Синхронизация нематод: метод получения популяций червей на идентичных стадиях развития

-Начните с размещения самоопыляющихся червей на их последней личиночной стадии на тарелках, засеянных бактериальным источником пищи. Позвольте личинкам развиться во зрелых взрослых особей, пока яйца не появятся в изобилии внутри червей и не будут отложены на тарелках. Вымойте тарелки с буфером, чтобы собрать яйца и червей.

Далее замените буфер раствором отбеливателя, который растворяет взрослых червей. Защищенные яичной скорлупой, эмбрионы выдержат эту обработку, хотя они будут находиться на разных стадиях развития. Затем замените отбеливатель буфером и дайте эмбрионам развиться. Поскольку личинки вылупляются из своей яичной скорлупы при отсутствии пищи, развитие приостанавливается на первой личиночной стадии.

Переложите личинок в тарелки с пищей, чтобы возобновить развитие. Это будет стимулировать синхронное продвижение через оставшиеся личиночные стадии.

Когда черви достигнут последней личиночной стадии, переместите их в тарелки с пищей и FUdR – ингибитором синтеза ДНК, препятствующим производству потомства. Непрерывное развитие в присутствии FUdR приводит к образованию популяции стерильных взрослых червей. В этом эксперименте мы синхронизируем популяцию нематоды C. elegans.

-Для