Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Пробуждённая модель ишемического инсульта с нейропсихиатрическими осложнениями во время семидневного наблюдения

318 просмотров

DOI:

10.3791/69194

19 декабря 2025 г.

В этой статье

Краткое содержание

Предлагается новая модель фокального ишемического инсульта у бодрствующих крыс. Это достигалось путём введения эмболии воздуха во внутреннюю сонную артерию крыс. Развитие очагового ишемического инсульта было подтверждено окрашиванием мозга хлоридом трифенилтетразолия, функциональными тестами и оценкой физиологических параметров.

Аннотация

Трансляционная модель экспериментального инсульта у крыс, вызванного газовой эмболией, была создана для уточнения особенностей развития инсульта и оценки нейропротективного эффекта новых средств и проверенных препаратов. Этот умеренно трудоёмкий протокол позволяет наблюдать динамику быстрой гибели нейронов у бодрствующих животных, предоставляя уникальную возможность оценить острую фазу инсульта, включая делирий, а также отслеживать вегетативные нарушения, такие как изменения артериального давления, температуры тела и минутного дыхательного объёма. Атмосферный воздух (100 мкл) вводился путём инфузии через сосудистый катетер, установленный ретроградно в общую сонную артерию через наружную сонную артерию с помощью инфузионного насоса. Через двадцать четыре часа после эмболизации у животных наблюдаются стереотипные поведенческие, моторные нарушения и гистопатологические различия. К седьмому дню эксперимента наблюдалось значительное улучшение неврологического состояния, а результаты поведенческих тестов приблизились к значениям контрольных показателей. В то же время в ишемическом поражении наблюдается переход от нейтрофильной к макрофаговой инфильтрации. Предлагаемая модель может использоваться в доклинических исследованиях, поскольку она воспроизводит нейропсихиатрические осложнения постинсультного периода, а также соответствующие физиологические, функциональные и гистопатологические изменения.

Введение

Целью этого исследования было разработать модель очагового ишемического инсульта у бодрствующих крыс и достичь максимально близкого приближения этой модели к клиническим аспектам ишемического инсульта у людей. Как показали исследования Сёйланда и др., 62,6% пациентов проявляли значимые симптомы ишемического инсульта в бодрствующем состоянии, тогда как только 19% перенесли инсультпробуждения 1. Следовательно, наибольший интерес представляет возникновение бодрствующего состояния во время эмболизации церебральной артерии у животных. Классические модели, используемые для изучения очагового ишемического инсульта гол....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

Исследование проводилось в соответствии со стандартными операционными процедурами лаборатории и было одобрено Биоэтической комиссией Институционального комитета по уходу и использованию животных филиала Института биоорганической химии имени Шемякина-Овчинникова Российской академии наук (Протокол No 1016/25 от 17 января 2025 года). В этом исследовании использовались 28 самцов крыс Sprague-Dawley (SD) в возрасте от 10 до 12 недель, со средней массой тела 301 г и микробиологическим статусом специфического патогена без (SPF). Реагенты и используемое оборудование перечислены в Таблице материалов.

....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

Выживаемость и общее состояние
Сразу после введения воздушного пузыря у всех крыс наблюдалось нарушенное состояние и выраженный тремор в течение нескольких секунд, после чего следовало прекращение всей моторной активности и потеря сознания на 1–2 минуты. Некоторые животные теряли опору на лапах на 10-15 минут после прихода в сознание.

Выживаемость животных через 3 часа после КАЭ составляла 100%, но через 24 часа выживаемость снизилась до 80.......

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

MCAO — это распространённый метод моделирования фокального ишемического инсульта у крыс, который достигается за счёт образования тромба, локального спазма средней церебральной артерии и временной окклюзиифиламентом 2. Цель таких моделей — (1) достичь фокального апоптоза нейронной тканимозга 16 со стандартизированным объёмом поражения иобластью 17, (2) мониторинг неврологического дефицита животных в течение 2-7 дней

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Авторам нечего раскрывать.

