Энциклопедия экспериментов JoVE
Биология
0 просмотров • 4:39 мин. • April 30th, 2023
- Начните с пульсации дрозофилы под наркозом вместе с буфером в блендере, чтобы разбить мух на мелкие кусочки. Процедите смесь через сетку, чтобы удалить крупные части тела. Затем дайте яйцам утонуть, в то время как более крупные фрагменты останутся на поверхности и могут быть удалены.
Повторите этот процесс, используя меньшую сетку, чтобы удалить лишний мусор. Соберите яйца во флакон, и если яйца должны быть обработаны лекарством, сделайте это на этом этапе. Далее удалите жидкость и замените ее на фиксирующую. Добавьте гептан, чтобы помочь фиксатору проникнуть в оболочку, окружающую яйцеклетку.
Затем смойте фиксатор с помощью PBS. Чтобы окрасить ооциты, удалите защитные внешние мембраны, чтобы обеспечить проникновение антител. Нанесите ооциты пипеткой на матовую часть предметного стекла. Наденьте покровную накладку на яйца и осторожно скатайте ее вперед и назад, чтобы механически отделить хорион и вителлиновую оболочку от яйца. Теперь ооциты готовы к окрашиванию.
В примере протокола мы будем готовить ооциты в мейозе I для окрашивания и визуализации веретенообразного аппарата.
- Для начала предварительно разрежьте внутреннюю часть 5-миллилитровой пробирки и проведите пипетку Пастер
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео