ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Авторы выражают благодарность Андреа Акстелл, Сатоши Ито, доктор медицинских наук, Джефф Velotta, доктор медицинских наук, Грант Хойт, Роберт С. Роббинс, доктор медицинских наук, Цзинь Юй, доктор медицинских наук, Тим Дойл, кандидат наук, и Стэнфордского небольшое ядро ​​изображениями животных для оказания технической помощи. Авторы также выражают благодарность А. М. Бикфорд, Inc для поддержки ветеринарное оборудование. Это исследование было поддержано исследовательских грантов от Национального института здоровья (R01 HL-75774, R01 CA098303, R21 HL085743, 1K12 HL087746), Табак Калифорнии соответствующей программы исследований Заболевание Калифорнийского университета (15IT-0257 и 1514RT-0169) , и Калифорнийского института регенеративной медицины (RS1-00183). NH поддерживает общение с Американской ассоциации сердца.

1. Индукция Односторонние ишемии задней конечности <ol><li> Хирургические инструменты, необходимые для этой операции включают в себя: штраф отметил щипцы, пинцеты отметил, весна ножницы, хирургические ножницы, иглодержатель, и втягивающим. Мы делаем наши собственные втягивающим помощью скрепки, потому что это меньше, чем коммерчески доступные преднатяжителями. Стерилизовать эти инструменты до операции по автоклаве или горячей бусинка стерилизатор. Прижигания инструмент и стерильный штраф отметил ватные тампоны также будут необходимы для этой операции. Рекомендуется, чтобы инструменты повторно стерилизуют при советы по мере необходимости во время процедуры. </li><li> Когда инструменты готовы, поместите мышь в камере наркоза индукция содержащие 1-3% изофлуран в 100% кислорода при скорости потока 1L/min. </li><li> Оставьте мышь в индукции камере, пока он не реагирует на внешние раздражители. Затем удалите животное от индукции камеры. Рекомендуется, чтобы избавиться от анестезии окно до открытия крышки, для уменьшения воздействия на оператора в изофлуран. </li><li> Затем поместите животное в лежачем положении на предварительно операционном столе и подключить его к непрерывным потоком изофлуран. Использование электробритвы, удалить волосы из задних конечностей. Нанесите крем для удаления волос тщательно удалить волосы. </li><li> Наведите в положении лежа на драпированные подогревом накладка на операционном столе, и подключить его к непрерывным потоком изофлуран. Расширение и безопасной задних конечностей с ленты. Как только задние конечности находится в безопасности, протирать кожу трех чередующихся бетадин и алкоголя скрабов. На оставшуюся часть хирургической процедуры, используйте рассечение микроскопа 10х или 20х увеличением, чтобы получить увеличенное изображение задней конечности регионе. </li><li> Использование тонких хирургических щипцов и ножниц, делают разрез кожи, примерно 1 см длиной, от колена к медиальной бедра. </li><li> Использование фосфатным буферным раствором (PBS) увлажненных штраф отметил ватных тампонов, слегка смахнуть подкожной жировой ткани, окружающие мышцу бедра. </li><li> Далее, применяют прижигание поперек надрезать и анализировать через подкожную жировую ткань, чтобы выявить основные бедренной артерии. </li><li> Используйте втягивающим, чтобы открыть раны и получить более четкое представление о нижних конечностей сосудов. </li><li> Использование тонких щипцов и штраф отметил ватным тампоном, слегка прокалывают через мембранные бедренной оболочки подвергать сосудисто-нервный пучок. </li><li> Затем, используя чистую множество мелких пинцетом и ватным тампоном, препарировать и отдельных бедренной артерии от бедренной вены и нерв в проксимальных расположение вблизи паха. После вскрытия, проходят нити 7-0 шелковых шва под проксимального конца бедренной артерии. Окклюзии проксимального отдела бедренной артерии помощью двойных узлов. Место галстук на судне в качестве проксимального в ране, как это возможно, чтобы оставить длину галстука и второй промежуточный сегмент, который будет перерезана. </li><li> Отдельные бедренной артерии от бедренной вены на дистальном месте рядом с коленом. Pass прядь 7-0 шва под дистального конца бедренной артерии проксимальнее подколенной артерии. Закупорить сосуд помощью двойных узлов. </li><li> Окклюзии дистальной бедренной артерии с второй набор двойных узлов просто проксимальнее первого набора узлов. Второй комплекс швы будут использованы для захвата артерии во время сделки процедуры. </li><li> Аналогично, для захвата целей, закрывают проксимального отдела бедренной артерии с второй набор двойных узлов только дистальнее первого набора узлов. </li><li> Трансекта сегменте бедренную артерию между дистальной и проксимальной узлов с тонкой отметил ватный тампон и пару весной ножницами. Будьте осторожны, чтобы не проткнуть стену бедренной вены. </li><li> Удалить втягивающим и закрыть разрез использованием 5-0 Викрил швов. Эти швы не должны быть удалены в более позднее время, как они растворяются сами по себе. </li><li> Как только разрез закрыт, место животного в верхней части драпированные подогревом площадку в восстановлении клетку и монитор непрерывно, пока не проснулись. </li><li> После животного восстановилась в течение 1 часа, выполните крови лазерный доплеровский шаг перфузии с целью подтверждения ишемии индукции. </li></ol> 2. Лазерная допплеровская кровотока <ol><li> Для начала перфузии лазерного доплеровского шаг, при наведении в камеру анестезии индукции содержащие 1-3% изофлуран в 100% кислорода при скорости потока 1L/min. </li><li> Оставьте мышь в индукции камере, пока он не реагирует на внешние раздражители. Затем удалите животное от индукции камеры. Рекомендуется, чтобы избавиться от анестезии окно до открытия крышки, для уменьшения воздействия на оператора в изофлуран. </li><li> Место животное на предварительно операционном столе связано с непрерывным потоком изофлуран. Затем удалите волосы от задних конечностей использованием электробритвы следуют удаления волос крем по мере необходимости. </li><li> После удаления волос,место животного на 37 ° C нагретой поверхности в течение 5 минут при непрерывном потоке изофлуран. Монитор температуры ядра для обеспечения euthermia, как изменения температуры будет заметно влиять перфузии. </li><li> Через 5 минут, поместите животное в лежачем положении на антибликовым поглощающих свет поверхности, например, зеленого цвета, ткани, связанные с непрерывным потоком изофлуран. Расширение задних конечностей. </li><li> Затем включите лазерного доплеровского томографа и приобретение программного обеспечения и инициализации программного обеспечения. Укажите размер поля зрения и разрешение. Лучше всего держать в поле зрения и плотность пикселей последовательной между животными, с тем чтобы в будущем анализ проще. </li><li> Откройте новый файл. Пресса начала начать приобретения данных изображений. Как правило, тепловизор автоматически определяет расстояние мышь, но если будет предложено указать расстояние животных в тепловизор. Лазер-шоу границ поля зрения, а затем начать сбор данных. </li><li> После приобретения завершен, изображение начнет показывать диапазон цветов, которые указывают на уровень кровотока в ногах. Цвета могут быть установлены в определенном диапазоне перфузии лучше сравнивать данные между животными. </li><li> Когда сбор данных завершен, сохраните файл. </li><li> Затем вернитесь животное восстановления клетки и мониторинг животного непрерывно, пока не проснулись. </li><li> Для анализа данных, используйте настройки порога в программное обеспечение для анализа вычесть любые фоновые шумы. Порог в 0,2, как правило, в разумных пределах. Выберите 2 регионах, представляющих интерес, или трансформирования, которые покрывают каждый задних конечностей области. Различные ориентиры могут быть использованы для стандартизации ROI между конечностями и животных. Затем определить среднее перфузии и изменчивости в ROI. Разница перфузии и перфузионного соотношения между ишемической конечностей и контроль конечности могут быть легко определены. </li><li> Эта процедура может быть повторена, чтобы следить за изменениями в задних конечностей перфузии с течением времени. В нужное время точки, животное может быть умерщвлены для оценки функции тканей и сравнение с данными перфузии изображения. </li></ol> 3. Представитель Результаты: Анатомия задней конечности сосудистую показано на рисунке 1 2. Представитель диаграмма задних конечностей после бедренной артерии эксплантации показано на рисунке 2. Для подтверждения индукции ишемии на задних конечностей, лазерная допплеровская перфузии анализа изображений демонстрирует значительное уменьшение притока крови к ишемической конечности, по сравнению с контролем конечности, как показано на рисунке 3. <img src="/files/ftp_upload/old/1035_2009_1_26_9/figure1_1035.png" alt="Рисунок 1" width="600" height="406" /> Рисунок 1. Анатомия сосудистой задних конечностей. Звездочки указывают места перевязки для индукции задних конечностей ишемии. <img src="/files/ftp_upload/old/1035_2009_1_20_7/Niiyama_HLI_Fig2.png" alt="Изображение 2" width="600" height="450" /> Рисунок 2. Представителю диаграмма, показывающая анатомию задней конечности после перевязки бедренной артерии в проксимальных и дистальных участков после удаления бедренной артерии. <img src="/files/ftp_upload/old/1035_2009_1_20_8/Niiyama_HLI_Fig3.png" alt="Рисунок 3" width="600" height="256" /> Рисунок 3. Лазерные доплеровские изображения, показывающие кровотока до и после индукции ишемии в левой задней конечности (указано стрелкой).

<ol><li>Huang, N. F., Niiyama, H., De, A., Cooke, J. P., , <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transplantation+and+non-invasive+tracking+of+embryonic+stem+cell-derived+endothelial+cells+for+treatment+of+hindlimb+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Transplantation and non-invasive tracking of embryonic stem cell-derived endothelial cells for treatment of hindlimb ischemia.</a> J Vis Exp. , (2008).</li>
<li>Cook, M. J. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aCook%2C+MJ+%22The+anatomy+of+the+laboratory+mouse%22">The anatomy of the laboratory mouse</a>. , Academic Press. New York. (1976).</li>
<li>Niiyama, H., Kai, H., Yamamoto, T., Shimada, T., Sasaki, K., Murohara, T., Egashira, K., Imaizumi, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Roles+of+endogenous+monocyte+chemoattractant+protein-1+in+ischemia-induced+neovascularization%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Coll.+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Roles of endogenous monocyte chemoattractant protein-1 in ischemia-induced neovascularization.</a> J. Am. Coll. Cardiol. 44, 661-666 (2004).</li>
<li>Dokun, A. O., Keum, S., Hazarika, S., Li, Y., Lamonte, G. M., Wheeler, F., Marchuk, D. A., Annex, B. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+quantitative+trait+locus+%28LSq-1%29+on+mouse+chromosome+7+is+linked+to+the+absence+of+tissue+loss+after+surgical+hindlimb+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">A quantitative trait locus (LSq-1) on mouse chromosome 7 is linked to the absence of tissue loss after surgical hindlimb ischemia.</a> Circulation. 117, 1207-1215 (2008).</li>
</ol>

Есть несколько источников изменчивости, чтобы рассмотреть при планировании и проведении задних конечностей модели ишемии. Во-первых, уровень ишемии может различаться в зависимости от расположения лигирования в отношении этой боковых ветвей. Таким образом, для последовательности модели, животные должны пройти тот же уровень артериального труб. Другой источник изменчивости при ишемической восстановление, связанные с возрастом животных, с маленькими животными (6-8 недель), имеющие более быстрого и полного восстановления темпами, чем старых животных (8-10 месяцев), по оценке гемодинамики (т.е. лазерного доплеровского перфузии) или функциональные (например, тестирование беговой дорожке) мер. Для исследований, в которых один является оценка ангиогенных агентом, он может быть предпочтительнее использовать старых животных, потому что большая разница между группами могут наблюдаться с терапевтического вмешательства. Наоборот, для исследований, в которых один является оценка антиангиогенного фактор, он может быть предпочтительнее использовать более молодых животных, чтобы максимизировать эффект 3 размера. Если выполнены правильно, там должны быть минимальными осложнениями, такими как кровотечение, инфекция, или смертности. Если кровотечение происходит путем случайного нарушения бедренную вену или других судов, умеренное давление со стерильным ватным тампоном наконечником аппликатором или марлю следует наносить на месте кровоизлияния, пока кровотечение не остановится. Животные демонстрируют признаки инфекции следует лечить антибактериальными агентами. Животные, демонстрирующие значительные гангрена, возможно, потребуется beeuthanized. Это осложнение чаще встречается у взрослых животных, а в некоторых штаммов, например, с мышей BALB 4. Кроме того, модель задних конечностей ишемии может привести к легкой или умеренной боли. Таким образом, анальгетики, такие как бупренорфин или carprofen следует вводить по мере необходимости для лечения боли, в соответствии с рекомендациями IACUC. В заключение, мы продемонстрировали простой и воспроизводимый метод для изучения ОРП в мышиной модели задних конечностей ишемии. Модели ишемии задней конечности с лазерным анализ допплер является отличной системой для изучения сосудистой патологии, а также для оценки терапевтических кандидатов.