Благодарности

Это исследование было поддержано Российским научным фондом, проект No 25-15-00037.

....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
3-компонентный шприц с иглой объёмом 2 мл  ЛЕЙКО52322223G
Одноинфузионный насос AladdinWorld Precision InstrumentsAL-1000
ЦипрофлоксацинPharmavet38977445% раствор ципрофлоксацина
Компьютеризированная система PowerLab 8/35 Дополнительные элементы3508-1090
ДезинApteka.ru0,5% хлоргексидин биглюконат в 70% этаноле
Цифровой термометрB.Well Swiss AGЛОТ 0413
Измеритель силы захвата на электронном динамометреBioMed Easy Technologies007231024415MC01
Набор ELISA для кальций-связывающего белка B с S100 (S100B)CLOUD-CLONE CORP. (CCC)SEA567Ra48T
Рыболовная лескаДиаметр 0,9 мм
Система газовой анестезииUGO BASILE 21100
Статистическое программное обеспечение GraphPadПризмаv.10
Режиссёр с канавкойFisher ScientificКаталог No 11-0012,7 см
ГепаринЭндофарм. Московский эндокринологический завод30122
ImageJНациональные институты здравоохранения и Лаборатория оптических и вычислительных приборов
Инсулиновый шприцПродукция больницы SFM1603030,5 мл, U-100, 30G
Внутривенный катетерKD MedicalG24
Изофлуран (Изофлурин)Vetpharma100 мл, 1000 мг/кг
Иммобилайзер для лабораторных животныхОткрытая наукаAE1001-R1
Световой микроскопZEISSAxio Scope.A1
Слайды для световой микроскопииThermo Scientific15442933
Медицинские полиэтиленовые микротрубкиScientific Commodities Inc.BB31695-PE/4Внутренний диаметр 0,76 мм
Медицинские стерильные марлевые салфеткиНовая жизнь 45x29 см
МикротрубкаSARSEDT AG & Рота KGS0443781,5 мл
Микропипетка Eppendorf Research plusЭппендорф200 и микро; L
Микроскопические стеклиFisher Scientific11562203
Микрохирургические щипцы (изогнутые)Казанский завод медицинских инструментовF0106
Микрохирургические щипцы (прямые)RWD Life ScienceF11029-11
Клинки микротомовThermo Scientific3052835MX35 Premier+
Система многообусловливающихСистемы TSE131202-10
Нейтральный буферизованный формалинхм1072024pH 6,8-7,2 
Хирургический шовный лавсан с неотасасывающимисяLintex2022-01
Офтальмологические ножницы для иридектомииCM InstrumenteAJ-410-05
Кислородный концентраторВооружённыйYYT327009607F-3L
Фосфатный буферAMRESCO2120C462
Наконечники пипттаServicebio200 и микро; L
Крысыполучено в питомнике лабораторных животных» Пушкино» (www.spf-animals.ru), Институт биоорганической химии имени Шемякина-Овчинникова Российской академии наук.
Холодильная лабораторная многофункциональная центрифугаЭппендорф5804 R
Rota-Rod Rotamex-5 COLUMBUS INSTRUMENTS210426
Ножницы METZENBAUM Medstandart-InstrumentMT-H-256
Хирургический материал для шваОТМЕНЕНО114/0042011124Kaproag 4/0
Хирургический столVetKormTorgВЕТБОТ STL-1, TD00472
ТелазолЗоетис67291350 мг/мл тилетамина и 50 мг/мл золазепама в 5 мл
Трифенилтетразолий хлоридDia-MTTC1809
КсилазинНИТА-ФЕРМА1512% гидрохлорида ксилазина в 50 мл

Ссылки

  1. Søyland, M. H., Tveiten, A., Eltoft, A., Øygarden, H., Varmdal, T., Indredavik, B., et al. Wake-up stroke and unknown-onset stroke: Occurrence and characteristics from the nationwide Norwegian Stroke Register. Eur Stroke J. 7 (2), 143-150 (2022).
  2. Li, Y., Zhang, J.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Теги