Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Исследовательская статья
Мы предлагаем одноцентровый, валидированный патологоанатомическим рабочим процессом для пациенток с раком молочной железы (BC), у которых развивается второй первичный рак лёгких (pLC). Более крупный размер первичной опухоли и более высокий уровень Ki-67 определяют риск, тогда как когортные OS и iDFS остаются сопоставимыми. Результаты подтверждают стратифицированную визуализацию грудной клетки по риску и раннюю патологическую корреляцию при последующем наблюдении.
Мы провели ретроспективное исследование в одном центре пациентов с раком молочной железы (BC), у которых развился второй первичный рак лёгких (pLC) (BC-pLC; n = 54), в отличие только от BC (n = 216), которые проходили операцию с лечебным намерением с 2012 по 2017 год с последующим наблюдением до 30 июня 2023 года. Сравнивались клиникопатологические переменные; многопеременные логистические регрессионные оценочные корреляты BC-pLC; выживаемость оценивалась с помощью оценок Каплана-Майера и моделей пропорциональных рисков Кокса. По сравнению с BC, когорта BC-pLC имела более высокую частоту эстрогеновых рецептор-отрицательных (ER-отрицательных) и прогестероновых (PR-отрицательных) опухолей, а также больше опухолей с положительными Ki-67; после корректировки мультиплицитности (Бонферрони) негативность ЭР и положительные показатели Ki-67 оставались значимыми, тогда как рецептор фактора роста эпидермса 2 (HER2) человека — нет. В многопеременных анализах более крупный размер опухоли (>2 см) и положительный показатель Ki-67 были независимо связаны с BC-pLC (отношение шансов [OR] 3,02, 95% CI 1,29-7,38; OR 3,10, 95% CI 1,32-7,49). На уровне когорты различия в общей выживаемости (OS) и инвазивной безболезненной выживаемости (iDFS) между BC-pLC и BC не были статистически значимы после корректировки. Анализы, стратификационированные по биомаркерам, показали ухудшение OS при ER-отрицательных опухолях и номинально лучший iDFS для Ki-67-отрицательных опухолей. Опухолевая нагрузка и пролиферативная активность могут направлять стратифицированный мониторинг грудной клетки и раннюю патологическую корреляцию, чтобы отличить метастазы от новых первичных препаратов во время наблюдения за контрацепцией.
Рак молочной железы (BC) — один из самых распространённых злокачественных заболеваний в мире, и достижения в скрининге и терапии продлили выживаемость, увеличивая вероятность множественных первичных заболеваний; в частности, риск второго первичного рака лёгких (пЛК) выше у выживших с BC, чем у общейпопуляции 1. Рак лёгких (ЛК) остаётся ведущей причиной смертности от рака, при этом сохраняется устойчиво низкий уровень выживаемости за 5 лет, несмотря на прогресс в терапии 2,3. Всё чаще признаются специфические закономерности по полу: доля LC у женщин выросла, а опухоли у женщин чаще содержат действующие драйверные изменения, такие как мутации EGFR 4,5. Гормональная среда (например, эстрогеновая сигнализация) и возраст — оба установленных канцерогенных фактора — могут способствовать повышенному риску ЛК, наблюдаемому у выживших с противозачаточными, наряду с общим воздействием (табак, радиация, семейная история), эффектами, связанными с лечением, наследственной восприимчивостью и перекрывающимися онкогенными путями (EGFR, KRAS, TP53, BRCA1)6.
БК с вторым первичным ЛК (БК-пЛК) может проявляться синхронно (обнаруживается во время диагностического обследования) или метахронно (возникает через несколько месяцев или лет после БК)7. На практике диагностика и лечение — это сложные задачи. Значительная часть случаев сначала отмечается как легочные узлы на рутинной КТ грудной клетки после лечения контрацептивами, однако рентгенологические проявления pLC и легочных метастазов от противозачаточных часто пересекаются, что приводит к первоначальной ошибке классификации и задержкам в окончательной диагностикетканей 8,9. Примерно треть случаев BC-pLC синхронны (диагностический интервал <6 месяцев)10. Секвенирование лечения (сначала с грудью против лёгких) может влиять на риск периоперационного периода и варианты адъюванта, однако стандартизированные рекомендации остаются ограниченными, а выживаемость за 5 лет варьируется в зависимости от серий, отчасти отражая различия в отборе и ведении лечения.
Многоцентровые реестры обладают широтой и статистической возможностью, но ретроспективные анализы в одном центре обеспечивают уникальную глубину: гармонизированные пути визуализации, единообразные патологоанатомические процессы и оценка специализированной мультидисциплинарной командой обеспечивают тонкую клиникопатологическую валидацию с внутренне согласованным долгосрочнымнаблюдением 11. Эти особенности особенно ценны при различии внутригрудных метастазов от второго первичного метастаза, где небольшие ошибки классификации могут искажать результаты и решения о лечении. Однако мы признаём, что дизайн с одним центром ограничивает обобщимость относительно когорт масштабарегистра 12.