<table><tbody><tr><td>Хирургические инструменты</td><td>Инструмент</td><td>Fine Science Tools</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Хлопковые тампоны Constix</td><td>Инструмент</td><td>Contec</td><td>SC-4</td><td></td></tr><tr><td>Бетадин (Повидон-йод)</td><td>Реагент</td><td>PDI</td><td></td><td></td></tr><tr><td>70% alcohol</td><td>Реагент</td><td>Kendall</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Фосфатно-солевой буферный раствор</td><td>Реагент</td><td>Invitrogen</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Шелковая нить для швов 7-0</td><td>Инструмент</td><td>Genzyme</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Викриловая нить для швов 5-0</td><td>Инструмент</td><td>Ethicon Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Электробритва</td><td>Инструмент</td><td>GE Healthcare</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Коагулятор</td><td>Инструмент</td><td>Baxter Internationl Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Система лазерного допплеровского сканирования и PeriScan PIM 3</td><td>Оборудование</td><td>Perimed</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

Мышиной модели ишемии задней конечности

Murine Model of Hindlimb Ischemia 

В Соединенных Штатах, заболевания периферических артериальных (PAD) страдают около 10 миллионов человек, а также распространение по всему миру. Медицинские терапии для облегчения симптомов ограничены. Хирургическое или эндоваскулярных вмешательств являются полезными для некоторых людей, но и долгосрочные результаты часто разочаровывают. В результате, существует необходимость разработки новых методов лечения для лечения PAD. Мышиные подготовки ишемии задних конечностей представляет собой модель PAD, и полезно для тестирования новых методов лечения. По сравнению с другими моделями ишемии тканей, таких как ишемическая или мозговой артерии перевязки, перевязки бедренной артерии обеспечивает простую модель ишемической ткани. Другие преимущества этой модели легкость доступа к бедренной артерии и низкой смертности. В этом видео, мы демонстрируем методологии мышиной модели односторонних ишемии hindimb. Конкретные материалы и процедуры создания и оценки модели будет описана, в том числе оценку перфузии конечностей при лазерной допплеровской визуализации. Этот протокол также может быть использована для трансплантации и неинвазивные отслеживания клеток, о чем свидетельствует Huang и соавт. 1.

Хирургическая процедура для индукции односторонних ишемии задних конечностей свидетельствует, с подтверждением ишемии лазерным перфузии Доплера.

В Соединенных Штатах заболеванием периферических артерий (ЗПА) страдают около 10 миллионов человек; данная патология также широко распространена во всем мире. Медикаментозная терапия для ...

