подкладка для укорочения плеча  Шайба, нержавеющая сталь 18-8, болт 1/2", диаметр 0,501", 0,750" OD, толщина 0,0,016" (упаковка из 50 штук)Мелкие ролиhttps://www.amazon.com/Shoulder-
Укоротение-Мойка-Нержавеющая Сте<бр/> l-0-251/dp/B004K1FFZA/ref=sr_1_
3?crid=1K8LO0VN4GLE&; dchild=1
& keywords=Washers& pd_rd_r=
0ffe510e-abe5-4eae-b975-ed945
08ac71a& pd_rd_w=HuED5& pd_r
d_wg=fixK7& pf_rd_p=b4950e17-f
2f6-494c-bba5-69a9d0aa3887& pf
_rd_r=BRVGS2378CHD1WBC2E
4P& pid=3tntl8w& qid=1617573484
& refinements=p_n_feature_twenty
_browse-bin%3A17420898011%2
Cp_n_feature_twenty-one_browse
-bin%3A19047154011& s=Индустрия
L& sprefix=washer%2Bfor%2B%2C
aps%2C202& sr=1-3& th=1
Плита с 6 скважинойAvantor76520-650
Шестиугольная гайка 8-32, шестиугольная гайка с крупной резьбой, шестиугольная гайка из нержавеющей стали 18-8, серебристый оттенок, ?100 кусков?Фуллеркрегhttps://www.amazon.com/Fullerkreg
-Машина-Нержавеющая-Яркая-Количество/
dp/B078S3J765/ref=sr_1_4?crid=4
VSSI5B9MJ2D& ключевые слова=1%2F4
%22-20+Дюйм+Нержавейка+Сталь+
Шестигранник+гайка+грубая+нить& qid=1
642782823& s=промышленные & sprefix
=1%2F4+-20+inch+Stainless +ste
el+hex+nut+coarse+thread%2Cin
dustrial%2C61& sr=1-4
Квадраты с углом 90 градусов из алюминиевого сплаваХИНМЭЙhttps://www.amazon.com/Positioni
ng-Алюминий-Деревообработка-Карп<бр/> Enter-Clamping/dp/B08294FZ7L/r
ef=sr_1_6?crid=1I97TLVRYREPQ
& dchild=1& ключевые слова=угол+squ
are& qid=1625683905& sprefix=co
rner+squ%2Caps%2C182& sr=8-6
агарозаAvantor97062-244
Ленточная пилаSKILL
Заменитель молока по праву рождения (Pipestone)ПайпстоунSKU  8229https://pipevet.com/birthright-baby-pig-milk-replacer
ведроAvantor89233-340
Dremel 4300-5/40 Высокопроизводительный ротационный инструментальный наборДремельhttps://www.amazon.com/dp/B0
1M1SJNVU/?coliid=IMLRI62ZL
JTSJ& colid=2XZ304Y9M7PV7
& psc=1& ref_=lv_ov_lig_dp_it
Сверла для пластика (акрил, плексиглас, ABS, лексан, поликарбонат, ПВХ)FTMhttps://www.amazon.com/dp/B
07D1B3B51/?coliid=I26RS6UP
UJ3P1Y& colid=2XZ304Y9M7P
V7& psc=1& ref_=lv_ov_lig_dp_it
Стеклянный стакан X 2Avantor470335-854
Стеклянный контейнерWheaton окрашивает посудуУИТОН®   900303
Блокнот на графической бумаге: 1 мм толщиной и 10 мм толще светло-серые сетчатые линии (метрические, 120 страниц):https://www.amazon.com/
Graph-Paper-Notebook-
двусторонний-неперфорированный
/dp/154319026X/ref=sr_1_13?
dchild=1& ключевые слова=миллиметр
+paper& qid=1617634163& sr=8-13
ЛЕЗВИЕ МИКРОТОМНОГО НОЖА HACKER INSTRUMENTSHACKER INSTRUMENTS
Прочная пластиковая лентаAvantor89072-136
India Inkспидбол СУПЕР БЛЭК
IRWIN QUICK-GRIP Зажимы, одноручные, мини-бар, 6-дюймовый, 4-упаковка (1964758)ИРВИНhttps://www.amazon.com/IRWIN
-QUICK-GRIP-1964758-One-
Ручный зажим/dp/B001DSY4
QO/ref=sr_1_5?crid=3NJ320