Практическая применимость. Количественно оценивая клиникопатологические корреляции BC-pLC (например, размер первичной опухоли BC и пролиферативный индекс Ki-67) и сообщая о выживаемости с чёткими знаменателями и размерами эффекта, данное исследование направлено на поддержку стратифицированного КТ грудной клетки по риску, более раннего междисциплинарного обзора неопределённых узлов и стратегий приобретения тканей, направленных на различение метастазов от новыхпервичных 13,14. В условиях, где результаты визуализации неоднозначны, легко доступные клиникопатологические сигналы могут приоритизировать пациентов для ускоренной патологической корреляции.
На этом фоне мы стремились определить клиникопатологический профиль BC-pLC, выявить факторы, связанные с его возникновением, и оценить прогностические последствия с помощью моделей Каплана-Мейера и Кокса для общей выживаемости (OS) и инвазивной безболезненной выживаемости (iDFS). Чтобы прозрачно позиционировать вклад дизайна с одним центром, мы дополняем первичный анализ интервально-стратифицированными и скорректированными по лечению моделями и чётко указываем методологические преимущества и ограничения.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Это ретроспективное исследование было одобрено комитетом по институциональной этике 2024YX070 и проведено в соответствии с Хельсинкской декларацией. Учитывая неинтервенционный, деидентифицированный характер набора данных и минимальный риск, информированное согласие было отменено согласно институциональной политике. Данные хранились на защищённых, контролируемых доступом серверах, а анализ использовал анонимизированный, заблокированный набор данных с проверяемым следом и заранее заданной датой заморозки данных.
Дизайн и окружение исследования
Мы провели ретроспективное когортное исследование с одним центром, включающее пациентов с раком молочной железы (BC), у которых развился второй первичный рак лёгких (pLC) (BC-pLC), а также у одновременных пациентов с только противозачаточными. Все пациенты прошли операции с целью лечения с января 2012 года по январь 2017 года, с последующим наблюдением до 30 июня 2023 года. Когорта BC-pLC требовала патологического подтверждения как первичного рака рака лёгких, так и первичного рака лёгких; в когорту с К были только пациенты с первичной противозачатой. Сопоставление баллов по склонности не проводилось и признаётся ограничением; Для снижения смещения отбора ковариаты были заранее определены для многопеременной корректировки и отражаются прозрачно. Синхронный BC-pLC был определен как диагностический интервал ≤6 месяцев между первичными препаратами, а метахронный BC-pLC — >6 месяцев. Схема потока, обобщающая скрининг, исключения, включение и анализы, представлена на рисунке 1.
Критерии отбора и рассмотрение дела
Допустимые участники были в возрасте ≥18 лет с патологически подтверждённой ранней стадией первичных противозачатов, доступными основными клиникопатологическими переменными, визуализациями для обзора и блоками/слайдами для центрального патологического обзора при показаниях. Пациенты исключались, если у них было одновременное злокачественное образование в другом участке, наличие рентгенологических или патологических признаков метастазирования лёгких от БК, метастатического или рецидивирующего рака при диагнозе индекса, либо неполных данных наблюдения. Классификация поражений лёгких как первичного рака лёгких, а не метастатического BC, основывалась на гистоморфологии и, при доступности, иммунофенотипическом профиле, соответствующем происхождению лёгких (например, TTF-1/Napsin A для аденокарциномы и p40 для плоскообразной дифференцировки). Несогласованные или неопределённые случаи разрешались междисциплинарным консенсусом (хирургия молочной железы, торакальная хирургия, радиология, патология).
Протокол визуализации и наблюдение
Во время лечения при противозачаточной диагностике визуализация грудной клетки следовала институциональным методам, включавшим базовую стадию КТ при постановке диагноза и КТ наблюдения обычно каждые 6-12 месяцев в первые 2-3 года, а затем ежегодно или раньше, если симптомы или аномальные находки вызывали визуализацию. Параметры получения стандартизировались в соответствии с радиологическими протоколами. Поскольку интенсивность наблюдения может влиять на обнаружение и распределение стадий, потенциальная смещённость обнаружения/времени подготовки была устранена в анализе чувствительности с учётом интенсивности изображения и календарного периода.