В Соединенных Штатах заболевание периферических артерий (ЗПА) поражает около 10 миллионов человек, в частности курильщиков, людей с сахарным диабетом и лиц старше 70 лет. Общая цель данной операции заключается в индуцировании ишемии задних конечностей путем лигирования проксимального и дистального сегментов бедренной артерии. Процедура начинается с анестезии, выбривания шерсти и размещения мыши на операционном столе в положении лежа на спине.Затем делают разрез кожи от колена в сторону медиальной поверхности бедра, обнажая подлежащую бедренную артерию. После этого бедренную артерию осторожно отделяют от бедренной вены. На дистальном и проксимальном участках лигирования завязывают двойные узлы.Затем вырезают сегмент бедренной артерии. Место разреза закрывают швами, после чего животному дают восстановиться после наркоза. Для подтверждения развития ишемии задних конечностей анестезированную мышь помещают в положение лежа на спине.Затем обе задние конечности сканируют с помощью лазерного доплера. Полученное изображение сохраняют и оценивают уровень перфузии. Здравствуйте, я Джон Кук.Я профессор медицины отделения сердечно-сосудистой медицины Стэнфордского университета. Наша лаборатория занимается изучением ангиогенеза и регенерации сосудов. В этом видео двое моих постдокторантов, доктор Nan Wong и Hir Niyama, познакомят вас с моделью ишемии задней конечности мыши, которая является важной моделью заболеваний периферических артерий и часто используется в нашей лаборатории для оценки влияния факторов роста и клеточной терапии на ангиогенез.Мы используем эти процедуры в нашей лаборатории для изучения влияния эндотелиальных клеток, полученных из стволовых клеток, на восстановление сосудов. Итак, приступим. Хирургические инструменты, необходимые для данной операции, включают остроконечный пинцет, pointed forceps, пружинные ножницы, хирургические ножницы, иглодержатель и ретрактор.Мы изготавливаем собственный ретрактор из канцелярской скрепки, так как он меньше коммерчески доступных аналогов. Перед операцией эти инструменты стерилизуют с помощью стерилизатора с раскаленным шариком; также для данной операции потребуются инструмент для коагуляции и стерильные ватные тампоны с тонким наконечником. Когда инструменты будут готовы, поместите мышь в камеру для индукции анестезии, содержащую от 1 до 3% изофлурана в 100% кислороде при скорости потока 1 л/мин.Оставьте мышь в камере индукции до тех пор, пока она не перестанет реагировать на внешние раздражители. Затем извлеките животное из камеры индукции. После этого поместите животное на операционный стол в положение на спине и подключите его к системе непрерывного потока изофлурана.С помощью электрической бритвы удалите шерсть с задней конечности. Нанесите крем для депиляции, чтобы полностью удалить волоски. После бритья мыши выпрямите заднюю конечность и зафиксируйте ее кусочком лейкопластыря.После фиксации задней конечности трижды обработайте кожу чередующимися растворами Бетадина и спирта. С помощью тонкого пинцета и хирургических ножниц сделайте разрез кожи длиной примерно один сантиметр от колена в сторону медиальной поверхности бедра, используя смоченные в фосфатно-солевом буферном растворе (PBS) ватные тампоны с острым концом.Аккуратно удалите кисточкой подкожно-жировую ткань вокруг мышцы бедра. Затем примените коагулятор поперечными движениями, рассекая подкожно-жировую ткань, чтобы обнажить подлежащую бедренную артерию. После этого используйте ретрактор, чтобы раскрыть рану и обеспечить лучший обзор сосудов нижней конечности.С помощью тонкого пинцета и ватного тампона с острым концом осторожно проколите перепоночный влагалище бедренного сосуда, чтобы обнажить нейроваскулярный пучок. Затем, используя новый чистый набор тонкого пинцета и ватного тампона, препарируйте и отделите бедренную артерию от бедренной вены и нерва в проксимальной области вблизи паха. После препарирования проведите нить шелковой шовной нити 7-0 под проксимальный конец бедренной артерии.Перекройте проксимальный отдел бедренной артерии с помощью двойных узлов. Наложите лигатуру на сосуд максимально проксимально в ране, чтобы оставить достаточную длину для второй лигатуры и промежуточного сегмента, который будет пересечен. Отделите бедренную артерию от бедренной вены в дистальной области ближе к колену.Проведите нить шва 7-0 под дистальный конец бедренной артерии проксимальнее подколенной артерии. Перекройте сосуд, завязав двойные узлы. Перекройте дистальный отдел бедренной артерии второй серией двойных узлов непосредственно проксимальнее первой серии узлов.Этот второй набор швов будет использоваться для захвата артерии во время процедуры трансекции. Аналогично, для захвата перекройте проксимальную часть бедренной артерии вторым набором двойных узлов сразу дистальнее первого набора узлов. Пересеките сегмент бедренной артерии между дистальным и проксимальным узлами, используя тонкий остроконечный ватный тампон и пружинные ножницы.