86LJCS6& dchild=1& ключевые слова
=зажимы+для+деревообработка& qid
=1617634545& sprefix=clamp%
2Caps%2C184& sr=8-5
Kreg KHC-Premium Face Clamp Крегhttps://www.amazon.com/KREG
-KHC-PREMIUM-Kreg-Face-
Clamp/dp/B001DC9UR8/ref=sxin
_11?ASCSUBTAG=AMZN1.osa.27
EDDFF2-544b-4c29-9242-220b3F
760cb0. ATVPDKIKX0DER.en_
США и США. creativeASIN=B001DC9UR
8& crid=3NJ32086LJCS6& cv_ct_
cx=зажимы+для+столярной работы& CV
_ct_id=AMZN1.OSA.27eddFF2-544b
-4C29-9242-220B3F760CB0. ATVP
DKIKX0DER.en_US& cv_ct_pg=
поиск& cv_ct_we=asin& cv_ct_wn
=OSP-одиночный источник-earns-comm&
dchild=1& ключевые слова=зажимы+за+
Столярное дело& linkCode=oas& pd_r
d_i=B001DC9UR8& pd_rd_r=EEAF7
178-EEE3-4399-862A-479FFFB6cfc3&
pd_rd_w=W3Inj& pd_rd_wg=PKPUl&
pf_rd_p=e666d5aa-04ca-46aa-86b0-
07ac28e037d4& pf_rd_r=22RKP4S4S
SS5PYDM2ZFD& qid=1617634545& s
prefix=clamp%2Caps%2C184& SR=1-
2-64F3A41A-73CA-403A-923C-8152C4
5485FE& tag=этот старый дом05-20
Лабораторная лентаAvantor76276-016
Loctite 1363589 4-граммовый флакон Super Glue Ultra Gel Control Adhesive, 3 упаковкиЛоктайтhttps://www.amazon.com/Loctite-
1363589-4-Gram-Control-Adhesive/
dp/B01HPT0AWQ/ref=sr_1_13?
keywords=суперклей+мощность+клей
+for+пластик& qid=1642782991& s
prefix=superglue%2Caps%2C83& sr=8-13
Одноразовые лезвия Microtome высокого профиляOptimal Scientifichttps://www.amazon.com/Optimal
-Scientific-Microtome-High-Profile
-Disposable/dp/B08MCSN6SL/ref
=sr_1_1?dchild=1& ключевые слова=hig
h+профиль+криостат+лезвие& qid=16
17592221& sr=8-1
Минеральное маслоСигма-ОлдричM8410-100 мл
PBSAvantor97062-818
Наконечник для шлифовки для полировки20 кусков карбидных жорнов 1/8" хвостовика
Prestarter Pellet Non-Med - #50 (Pipestone)ПайпстоунSKU  8228https://pipevet.com/pre-starter-pellet-non-med-50-hubbard
Red Devil 1170 PLEXIGLASS Cutting TOOLCARDКрасный Дьяволhttps://www.amazon.com/dp
/B000BZZ1D0/?coliid=I3C0K3
AKD3TS75& colid=XJ78FAXD8
5BF& psc=1& ref_=lv_ov_lig_dp_it
Маркеры Sharpie | Маркеры для наконечников стамескаМаркерhttps://www.amazon.com/
Sharpie-Permanent-Markers
-Chisel-Classic/dp/B00006IFI
A/ref=sr_1_8?crid=2GD78WJ5COF
NN& ключевые слова=постоянно+маркер
s+assorted+colors& qid=16427831
06& sprefix=permanent+markers%
2Caps%2C129& sr=8-8
Размешивающая горячая плитаКорнинг100493-718
Пошевелительный магентVWR58948-138
STYLEZONE 10 деталей Прозрачные акриловые листы 8 x 10 дюймов 0,08 дюйма толщиной 2 ммStylezonehttps://www.amazon.com/dp/
B08GJYS4TT/?coliid=I11RLE
V42BKEFB& colid=XJ78FAX
D85BF& psc=1& ref_=lv_ov_lig_dp_it
Хирургический лотокAvantor10193-194
Мокрый лёдЛабораторный материал
Вершина деревянного карвигаИнструменты для резьбы по дереву для роторного инструментаhttps://www.amazon.com/
stores/page/28E50A85-D8C
1-4669-8272-D5D435EA126F

