С. elegans Экструзия гонад: техника быстрого рассечения

0 просмотров • 2:59 мин. • April 30th, 2023

- В пробирке, содержащей буфер М9, собрать до 150 червей-гермафродитов на нужной стадии развития. Удалите бактерии из червей путем промывки буфером M9 и центрифугирования образца.

Просмотрите пробирку под препарирующим микроскопом при удалении надосадочной жидкости, чтобы предотвратить потерю образца. Переложите червей в стеклянную посуду с минимальным объемом буфера M9. Добавьте левамизол для обезболивания глистов.

Найдите голову червя и глотку, или переднюю кишку, которая содержит две луковицевидные структуры. С помощью двух иголок прорезал червя за глоткой. Убедитесь, что вы завершили диссекцию быстро, чтобы не затронуть ткани.

Как только кутикула нарушается, два плеча гонады выдавливаются или выталкиваются из тела из-за внутреннего давления червя.

В этом примере мы будем препарировать гонады взрослых червей для иммунофлуоресцентного анализа.

- Выберите от 100 до 150 червей на желаемой стадии развития и соберите их в микроцентрифужную пробирку объемом 1,5 миллилитра, содержащую 100 микролитров буфера M9. Затем заполните микроцентрифужную пробирку еще 900 микролитрами буфера M9 и центрифугируйте его в 1000 раз больше g в течение 1 минуты при комнатной температуре.

Под препарирующ

Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео

Войти

Больше видео

Диссекция гонад C. elegans