Микроинъекции живых эмбрионов дрозофилы: ранняя доставка реагентов развивающемуся эмбриону

- Соберите живые эмбрионы дрозофил и удалите их непрозрачные хорионы. Затем на стеклянный покровный лист нанесите линию гептанового клея, который представляет собой клей для ленты, растворенный в жидком гептане. Чтобы иметь возможность работать с уже дехорионированными эмбрионами, аккуратно выровняйте образцы в ряд на клее.

Перенесите покровное стекло в камеру обезвоживания, чтобы частично высушить эмбрионы. Это предотвратит утечку цитоплазмы во время или после инъекций. Затем снимите покровную крышку и накройте эмбрионы галоидоуглеродным маслом, чтобы предотвратить дальнейшее обезвоживание и в то же время позволить кислороду диффундировать в эмбрионы.

Для выполнения микроинъекции используйте систему микроинъекций на совместимом микроскопе. Глядя через кусочки глаз, определите как эмбрионы, так и иглу, предварительно загруженную раствором для инъекций. Разломайте иглу и убедитесь, что она дает однородные капли жидкости соответствующего размера. Затем введите иглу внутрь эмбриона и введите соответствующий объем. Достаньте иглу, и приступайте к следующей, повторяя инъекцию для оставшихся эмбрионов.

В примере протокола мы увидим демонстрацию микроинъекции эмбриона дрозофилы для исслед