Этот протокол описывает хирургическую технику забора модели перфораторного лоскута человека на основе глубокой нижней педикулы эпигастральной артерии, предназначенную для экспериментальных исследований.
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
Этот протокол описывает хирургическую технику забора модели перфораторного лоскута человека на основе глубокой нижней педикулы эпигастральной артерии, предназначенную для экспериментальных исследований.
В последнее время методы сохранения, такие как введение цитопротекторных средств, перфузия машины ex vivo и переохлаждение, появились как стратегии для долгосрочного сохранения как стандартных, так и маргинальных органов путём смягчения ишемических и гипоксических повреждений. Хотя его применение в области васкуляризированной композитной аллотрансплантации (VCA) в основном ограничивается доклиническими исследованиями. На сегодняшний день большинство исследований, изучающих стратегии перфузии ВКА, опирались на животные модели, особенно на свиных или грызуновых композитах. Хотя эти модели дают ценные механистические инсайты, их анатомические, иммунологические и физиологические различия ограничивают воспроизводимость и трансляционную значимость для человеческих применений.
В этом протоколе подробно описывается каждый хирургический этап, необходимый для получения глубокого нижнего перфоратора эпигастрального перфоратора (DIEP) для консервационных исследований. Перфоратор перерезан над фасцией без субфасциальной диссекции, что даёт короткий, но достаточный педикул для катетеризации. Эта модель использует выброшенные ткани из стандартных процедур абдоминопластики, не представляя дополнительного риска для пациента. Определены критически важные шаги для того, чтобы обеспечить получение функционального лоскута без продления времени операции и угрозы безопасности пациентов. Затем проводится функциональная визуализация для подтверждения жизнеспособности лоскута перед экспериментальным применением, а также могут проводиться последовательные биопсии для отслеживания целостности тканей. Эта модель особенно подходит для исследований, связанных с использованием процедур VCA, сохраняющих мышцы, таких как частичная трансплантация лица, а также может иметь значение для изучения аутологичного сохранения свободного лоскута.
Васкуляризированная композитная аллотрансплантация (VCA) представляет собой перспективное реконструктивное решение для пациентов с комплексными дефектами тканей, особенно лица и верхнихконечностей 1. Однако VCA очень подвержен повреждениям, вызванным ишемией и реперфузией, что может снижать жизнеспособность трансплантата и долгосрочные последствия2. В этом контексте методы сохранения, такие как инъекции цитопротекторных агентов, перфузия машины ex vivo и переохлаждение, стали способными продлить время сохранения, оптимизировать качество трансплантата и обеспечить оценку жизнеспособности передтрансплантацией 3,4,5,6,7. Хотя нормотермическая экс виво перфузия твердых органов была успешно перенесена из экспериментальной лабораторной техники в клиническую практику за последнеедесятилетие8 с многообещающими результатами, она в основном ограничивается исследовательской практикой в области VCA9.
На сегодняшний день большинство исследований, изучающих протоколы перфузии ВКА, опирались на животные модели, особенно на свиных или грызуновыхкомпозитах 10. Хотя эти модели дают ценные знания, они по своей сути ограничивают воспроизводимость и трансляционную значимость из-за анатомических, иммунологических и физиологическихразличий 11,12. Модели человеческих тканей дают более релевантные данные, но свежие ткани доноров с мозговой смертью чрезвычайно труднодоступны для исследовательских целей, требуя сложной логистики, строгого регуляторного одобрения и вызывая этическиевопросы 13,14. Идеальной альтернативой может быть нетрупная, этически приемлемая модель лоскута на основе человека, которая не несёт сложности или риска полноценной процедуры VCA и полностью безопасна для пациента. Важно, что он должен быть легко доступен для воспроизводимых и масштабируемых исследований.
Здесь описывается модель глубокого нижнего перфоратора эпигастрального перфоратора (DIEP) для исследований сохранения VCA, с использованием отброшенных тканей после абдоминопластики без дополнительного риска для пациента.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Все пациенты получили стандартную гуманную помощь в соответствии с Хельсинкской декларацией, а протокол был утверждён институциональным этическим комитетом (проект No IRB00014528_2025_32). Пациент предоставил информированное согласие на использование выброшенной ткани в исследовательских целях.
1. Предоперационный уход
ПРИМЕЧАНИЕ: Эти кожные перфораторные лоскуты, исключая фасцию и мышцы, образуются в результате хирургических отходов у пациентов, чаще всего после бариатрии, и могут быть извлечены только в случаях предыдущей дермолипектомии с предсказуемой пуповиной (то есть значительной абдоминальной паннусом). Запланированная липосакция во время процедуры является критерием исключения. Сопутствующее восстановление диастаза не является противопоказанием, так как эта процедура проводится после удаления лоскута. Брюшной паннус обычно обеспечивает хотя бы частичное покрытие лобковой области. У пациентов не должно быть истории тромбоэмболических событий, а индекс массы тела (ИМТ) должен быть ниже 30 кг/м², так как более высокие значения связаны с ожирением и неблагоприятным соотношением риска и пользы при плановых нежизненно важных процедурах под общей анестезией. Предыдущие операции на брюшной полости, за исключением липосакции, обычно не являются противопоказанием, при условии, что перфоратор выявлен с помощью доплеровского осмотра или непосредственно визуализирован во время операции. Такую процедуру также следует избегать при настоящих клинических односторонних реконструкциях DIEP с использованием свободного лоскута, которые и так являются длительными и сложными операциями, где дополнительные предоперационные шаги были бы нерациональны и увеличивали бы процедурный риск.

