Тест на лазание по мухам: метод проверки общей локомоции у Drosophila melanogaster

-Во-первых, получить определенное количество взрослых дрозофил. Испытательная камера для восхождения состоит из двух пробирок, скрепленных скотчем. Один из таких флаконов должен быть помечен линией.

Без анестезии углекислым газом, которая может ухудшить поведение при восхождении, перенесите определенное количество мух в испытательную камеру. Дайте мухам восстановиться в течение заранее определенного периода времени. Опустив отмеченную сторону камеры, сильно постучите по камере по коврику для мыши, расположенному на твердой поверхности. Это заставит мух опуститься на дно камеры. В тесте на восхождение используется естественная склонность дрозофилы подниматься вверх против силы тяжести, поведение, называемое негативным геотаксисом.

Во время испытания мухи не должны подвергаться воздействию прямых солнечных лучей, потому что мухи могут демонстрировать поведение фототаксиса или движение в ответ на световой стимул. Записывайте количество мух, которые достигают или пролетают линию. Затем получите процент прохождения теста, разделив это число на общее количество протестированных мух. Дайте мухам восстановиться, прежде чем повторять испытание. В этом примере мы будем наблюдать анализ лазания мух, используемый для оценки моторной функции дрозофилы после химического мутагенеза.

-Для начала соберите гомозиготных мух из линий, принадлежащих к мутагенизированной коллекции мутантов дрозофилы ENU, картированной на вторую хромосому. Переверните мух в возрасте от 10 до 12 дней в испытательную камеру без анестезии по одной линии за раз и дайте им восстановиться в течение пяти минут.

Пятисантиметровой линией, отмеченной стороной вниз, с усилием постучите по камере три раза по коврику для мыши, помещенному на твердую поверхность, чтобы все мухи начали пробу внизу. Наблюдайте за передвижением мухи в течение 10 секунд. Запишите количество мух, которые достигают или пересекают пятисантиметровую линию за это время, а также общее количество протестированных мух. Подождите минуту, прежде чем начинать вторую пробную версию. Повторите не менее трех пробных повторений в каждой строке.