Соблюдайте осторожность, чтобы не проколоть стенку бедренной вены. Удалите ретрактор и зашейте разрез швом 5-0 Quill. После закрытия разреза поместите животное в клетку для восстановления и наблюдайте до пробуждения. После того как животное восстановится в течение одного часа, приступайте к лазер-допплеровскому измерению перфузии крови.Шаг по подтверждению индукции ишемии. Чтобы начать этап измерения лазерной допплеровской перфузии, поместите мышь в камеру для индукции анестезии, содержащую от 1 до 3% изофлурана в 100% кислороде при скорости потока 1 л/мин. Оставьте мышь в камере индукции до тех пор, пока она не перестанет реагировать на внешние раздражители.Затем извлеките животное из индукционной камеры и поместите его на предоперационный стол с непрерывным потоком изофлурана. Затем удалите шерсть с задней конечности с помощью электрического триммера, при необходимости используя крем для депиляции. После удаления шерсти поместите животное на поверхность с подогревом до 37 °C на пять минут при непрерывном потоке изофлурана.Через пять минут поместите животное в положение на спине на нерефлектирующую светопоглощающую поверхность, например, на ткань зеленого цвета, подключенную к системе непрерывного потока изофлурана. Вытяните задние конечности. Затем включите лазерный допплеровский имиджер и программное обеспечение для сбора данных, после чего инициализируйте программу.Укажите размер поля зрения и разрешение. Рекомендуется поддерживать одинаковое поле зрения и плотность пикселей для всех животных. Чтобы облегчить последующий анализ, откройте новый файл.Нажмите кнопку «Пуск», чтобы начать сбор данных изображения. При появлении соответствующего запроса укажите расстояние от животного до имиджера. Лазер отобразит границы поля зрения, после чего начнется сбор данных.После завершения сбора данных на изображении начнет отображаться цветовая гамма, указывающая на уровень кровоснабжения конечностей. Цвета можно настроить на определенный диапазон перфузии. Для более точного сравнения данных между животными по окончании сбора данных сохраните файл, затем верните животное в клетку для восстановления и непрерывно наблюдайте за ним до полного пробуждения.Для анализа данных используйте функцию настройки порога в программном обеспечении для анализа, чтобы вычесть фоновый шум. Обычно разумным значением порога является 0,2. Выберите две области интереса (ROI), охватывающие область каждой задней конечности.Для стандартизации ROI между конечностями и животными можно использовать различные ориентиры, после чего определяют среднюю перфузию и вариабельность в ROI. Затем можно легко рассчитать разницу в перфузии и коэффициент перфузии между ишемизированной и контрольной конечностями. Данную процедуру можно повторять для мониторинга изменений перфузии в задних конечностях.Спустя определенное время, в выбранный временной точке, животное можно подвергнуть эвтаназии для оценки функции тканей. В сравнении с данными перфузионной визуализации, здесь представлена репрезентативная схема задней конечности после эксплантации бедренной артерии. Шовные нити обозначают места проксимальной и дистальной лигатуры.При аккуратном проведении операции кровопотеря минимальна, и процедура может быть завершена менее чем за один час. Ниже представлены результаты анализа изображения лазерной допплеровской перфузии. На снимке слева показана перфузия обеих конечностей до индукции ишемии.На изображении справа показана перфузия обеих конечностей после индукции ишемии левой задней конечности. Интенсивность цвета на изображении указывает на объем кровотока.По сравнению с контрольной конечностью, ишемизированная конечность имеет очень слабую окраску, что свидетельствует о резком снижении кровотока. Используя эти данные, программное обеспечение может количественно определить среднюю перфузию в ишемизированной и контрольной конечностях для расчета разности и соотношения перфузии. Таким образом, полученные результаты подтверждают индукцию ишемии в задней конечности.Мы только что продемонстрировали, как индуцировать одностороннюю ишемию задних конечностей на мышиной модели и подтвердить развитие ишемии с помощью лазерной допплеровской перфузии крови. Модель ишемии задних конечностей с анализом методом лазерной допплеровской визуализации представляет собой отличную систему для изучения сосудистых патологий и оценки потенциальных терапевтических средств. За данной процедурой может следовать трансплантация и неинвазивный трекинг клеток, что демонстрируется в другом видео JoVE, представленном Huang et al.При выполнении этих процедур важно соблюдать осторожность, чтобы не проколоть стенку бедренной вены при иссечении бедренной артерии ножницами с зажимом. Также для обеспечения согласованности модели выраженной ишемии используйте одинаковое место лигирования для всех животных в эксперименте. На этом всё.Благодарим за просмотр и желаем успехов в ваших экспериментах.

