дрозофила Анализ нор и туннелирования: метод оценки гипоксии тканей у личинок мух

- Чтобы установить клетку для сбора эмбрионов, используйте агаровые пластины из виноградного сока, дополненные свежей дрожжевой пастой, и поместите пластины на клетки, содержащие самцов и самок мухи дрозофилы соответствующего генотипа. Запах от дрожжей и виноградного сока привлекателен и способствует откладыванию яиц самками. Дайте отложить яйца на определенный срок. Затем удалите взрослых особей и инкубируйте зародышевые пластины в течение 24 часов до получения личинок первого возраста. Затем аккуратно перенесите несколько отдельных личинок из тарелки с виноградным соком на тестовую пластину, состоящую только из агара, где вырезано отверстие в агаре в центре пластины и заполнено дрожжевой пастой.

Молодые личинки должны питаться, чтобы набрать массу тела для развития, поэтому они зарываются в источник пищи — дрожжевую пасту. По мере развития личинки вступают в фазу блуждания и уходят от пищи в поисках места для окукливания. Чтобы оценить гипоксию, изучите схемы туннелирования, которые личинки образуют в субстрате. Отсутствие или недостаточное туннелирование является признаком кислородного голодания. В примере протокола мы увидим, как настроить анализ на закапывание и туннелирование