Рисунок 1: Предоперационная оценка перед постбариатрической абдоминальной дермолипектомией с забором лоскута DIEP. (A) Предоперационная маркировка с использованием акустического доплера и дермографической ручки для идентификации и контура параумбилических перфораторов по обе стороны средней линии. (B) Хирург демонстрирует обвязку кожи брюшной полости и подкожной ткани, подлежащей резецации, выделяя адипокутанный панникулус перед разрезом вдоль горизонтальной линии маркировки. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы увидеть увеличенную версию этой фигуры.
2. Закупка клапанов

Рисунок 2: Интраоперационный вид операции абдоминальной дермолипектомии с скелетизацией глубоко нижней перфораторной педикулы эпигастральной перфорации. На изображении показано оперативное поле перед супраумбиликальной диссекцией и продольной инфраумбилиальной делением. Два доминирующих двусторонних глубоко нижних эпигастральных перфораторов обнажают и подсвечивают хирургическими инструментами. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы увидеть увеличенную версию этой фигуры.

Рисунок 3: Интраоперационный обзор после надумбиличной диссекции, показывающий двусторонние глубокие нижние перфораторы эпигастральной кости. Перфораторы не лигируются, и их подфасциальный путь и длина лучше оцениваются при мягком натяжении (белые стрелки). Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы увидеть увеличенную версию этой фигуры.

Рисунок 4: Интраоперационный вид, показывающий DIEP-лоскуты, очерченные на коже эллиптической формой перед перевязкой. (A) Кожная лопатка регулируется и обводится эллиптической формой с помощью дермографического пера (белый круг) для обеспечения включения перфоратора вдоль медиального края лоскута по обе стороны адипокутанного панникула. (B) Увеличенный вид, показывающий контур DIEP и перфоратор, отмеченный «x» согласно дооперационному доплеровскому отображению (белая стрелка). Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы увидеть увеличенную версию этой фигуры.
Дополнительный рисунок 1: Тяга вниз верхнего брюшного лоскута помогает определить количество избыточной кожи, которую нужно удалить. Длинный конец средней линии невсасывающегося шва, соединяющего супраумбиливальную и лобковую области, используется в качестве ориентира. Дермографической ручкой проведите линию резекции вдоль линии шва (белые стрелки) на избыточном адипокутанном панникуле. Протяните эту линию вбок к каждому переднему верхнему подвздошному позвоночнику. Заскрылки DIEP расположены ниже этой отмеченной линии резекции. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы скачать этот файл.

Рисунок 5: Интраоперационный вид глубоких перфораторных лоскутов верхней нижней эпигастральной артерии (DIEP) во время забора забора после перевязки педикулы. (A) Лоскут DIEP, размером примерно 10 см × 6 см, обведён хирургическим маркером после локализации перфоратора. (B) Разрез кожи и забор лоскута выполняются по заранее установленным меткам. Начальный разрез выполняется лезвием No15, затем вскрытие с использованием монополярного электрокоагуляторного средства при температуре примерно 50-60 °C и 80 Вт в режиме свертывания, когда избыточная кожно-жировая ткань остаётся прикреплённой к пациенту. После полного отсоединения ткани используется стерильная, одноразовая батарейная одноразовая ручка для коагуляции (большой кончик, примерно 1 200 °C). Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы увидеть увеличенную версию этой фигуры.
3. Подготовка клапана

Рисунок 6: Вид после забора исследовательского лоскута DIEP. (A) Полученный лоскут DIEP показан с рассечением и изоляцией сосудистого педикула с помощью микрохирургических щипцов. Конец артерии обрезается на несколько миллиметров для получения аккуратного разреза, а просвет аккуратно открывается с помощью микродилататорных щипцов. (B) Крупный план, на котором микрохирургические щипцы закрепляют доминирующую перфораторную артерию, с катетером, введённым в просвет 24G для инъекции контрастного вещества. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы увидеть увеличенную версию этой фигуры.

