дрозофила Диссекция добавочной железы у мужчин: метод выделения вторичных клеток

0 просмотров2:59 мин • April 30th, 2023

- Под диссекционным микроскопом и в средах, дополненных сывороткой, удалите репродуктивный тракт у каждой мухи с помощью щипцов. Во-первых, удалите части пищеварительного тракта, которые могли сопровождать репродуктивный тракт. Чтобы изолировать добавочные железы и семявыводящий проток, удалите яички, эякуляторную луковицу и терминалии. Промойте салфетку в течение одной-двух минут в PBS, чтобы удалить сыворотку. Затем перенесите его в раствор диссоциации.

Чтобы подвергнуть клетки внутри желез воздействию диссоциативного раствора, удерживайте центр каждой железы щипцами и разрежьте железу парой острых щипцов. Удалите проксимальную часть железы и семявыводящий проток, чтобы оставить позади дистальный конец железы, содержащий редкую вторичную популяцию клеток, ответственную за секрецию белков, участвующих в спаривании. Наконец, перенесите наконечники дополнительных желез в микроцентрифужную пробирку для подготовки к сбраживанию. В следующем протоколе мы препарируем добавочные железы для выделения вторичных клеток для анализа транскриптома.

- Перед началом процедуры разрежьте и обжарьте круглые широкие 200 микролитровые наконечники для работы с железами и пропустите отверстие нескольких наконечников объемом 1000 микролитров рядом с пламенем менее чем на одну секунду, чтобы сузить отверстия. Затем отсортируйте модифицированные кончики от более узких к более широким в зависимости от скорости их аспирации. Для вскрытия добавочной железы поместите от 20 до 25 самцов дрозофилы в стеклянную посуду на льду и с помощью щипцов и диссекционного микроскопа удалите репродуктивный тракт одного самца мухи.

Очистите пару добавочных желез от всех остальных тканей, включая яички и эякуляторную луковицу, и перенесите добавочные железы на стеклянную пластину, содержащую среду с добавлением сыворотки комнатной температуры. Когда будет собрано 20 пар придаточных желез, промойте железы в посуде PBS в течение одной-двух минут при комнатной температуре. По окончании промывания переложите железы в свежеприготовленный диссоциационный раствор, а острыми щипцами под препарирующим микроскопом крепко защипните середину железистой доли.

С помощью второй пары щипцов разрежьте ткань острым кончиком, чтобы отделить проксимальную область добавочной железы и семявыводящий проток от части железы, содержащей вторичные клетки. Затем с помощью предварительно влажного пламени с закругленным широким наконечником пипетки объемом 200 микролитров перенесите сальники в трубку объемом 1,5 миллилитра.

15:19

Влияние Мужской аксессуар железы Продукты на откладки яиц в брюхоногих моллюсков

Похожие видео

0 Просмотры

08:35

Экс естественных Культура Drosophila куколки яичка и одного мужчины зародышевой линии кисты: Вскрытие, Imaging, и фармакологическому лечению

Похожие видео

0 Просмотры

08:05

Подготовка Drosophila Ларваль и Pupal Тесты для анализа клеточного отдела в прямом эфире, Intact Ткани

Похожие видео

0 Просмотры

15:01

Препарирование Oenocytes от взрослых Дрозофилы

Похожие видео

0 Просмотры

03:13

Изоляция Дрозофилы Семенники

Похожие видео

0 Просмотры

02:23

Drosophila melanogaster Диссекция яичников: техника препарирования тканей ex vivo

Похожие видео

0 Просмотры

04:20

Вскрытие личиночных лимфатических желез: выделение органа, продуцирующего гемоциты дрозофилы

Похожие видео

0 Просмотры

04:07

Вскрытие личиночных кольцевых желез: выделение эндокринных органов развития у дрозофил

Похожие видео

0 Просмотры

10:30

Цитологического анализа сперматогенеза: Живые и Исправлены Препараты

Похожие видео

0 Просмотры

11:49

Методы Изучить лимфа железой и гемоцитах в

Похожие видео

0 Просмотры

Последнее обновление: 29 августа 2026