Research

JoVE Journal

Biology

Биология

Отсутствие механистического понимания с повреждением спинного мозга ишемии-реперфузии препятствовало дополнительные вспомогательные вещества для предотвращения параплегия следующее высокого риска аорты операций. Таким образом, развитие животных моделей является обязательным условием. Эта рукопись демонстрирует воспроизводимый нижних конечностей паралич следующий грудной аорты окклюзии в мышиной модели.

Воспроизводимость Параплегия по торакальной окклюзии аорты в мышиной модели спинного мозга ишемии

Введем хирургический метод, чтобы побудить экспериментальной ишемии / реперфузии (I / R) травмы имитировать инфаркт миокарда (ИМ) в мышиных моделях, что позволяет для большей ясности в позиционировании перевязки на левой передней нисходящей артерии (ПНА), чтобы увеличить воспроизводимость из MI экспериментов на мышах.

Мышиной модели ишемии миокарда-реперфузии через перевязки левой передней нисходящей артерии

Хирургическая индукция ишемии задних конечностей у мышей полезна для изучения ангиогенеза, однако она нарушена у некоторых инбредных линий мышей, которые демонстрируют выраженный ишемический некроз тканей. Описаны методы индуцирования подострой ишемии конечностей с использованием амероидных констрикторов для обхода этой проблемы путем индукции постепенной артериальной окклюзии.

Методы острой и подострой мышиной ишемии задней конечности

Мы описываем мышиную модель инсульта, вызванного окклюзией средней мозговой артерии с использованием силиконового шва. Протокол может быть применен для индуцирования постоянной окклюзии или временной ишемии с последующей реперфузией.

Индукционная ишемического инсульта и ишемии-реперфузии у мышей с помощью средней артерии Occlusion Техника и визуализация площади инфаркта

Мы описываем хирургическую процедуру, которая используется для индуцирования периферического лечения кроликов с гиперлипидемией и сахарным диабетом. Эта операция действует как Доклиническая модель для условий, испытаных в болезни периферических артерий у пациентов. Ангиография также описывается как средство для измерения степени введения в себя и восстановления перфузии.

Доклиническая модель иабеза Хинд конечностей у диабетических кроликов

Здесь представлена критическая экспериментальная модель ишемии задних конечностей, за которой следует батарея функциональных, гистологических и молекулярных тестов для оценки эффективности ангиогенной терапии.

Оценка терапевтического ангиогенеза в модели Murine Hindlimb Ischemia

Здесь мы описываем хирургическую процедуру, показывающую, как достичь постоянной перевязки лево-передней нисходящей коронарной артерии у мышей. Эта модель имеет большое значение для исследования патофизиологии инфаркта миокарда и сопутствующих биологических процессов.

Модель инфаркта миокарда С использованием постоянной лиги циферблат левой передней спусковой коронарной артерии

В данной статье демонстрируется эффективный хирургический подход к установлению острой ишемии у мышей с небольшим разрезом. Этот подход может применяться большинством исследовательских групп без каких-либо лабораторных обновлений.

Модифицированная хирургическая модель ишемии задних конечностейу мышей с использованием миниатюрного разреза

Здесь мы описываем простой и воспроизводимый метод, который может индуцировать инфаркт миокарда или ишемически-реперфузионное повреждение миокарда у мышей путем прецизионного перевязки левой передней нисходящей коронарной артерии с помощью микроманипуляций.

Индукция инфаркта миокарда и ишемически-реперфузионного повреждения миокарда у мышей

Настоящий протокол описывает уникальную, клинически значимую модель заболевания периферических артерий, которая сочетает электрокоагуляцию бедренной артерии и вен с введением ингибитора синтазы оксида азота для индуцирования гангрены задних конечностей у мышей FVB. Внутрисердечная перфузия DiI затем используется для трехмерной визуализации сосудов подножки с высоким разрешением.

Трехмерная визуализация высокого разрешения сосудистой оболочки подножки в модели гангрены заднего скольжения

Описано, как создать широко используемую хирургическую модель ишемически-реперфузионного повреждения кишечника (ИРИ) у грызунов. Процедура предполагает окклюзию верхней брыжеечной артерии с последующим восстановлением кровотока. Эта модель полезна для исследований, изучающих окклюзионные причины кишечного ИРИ как в ветеринарии, так и в медицине человека.

Модель ишемически-реперфузионного повреждения кишечника через окклюзию верхней брыжеечной артерии на грызунах

Узнайте метод хирургической лигатуры бедренной артерии для создания модели ишемии задней конечности у мышей с подтверждением лазерной допплеровской визуализацией перфузии. Этот подход позволяет исследовать периферическую артериальную болезнь и ангиогенез.

Мышиной модели ишемии задней конечности

Больше видео