Патологический рабочий процесс и иммуногистохимия
Образцы опухоли фиксировались в нейтральном буферном формалине, 4 %, обычно толщиной ткани 6-24 мин/мм (обычно 6-24 часа для рутинных образцов), обезвоживались и встраивались с парафином перед сечением. Секции диаметром 3–4 мкм были вырезаны и креплены на заряженных затворах. Извлекательное извлечение эпитопов под нагревом проводилось с использованием либо буфера цитратов (pH 6,0), либо буфера EDTA (pH 9,0) при 95-100 °C примерно в течение 20 минут, после чего охлаждали при комнатной температуре в течение 10 минут. Первичные антитела к ER, PR, HER2 и Ki-67 применялись согласно валидированным лабораторным протоколам с типичной инкубацией 30-60 минут при комнатной температуре, вторичным обнаружением на основе полимеров и разработкой DAB в течение 5-10 минут; Стекла окрашивалась гематоксилином в течение 30-60 секунд, обезвоживалась, очищалась и устанавливалась. Положительные результаты ER и PR определялись как ≥1% окрашивание ядра опухолевых клеток. HER2 соответствовал критериям ASCO/CAP 2018 года (3+ по IHC или амплификация с помощью in situ гибридизации при 2+ и неоднозначном). Ki-67 был дихотомизирован при заранее заданном пороге в 14%. Два сертифицированных патолога независимо провели все слайды, и расхождения были устранены консенсусом для стандартизации оценки.
Условия хранения биообразцов
Блоки с фиксированным формалином и с добавлением парафина (FFPE) хранились при контролируемой комнатной температуре (18-25 °C), сухой и тёмной, при поддержании влажности окружающей среды ниже 60%. Блоки сохранялись в течение ≥10 лет согласно институциональной политике, а повторная вырезка из исходного блока проводилась всякий раз, когда возраст сечения превышал заранее установленные окна устойчивости. Незапятнанные секции (3–4 мкм) хранились в герметичных затворных коробках с осушителем, защищённых от света. Для иммуногистохимии (ER, PR, Ki-67) неокрашиваемые препараты хранили в холодильнике при 2-8 °C и окрашивались в течение 8 недель после сечения; Слайды старше этого порога были отброшены и вырезаны заново. Для гибридизации in situ /подтверждения FISH неоднозначных результатов HER2 неокрашенные стекли использовались в течение 2-4 недель после сечения при хранении при 2-8 °C или заново разрезались, если они были старше. Температуры хранения и даты секционирования фиксировались в лабораторной информационной системе, и любые отклонения приводили к повторному нарезу до начала окрашивания.
Сбор и управление данными
Демографические и клиникопатологические переменные были извлечены из электронной медицинской карты согласно заранее определённому словару данных. Переменные включали возраст диагноза, статус менопаузы, гипертонию, семейный анамнез, размер первичной опухоли, гистологический подтип и степень, статус узлов и количество обследуемых узлов, лимфоваскулярное вторжение, а также статус биомаркеров для ER, PR, HER2 и Ki-67. Гистологические подтипы и стадирование ТНМ были описаны описательно в Таблице 1 и Таблице 2 с уточняющими сносками для сокращений и определений подгрупп. Процедуры качества данных включали проверку дальности и логики, а также проверку источника вторым рецензентом. Анализы воспроизводились из заблокированного набора данных с задокументированной кодовой книгой и манифестом.
Результаты и последующие действия
Общая выживаемость (ОС) измерялась от даты постановки диагноза рака до смерти по любой причине или последнего наблюдения. Выживаемость без инвазивных заболеваний (iDFS) рассчитывалась от окончания лечебного лечения до возникновения инвазивного рецидива, развития нового первичного злокачественного образования или смерти от несвязанных причин. Пациенты, живущие без событий, подвергались цензуре при последнем контакте. Последующее наблюдение проводилось через телефонные контакты, визиты в клинику и электронную проверку медицинских карт до 30 июня 2023 года. Смертность по причине не рассматривалась; поэтому анализ конкурирующих рисков не проводился, и это ограничение отмечено в обсуждении.
Статистический анализ
Непрерывные переменные оценивались на нормальность с помощью теста Шапиро-Уилка и суммировались как медиана (IQR) или среднее (SD) по мере необходимости, а категориальные переменные — как n (%). Групповые сравнения использовали тест t или тест ранга Уилкоксона, а также тест хи-квадрата или точный тест Фишера, где это было уместно. Для коррелятов BC-pLC за однопеременной логистической регрессией следовала многопеременная логистическая регрессия с использованием априорных переменных (категория размера опухоли, ER, PR, Ki-67), с учётом событий на переменную, коэффициентов инфляции дисперсии для коллинеарности и стандартной диагностики пригодности. Выживаемость оценивалась с помощью оценок Каплана-Мейера и тестов логарифмического ранга, а также с моделями пропорциональной опасности Кокса, указывающими возраст, размер опухоли, статус узлов, ER, PR, HER2, Ki-67 и когорту (BC-pLC против BC). Предположения пропорциональных опасностей оценивались с использованием остаточных данных Шёнфельда. Отсутствующие данные обрабатывались с помощью анализа полного случая, и степень отсутствующих отражается в знаменателях. При множественных сравнениях биомаркеров между ER, PR, HER2 и Ki-67, посемейный контроль ошибок использовал корректировку Бонферрони с скорректированным ɑ 0,0125, а также сообщаются номинальные двусторонние значения P. Все значения P в тексте и таблицах сочетаются с размерами эффектов и 95% доверительными интервалами.
