Диссекция комплекса глаз-мозг у куколок мух: метод выделения ткани сетчатки

- Для начала закрепите куколку плодовой мушки спиной, или спиной, стороной вверх. Удалите оперкулум или передний конец куколки, чтобы обнажить голову животного. Продолжайте открывать куколку, разрезая и снимая оболочку. После освобождения накройте рассеченную куколку PBS, чтобы избежать высыхания. Сделайте чистый поперечный разрез через грудную клетку и удалите заднюю часть туши.

Чтобы обнажить комплекс глаз-мозг, который включает в себя две сетчатки, прикрепленные к зрительным долям, начните отрывать эпителий от разрезаемого края грудной клетки и продолжайте постепенно вскрывать капсулу головы. Затем осторожно направьте комплекс глаз-мозг в сторону от остатков капсулы головы.

В примере протокола мы увидим демонстрацию рассечения куколки, глаза-мозга, используемого для выделения ткани для различных последующих анализов.

- Поместив куколок дрозофилы на черную тарелку для препарирования, положите свежий кусок двустороннего скотча на чашку для препарирования подальше от куколок и с помощью щипцов осторожно положите куколки тыльной стороной вверх на ленту.

Поместите чашку под стереомикроскоп и с помощью щипцов удалите оперкулум каждой куколки. Используйте ножницы для микродиссекции, чт