Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Описание случая
* These authors contributed equally
Этот протокол описывает поэтапный диагностический процесс для молодых, атипичных пациентов с аллергическим бронхолегочным аспергиллезом (ABPA), не реагирующей на антибактериальную терапию. Он включает бронхоскопию, анализ промывающей жидкости бронхоальвеолярной жидкости (BALF) и целенаправленное секвенирование следующего поколения (tNGS) для обнаружения чтений последовательностей Aspergillus fumigatus с информированным согласием и этическим одобрением.
Этот протокол устанавливает чёткую основную цель: разработать структурированный, действенный диагностический рабочий процесс, позволяющий точно дифференцировать аллергический бронхолегочный аспергиллез (ABPA) от других хронических респираторных заболеваний с аналогичными проявлениями у молодых пациентов с рефрактерными респираторными симптомами. В этой популяции ABPA часто ошибочно диагностируется из-за неклассических клинических признаков, что приводит к предотвратимым задержкам в таргетной терапии и постоянной диагностической неопределённости в рутинной клинической практике. Диагностический процесс разработан как интегрированный, многоступенчатый подход, включающий комплексную клиническую оценку, высокоразрешающую компьютерную томографию (HRCT), бронхоскопию и анализ бронхоальвеолярной жидкости (BALF), включая галактоманнан анализ, а также целенаправленное секвенирование следующего поколения (tNGS) для обнаружения Aspergillus fumigatus Последовательность читается. Эти компоненты функционируют как вспомогательные инструменты в целостной системе, направляя клиницистов в последовательной оценке атипичных случаев ABPA. Для демонстрации клинической применимости рабочий процесс был реализован у 22-летнего мужчины с 10-летним анамнезом рецидивирующего кашля и выделения мокроти, который изначально был ошибочно диагностирован с инфекционным бронхоэктазом и не реагировал на антибактериальную терапию. Применение этого рабочего процесса позволило интегрировать серийные результаты HRCT, тестирование на BALF, результаты tNGS для чтения последовательностей Aspergillus fumigatus и базовые серологические данные, что в конечном итоге привело к окончательному диагнозу ABPA. Этот протокол подчёркивает, что мультимодальная диагностическая стратегия может повысить диагностическую уверенность у молодых пациентов с рефрактерными респираторными симптомами и повышенным уровнем IgE в сыворотке, снижая диагностическую неоднозначность и способствуя своевременному началу таргетной противовоспалительной и противогрибковой терапии для улучшения клинических результатов.
Основная цель данного случая — проиллюстрировать структурированный диагностический рабочий процесс для выявления ABPA у молодых пациентов с атипичными клиническими проявлениями и историей ошибочных диагнозов.
ABPA — это аллергическое заболевание легких, вызываемое видами Aspergillus, особенно Aspergillus fumigatus. Клинические проявления сложны и разнородны, в основном характеризуются эпизодами, похожими на астму, повторяющимися инфильтративными тенями на лёгочной визуализации и бронхоэктазом. В 1952 году британский учёный Хинсон впервые описал этосостояние 1. Как п....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Это исследование было одобрено Этическим комитетом больницы Минхан, Университет Фудань (номер одобрения: 2025-018-01K). Письменное информированное согласие получалось от пациента перед всеми клиническими процедурами, в соответствии с этическими принципами Хельсинкской декларации. Все данные пациентов были анонимизированы, и в этом отчёте не было раскрыто никакой идентифицируемой личной информации. Используемые реагенты и оборудование перечислены в Таблице материалов.
1. Оценка перед лечением и начало эмпирической терапии
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Клинический ход пациента показал значительное улучшение после таргетной терапии ABPA, с систематическими изменениями в диагностических биомаркерах, радиологических результатах и клинических симптомах.
Пациенту начали принимать метилпреднизолон (40 мг/день) и вориконазол (200 мг каждые 12 часов). В течение 10 дней наблюдалось заметное улучшение кашля, экспекторации и одышки. Последующие ГРКТ (рисунок 3) показали разрешение слизисты.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
В Китае бронхоэктаз — распространённое хроническое респираторное заболевание с относительно высокой частотой. Среди людей в возрасте 40 лет и старше постинфекционная бронхоэктаза встречаетсячаще 7. Хотя аллергический бронхолегочный аспергиллез (ABPA) не является редкостью в клинической практике, ошибочные диагнозы и пропущенные диагнозы остаются частыми из-за неспецифических описаний симптомов, несогласованных диагностических критериев и других факторов
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Авторам нечего раскрывать.
Эта работа была поддержана проектом интеграции медико-общественного здравоохранения района Минхан: оценка риска и управление группами высокого риска при туберкулёзе лёгочных (2025).
....Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| Aspergillus-специфический IgE Assay Kit | Thermo Fisher Scientific, США | ELISA Aspergillus sIgE Kit | Ферментно-связанный иммуносорбентный анализ для обнаружения специфического IgE, специфичного к Aspergillus; срез: >0,35 кМА/л; Результат пациента: 2,8 кМА/л |
| Aspergillus Galactomannan Assay Kit | Bio-Rad Laboratories, США | Platelia Aspergillus Ag EIA | Иммуноанализ ферментов (EIA) для обнаружения Aspergillus galactomannan; Результат сыворотки: 0,016 ODI, BALF: 3,344 ODI; Край: >0.5 ODI |
| Aspergillus fumigatus-специфический IgG-анализ | Thermo Fisher Scientific, США | ELISA Aspergillus fumigatus IgG-набор | Ферментно-связанный иммуносорбентный анализ для обнаружения специфического IgG-специфического Aspergillus fumigatus; отсечение: >1,0 AU/мл; Результат пациента: 1,6 AU/mL |
| Набор для обработки кислотоустойчивых бацилл | Соларбио, Китай | AS-1010 | Диагностические реагенты/тесты |
| Амброксол | Boehringer Ingelheim International GmbH, Китай | ABX-30 | Терапевтические препараты |
| Автоматизированный биохимический анализатор | Roche Diagnostics, Швейцария | COBAS 8000 | Тестирование сыворотки IgE/эозинофилов |
| Комплект труб для коллекции BAL | Medtronic plc, Китай | 49445 | Образцы материалов для коллекции |
| Контейнер для сбора BALF | Корнинг, США | 352070 | Образцы материалов для коллекции |
| Бронхоскоп | Olympus Corporation, Япония | BF-1TQ290 | Отбор проб нижних дыхательных путей |
| КТ грудной клетки | Сименс, ГЕР | Сила определения соатома | Сканер компьютерной томографии высокого разрешения (HRCT), используемый для лёгких |
| Реагенты для тестирования чувствительности к лекарствам | BD, США | BD BBL Sensi-Disc | Диагностические реагенты/тесты |
| Система электронных медицинских карт | Корпорация Cerner, США | Миллениум | Управление данными пациентов |
| Грибковый (1,3)-&бета;-D-глюкан анализ | Ассоциации Кейп-Кода, Китай | Фунгунгителл | Количественный хромогенный анализ для обнаружения грибков (1,3)-и бета;-D-глюкана; нормальный диапазон: < 20 пг/мл; Результат пациента: 25,1 пг/мл |
| Гибкий бронхоскоп | Олимп, Япония | BF-1T260 | Бронхоскоп с рабочим каналом 2,8 мм; используется для осмотра дыхательных путей и сбора BALF из верхнего заднего сегмента правой доли |
| Флуконазол | Pfizer Inc, США | FLC-200 | Терапевтические препараты |
| Анализатор гематологии | Sysmex | XN-9000 | Автоматизированный гематологический анализатор, используемый для подсчёта эозинофилов периферической крови; Результат предварительного лечения пациентов: 850 клеток/и мю; L |
| Программное обеспечение для анализа изображений HRCT | Siemens Healthineers, Германия | syngo.via | Количественная оценка поражения лёгких |
| Метилпреднизолон | Pfizer Inc, США | MP-40 | Терапевтические препараты |
| Инкубатор микробной культуры | Thermo Fisher Scientific, США | 3110 | Микробная культура BALF |
| Piperacillin– Тазобактам | Pfizer Inc, США | TZP-4.5 | Терапевтические препараты |
| Преднизолон | Pfizer Inc, США | PDN-5 | Терапевтические препараты |
| Панель респираторных патогенов (SARS-CoV-2, EBV) | BGI Genomics, Китай | 2019-nCoV/EBV-001 | Диагностические реагенты/тесты |
| Комплект для анализа сыворотки Total IgE | Бекман Коултер, Китай | Набор Immage 800 IgE | Количественный набор ELISA для измерения общего IgE в сыворотке; нормальный верхний предел: 100 МЕ/мл; используется для выявления повышенного IgE (1400 МЕ/мл) у пациента |
| Медиа культуры мокроты | Thermo Fisher Scientific, США | TSA-100 | Диагностические реагенты/тесты |
| Стерильный физиологический раствор для промывания | Бакстер, Китай | 0,9% NaCl-500mL | Образцы материалов для коллекции |
| Целевая платформа секвенирования следующего поколения (tNGS) | BGI Genomics, Китай | MGISEQ-2000 | Метагеномная секвенирующая платформа для анализа BALF ДНК; порог обнаружения: ≥ 10 чтений последовательностей; выявлено 55 последовательностей Aspergillus fumigatus |
| Набор для подготовки библиотеки tNGS | Illumina, США | Набор подготовки к библиотеке ДНК MGIEasy | Набор для подготовки библиотеки для секвенирования микробной ДНК; использовался для обработки образцов BALF до tNGS |
| Программное обеспечение для анализа данных tNGS | Illumina, США | BaseSpace | Выравнивание/идентификация чтения последовательностей |
| Платформа секвенирования tNGS | Illumina, США | NextSeq 550 | Платформа секвенирования tNGS |
| Вориконазол | Pfizer Inc, США | VRC-200 | Терапевтические препараты |
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.