Рисунок 7: Катетеризация педикулы лоскута DIEP. (A) Катетер закрепляется швом 5-0, аккуратно завязанным, чтобы не закрывать просвет педикула. (B) Вид катетера без прикреплённого шприца, показывающий степень введения катетера в сосудистый просвет. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы увидеть увеличенную версию этой фигуры.

Рисунок 8: Флюороскопия лоскута DIEP после уборки, демонстрирующая сосудистую анатомию. (A,B) Контрастное вещество вводится через катетер размером 24 G в доминантную перфораторную артерию, показывая разветвленный узор и сосудистую область, подтверждая жизнеспособность лоскута на двух разных лоскутах. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы увидеть увеличенную версию этой фигуры.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Одиннадцать лоскутов были взяты у шести женщин, включённых в это исследование. Два опытных пластических хирурга, опытные в лоскутной хирургии и абдоминопластике, провели вскрытие. У одного пациента лоскут был взят в одностороннем порядке из-за проблемы с вскрытием. Собранные закрылки имели средний вес 198,6 ± 24,4 г (n = 11) и средний размер 10 см × 6 см, что соответствовало требованиям к выборке для исследования сохранения, в котором использовались эти закрылки. Длина педикулы, измеренная при лёгком натяжении, составлял...
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Человеческие модели помогают связать результаты из исследований на животных с клинической практикой, повышая актуальность и предсказательность доклиническихисследований 16,17,18. Они должны быть тщательно разработаны для обеспечения безопасности и этического соответствия, часто ограничивая масштаб и инвазивностьэкспериментов 17. На четырёх собранных лоскутах дополнительное вскрытие не требовалось, и в одн...
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Авторам нечего раскрывать.
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| Шприц Luer-Lok объемом 1 мл и 5 мл | Бектон Дикинсон | https://www.bd.com/en-us/products-and-solutions/products/product-page.309646 | |
| 11,5" Средний и малый премиальный Surgiclip II Auto Suchure Salsel Clip | Ковидьен | Н/Д | |
| 22– Тупой кончик канюли сосуды 24 G | Medtronic Inc | Н/Д | |
| 5-0 шелковый шов | Н/Д | Любой совместимый шов | |
| Одноразовая батарейная одноразовая коагуляторная ручка; | Helpmedical, Европа | Н/Д | 1200 градусов; C, с большим наконечником |
| Щипцы Адсона | MPM | 106-2112A | |
| Биполярные коагуляционные щипцы | Олсен | 20-1320I | |
| Одноразовый скальпель #15 и #21 | Склар | Н/Д | |
| Eosin | Microm Microtech | U/C0363 | |
| Ретракторы Фарабёфа | Медикта Инструментс | Н/Д | |
| Коагуляция с тонкой иглой | Cormedica | Н/Д | |
| OEC MiniView Max | GE Healthcare | Н/Д | Система флюороскопии |
| Дилататоры с щипцами | WPI | 15910 | |
| Гематоксилин | Microm Microtech | U/C0303 | |
| Иогексол 300 мг I/mL | GE Healthcare Canada Inc. | Н/Д | |
| Микроножницы | WPI | 504492 | |
| Монополярная диатермия Valleylab | Medtronic Inc | ||
| Неионная йодированная контрастная среда, Omnipaque 300 мг I/mL | GE Healthcare | Н/Д | |
| Портативный акустический доплер, 8 МГц | Parks Medical Electronics | https://www.parksmed.com/ | |
| Солевый раствор 0,9% | GenDepot | S0600-101 | |
| Стандартный набор инструментов для пластической хирургии | Эскулап | Н/Д | включая рукоятку скальпеля No3, ножницы Метценбаума и Майо, щипцы Адсона и Гиллиса, ножницы для препарирования, гемостаты и держатели для игл. |
| Козубые ножницы | Surtex | 102-4109 | |
| Хирургическая маркировочная ручка | Кардинальное здоровье | 212PR | |
| Швы Ethilon 4.0 и 3.0 | Ethicon | 1667G | |
| Тканевые щипцы | MPM | 106-0511 |
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.