Ссылки

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Jelsing, J., et al. The postnatal development of neocortical neurons and glial cells in the Gottingen minipig and the domestic pig brain. J Exp Biol. 209 (Pt 8), 1454-1462 (2006).
  2. Conrad, M. S., Dilger, R. N., Johnson, R. W. Brain growth of the domestic pig (Sus scrofa) from 2 to 24 weeks of age: a longitudinal MRI study. Dev Neurosci. 34 (4), 291-298 (2012).
  3. Conrad, M. S., Dilger, R. N., Nickolls, A., Johnson, R. W. Magnetic resonance imaging of the neonatal piglet brain. Pediatr Res. 71 (2), 179-184 (2012).
  4. Dobbing, J. The later growth of the brain and its vulnerability. Pediatrics. 53 (1), 2-6 (1974).
  5. Sorby-Adams, A. J., Vink, R., Turner, R. J. Large animal models of stroke and traumatic brain injury as translational tools. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 315 (2), R165-R190 (2018).
  6. Sauleau, P., Lapouble, E., Val-Laillet, D., Malbert, C. H. The pig model in brain imaging and neurosurgery. Animal. 3 (8), 1138-1151 (2009).
  7. Huang, C., et al. Speckle contrast diffuse correlation tomography of cerebral blood flow in perinatal disease model of neonatal piglets. J Biophotonics. 14 (4), 2021(2021).
  8. Dobbing, J., Sands, J. Quantitative growth and development of human brain. Arch Dis Child. 48 (10), 757-767 (1973).
  9. Lossi, L., D'Angelo, L., De Girolamo, P., Merighi, A. Anatomical features for an adequate choice of experimental animal model in biomedicine: II. small laboratory rodents, rabbit, and pig. Ann Anat. 204, 11-28 (2016).
  10. Lind, N. M., et al. The use of pigs in neuroscience: modeling brain disorders. Neurosci Biobehav Rev. 31 (5), 728-751 (2007).
  11. Andersen, A. D., et al. Delayed growth, motor function and learning in preterm pigs during early postnatal life. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 310 (6), R481-R492 (2016).
  12. Desantis, S., Minervini, S., Zallocco, L., Cozzi, B., Pirone, A. Age-related changes in the primary motor cortex of newborn to adult domestic pig Sus scrofa domesticus. Animals (Basel). 11 (7), 2019(2021).
  13. Pond, W. G., et al. Perinatal ontogeny of brain growth in the domestic pig. Proc Soc Exp Biol Med. 223 (1), 102-108 (2000).
  14. Huang, C. C., Chen, Y. Y., Fang, Y. T., Chen, Y. C., Hung, C. M. Generating brain matrices for zebra finch brain sectioning using three-dimensional printing technology. J Neurosci Methods. 327, 108399(2019).
  15. Yamazaki, Y., Yuguchi, M., Honjo, B., Isokawa, K. Design and fabrication of customized brain slice matrices using CAD and 3D printing technology. PLoS One. 20 (1), e0317616(2025).
  16. Lattin, C. R., et al. A 3D-printed modular device for imaging the brain of small birds. J Neurosci Methods. 293, 183-190 (2018).
  17. Fleming, S. A., Monaikul, S., Mudd, A. T., Jacob, R., Dilger, R. N. Extraction and dissection of the domesticated pig brain. J Vis Exp. (170), e62030(2021).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на повторное использование текста или иллюстраций этой статьи JoVE

Запросить разрешение

Теги

Похожие статьи