Химическая сушка: биологическая подготовка образцов для сканирующей электронной микроскопии (СЭМ)

- Для начала начните с обезвоживания и сушки неподвижного образца, чтобы уменьшить искажение образца, вызванное удалением газов и жидкой воды при пониженном рабочем давлении обычных сканирующих электронных микроскопов (СЭМ).

Чтобы обезвожить образец, промойте его с возрастающей концентрацией этанола в воде до тех пор, пока не будет достигнут 100% этанол. Затем повторите этот процесс с химическим осушителем в этаноле до тех пор, пока образец не будет промыт чистым осушителем. Переложите образец и сушильный агент в выпаривающую чашку. Накройте его минимальным количеством дополнительного сушильного средства и дайте высохнуть в вытяжном шкафу в течение ночи.

Далее закрепите подготовленный образец на верхней части заглушки микроскопа с помощью угольной клейкой ленты. Наконец, нанесите серебряную краску на края заглушки, затем от края заглушки к каждому из образцов, чтобы уменьшить накопление избыточных электронов, которые могут привести к нежелательным артефактам изображения.

В этом эксперименте плодовых мушек, Drosophila melanogaster, готовят к анализу СЭМ с использованием осушителя HMDS.

- Для приготовления Drosophila melanogaster погрузите обезболенных мух в 1 миллилитр фиксатора на