Анализ чувствительности и устойчивости
Устойчивость изучалась с помощью интервально-стратифицированных анализов выживаемости, в которых синхронные случаи противопоставлялись метахронным случаям, классифицируемым как ≤12 месяцев, 13–36 месяцев и >36 месяцев, при этом скорректированные коэффициенты риска были представлены вместе с 95% доверительными интервалами и номинальными значениями P. Для смягчения смещения гарантированного времени был использован 12-месячный знаковый подход, когда послеоперационные или адъювантные терапии могли бы исказить оценки по времени до событий. Дополнительные модели, скорректированные для классов лечения, где это возможно, включая тип хирургии на лёгких, воздействие лучевой терапии и категории системной терапии (химиотерапия, таргетная терапия, иммунотерапия). Анализ чувствительности дополнительно учитывал интенсивность наблюдения на визуализации и календарный период для устранения потенциального выявления и секулярных тенденций.
Контрольные точки воспроизводимости
Ключевые контрольные точки, влияющие на воспроизводимость, включали явные критерии определения, отличающие первичный рак лёгких от метастатического рака противозачаточных, заранее определённые пороги для ER, PR, HER2 и Ki-67, двойственные независимые патологические чтения с консенсусным разрешением, прозрачное отчётство об интенсивности наблюдения визуализации и априорную спецификацию ковариата с контролем множественности. Любые отклонения от протокола были задокументированы, включая обоснование и оценку их потенциального влияния на результаты.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Исходные характеристики
Путь отбора пациента показан на рисунке 1. Исходные клиникопатологические характеристики приведены в таблице 1. Медианный возраст составлял 51 год (IQR 45-59) в когорте BC и 52 года (IQR 46-60) в когорте BC-pLC. По сравнению с BC, в когорте BC-pLC было больше первичных опухолей молочной железы и более высокая доля заболеваний T2-T4; узловые метастазы были относительно частыми при B...
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Растущее признание множества первичных видов рака отражает достижения в области визуализации, терапии и лонгитюдного наблюдения, а также увеличение продолжительности выживаемости и взаимодействие генетических и экологическихфакторов 15,16. Используя рутинно собираемые клиникопатологические данные, исследование охарактеризовало рак молочной железы со вторым первичным раком лёгких (BC-pLC) и изучало корреляты возникновения и прогно...
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Авторы заявляют, что у них нет конкурирующих финансовых интересов.
Конкретного финансирования не было получено ни от каких государственных, коммерческих или некоммерческих организаций. Авторы благодарят кафедры патологии и кардиоторакальной хирургии за помощь в рассмотрении дела и обзоре слайдов.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| Коверслипы | Fisher Scientific | 12?545?10 | Используется для покрытия окрашенных срезов тканей для микроскопии |
| DAB хромоген | Термо Фишер Сайентифик | K346711 | Используется для развития цвета в иммуногистохимии |
| Антитела к эстрогеновым рецепторам (ЭР) | Термо Фишер Сайентифик | MA1?10066 | Моноклональное антитело для обнаружения белков ЭР RRID: AB_2252608 |
| Флуоресценция включена? Набор для гибридизации Situ (FISH) | Эбботт | 32?10030 | Для подтверждающих исследований амплификации HER2 |
| Формалин (4% с нейтральным буфером) | Neomarkers, США | – | Для фиксации тканей в гистопатологических исследованиях |
| Антитела к HER2 | Dako / Agilent | A0485 | Моноклональное антитело для обнаружения белка HER2 RRID: AB_2252608 |
| Набор для окрашивания иммуногистохимии | Neomarkers, США | – | Для проведения IHC анализов образцов опухоли |
| Антитела к Ki67 | Dako / Agilent | M7240 | Моноклональные антитела для обнаружения белка Ki67 RRID: AB_2341197 |
| Микротом | Leica | RM2255 | Для сечения парафина вложенных образцов тканей |
| Монтажные носители | Сигма? Олдрич | M2681 | Используется для крепления тканевых секций на стекли |
| Парафин | Сигма-Олдрич | P?6001 | Используется для вложения тканей в гистологии |
| Антитела к прогестероновым рецепторам (PR) | Термо Фишер Сайентифик | MA1?10176 | Моноклональное антитело для обнаружения PR-белка |
| SPSS v23.0 |
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.