Подсчет колониеобразующих единиц (КОЕ): количественная оценка бактерий из тел мух

- Сначала соберите мух на нужной стадии развития и поместите их в стерильную трубку. Чтобы подсчитать только внутреннюю микробиоту, простерилизуйте внешнюю часть мух, погрузив их в 70% этанол. Чтобы измерить как внутреннюю, так и внешнюю микробиоту, пропустите этот этап стерилизации. Далее измельчите мух в небольшом объеме бактериальную питательную среду с помощью керамических шариков и тканевого гомогенизатора, либо вручную с помощью пестика. Следует следить за тем, чтобы не занести бактерии из внешних источников, чтобы не допустить загрязнения образцов.

Теперь у вас должна получиться однородная смесь, содержащая бактерии, которые можно культивировать. Увеличьте объем гомогената с помощью жидкой бактериальной среды. Выполняйте последовательные разведения гомогената и наносите постоянный объем этих разведений на подходящую твердую среду для роста ваших бактерий. По мере роста бактерий на тарелке будут образовываться колонии. Найдите разведение, которое имеет диапазон от 10 до 100 колоний, чтобы определить колониеобразующие единицы, или КОЕ, образца.

В примере протокола мы будем инокулировать стерильных мух гнотобиотиком или определенной бактериальной культурой, а также собирать и и